核酸到底是怎么检测的
2022-05-30Eggy&安琪
Eggy&安琪
新冠肺炎出现后,有多种方法可以用来检测人是否感染了新冠病毒,其中既准确又方便的一种检测方法就是“核酸检测”。核酸检测结果阴性为正常,阳性则相反。
核酸检测是如何操作的呢?
第一步,医护人员会采集我们的鼻拭子或咽拭子——用一根长长的棉签擦拭鼻腔后壁或咽后壁及两侧咽扁桃体位置的分泌物。
采集鼻拭子会让大部分人很难受。采集咽拭子更方便,而且给人带来的刺激更小。但对医护人员来说,采集鼻拭子比采集咽拭子的暴露风险更低,安全系数更高。
第二步,迅速将拭子头伸进试管里的细胞保存液中,折断棉签后立刻拧紧管盖。
通常情况下,如果患者感染了新冠病毒,拭子应该能够从鼻咽中提取到病毒。然而,有时病毒可能正在远离棉签刮蹭位置的部位繁殖,或者采集位置周围还没有足够多的病毒。所以核酸检测结果阴性有可能意味着没有感染新冠病毒,但也可能意味着感染了病毒,只是处于潜伏期,病毒还不能被检测出来,或者采集时拭子刮错了地方。
这就是为什么我们需要进行多次核酸检测。如果连续多次核酸检测结果都呈阴性,通常就说明我们没有感染新冠病毒。
第三步,负责采集拭子的医护人员会将采集到的样本先放进密封的袋子,再装进带有“病原微生物检测样本”“送检专用”标志的密封生物运输手提箱中,由身着防护服的专人负责,乘坐封闭隔离的专车,按照规定的路线,在规定的时间内将样本送到检测机构。
这样严格操作的原因是,核酸样本具有比较复杂的分子结构,对温度非常敏感。假如在运输过程中环境条件不符合要求,就可能导致样本丧失活性,那样拭子就白采集了。
另外,核酸样本是高风险样本,如果在转运环节发生泄漏、污染等现象,会严重威胁医护人员的生命健康。
送检的步骤环环相扣,最后,核酸样本会被送到特定的核酸检测机构。到达检测机构/方舱实验室后,医护人员会先对转运箱进行喷洒消毒,再对里面的标本密封袋进行终末消毒,然后拆开密封袋,将样本试管按顺序取出,上架排好,录入所有试管信息。
接下来,就是发生在实验室中的核酸检测工作。
核酸检测是一项高度灵敏且精密的实验,每一个方舱都是专门为核酸检测建立的,符合特殊的环境要求。核酸样本的检测基本上全程都需要由检测人员手工操作。
第一步,就是将核酸样本中的病毒遗传物质(核糖核酸)提取出来。检验人员需要戴着双层乳胶手套,从生物安全柜上谨慎地吸取样本,然后将其加入核酸提取板孔中,再将核酸样本安全地放回原处。
在这一过程中,检验人员与新冠病毒可能只隔着两层手套的距离——2毫米。
第二步就到了标本扩增环节。简单来说,扩增的原理就是让病毒中的遗传物质快速以指数倍增长,一个变两个,两个变四个,四个变八个……直到百万甚至百亿倍。
这样做的目的是让标本中可能存在的病毒含量增多,從而可以更容易地检测到新冠病毒。
扩增过程需要通过PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链反应)完成。PCR是20世纪80年代中期发展起来的一项体外核酸扩增技术,其发明者因此项技术在1993年被授予诺贝尔奖。
第三步就是将扩增后的PCR产物,即DNA片段放入专门的仪器中开始检测。这里有一个关键指标是Ct值。Ct值指的是扩增循环次数。
因为病毒扩增时是以2的指数倍增长,在PCR循环中,随着循环数增大,病毒数量也不断增多,当Ct值达到检测所需的最低值,并且反应体系中的RNA病毒数引发了荧光反应时,就可以判定为阳性。
简单来说,Ct值越低,说明阳性越强;Ct值越高,说明阳性越弱。
根据国家卫健委最新发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第九版)》,新冠病毒感染阳性的判定标准是Ct值<35时荧光反应为阳性。
一般来说,核酸检测的准确率可以达到95%以上。但是由于各种原因,检测结果还是会出现假阳性的情况,所以初筛实验室会向疾控中心报告“疑似阳性”,然后根据疾控中心的要求转运原管标本以供复核。
核酸检测过程到这里还没有结束,检测人员还需要对所有的扩增结果进行分析,例如同样本检测的阴阳性质控结果是否在控、基线设置及样本结果是否正常等。
当阴阳性质控全部符合检测要求时,检测人员还需要排除样本假阴性、假阳性的可能,同时对异常结果样本及时进行复核,在所有结果都核对无误后,最终报告才能上传。