黄根化学成分的研究

李依桐，文楚毛，马镜涵，施 敏，杨光忠，王德彬

(1.中南民族大学 药学院，湖北 武汉 430074;2.中南民族大学 生物医学工程学院，湖北 武汉 430074)

1 引言

黄根(Prismatomeristetrandra(Roxb.)K.Schum)是茜草科植物三角瓣花的根，又名南山花，狗骨木，在海南、广东、云南、广西等省区均有分布。其性微苦，味凉，具有利湿退黄，软坚散结，凉血止血，祛瘀生新之功效，在广西民间常用其治疗慢性肝炎[1]。现代药理学研究表明，黄根具有祛痰平喘[2]，保护巨噬细胞[3]，预防及治疗矽肺[4,5]，抗肝纤维化[6]，治疗肝炎等作用[7]。据文献报道，从该植物中分离出的化合物主要包括蒽醌类，有机铝和一些微量元素[8，13]。目前，对黄根的化学成分研究不多，为进一步探究黄根的药效物质基础，促进该民族药物的开发利用，本文运用溶剂提取法，正相硅胶柱色谱及半制备高效液相色谱法等多种现代提取分离手段，从黄根的乙醇提取物中分离得到6个化合物，包含4个蒽醌类化合物和2个齐墩果烷型三萜。根据其理化性质和波谱数据分别鉴定为2-甲基蒽醌 (1)，甲基异茜草素-1-甲醚 (2)，2-甲基-3-羟基蒽醌 (3)，甲基异茜草素 (4)，3β-乙酰基齐墩果醛 (5)，3β-乙酰基齐墩果酸 (6)。

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

三用紫外分析仪(ZF-I型，上海顾村电光仪器)；旋转蒸发仪(RE2000A，上海亚荣生化仪器)；循环水式多用真空泵(SHB-IIIA型，上海贝菌科技)；高效液相色谱仪(Ultimate 3000 半制备型，美国戴安，DAD检测器)；色谱柱(半制备型，YMC-pack ODS-A，250 mm×10 mm，5 μm)；核磁共振波谱仪(AM-600/500型，德国布鲁克)；氮吹浓缩装置

(MTN-2800D型，天津奥特赛恩斯仪器)；正相硅胶(200～300目，青岛海洋化工场)；硅胶板(GF 254型，青岛海洋化工厂)；分析纯试剂(国药集团)；色谱纯试剂(昌泰兴业)；硫酸香草醛显色剂(硫酸、香草醛、乙醇、水分别为8 mL、0.5 g、10 mL、20 mL)。

2.2 提取与分离

取干燥黄根3.5 kg粉碎，室温下用70%乙醇浸提3次，每次24 h。提取液经减压抽滤后，减压浓缩，得到乙醇提取物(400 g)。将乙醇提取物分别用乙酸乙酯，正丁醇萃取3次，得到乙酸乙酯组分(35 g)和正丁醇组分(32 g)。乙酸乙酯组分经正相硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯(15∶1,9∶1,8∶2,1∶1)为洗脱剂梯度洗脱，经TLC检测合并后得到10个组分(Fr.1～Fr.10)。Fr.4经HPLC反复制备[流动相为V(甲醇)∶V(水)=85∶15，流速3mL/min]得到化合物1(tR=9.83 min)。Fr.10经HPLC反复制备[流动相为V(甲醇)∶V(水)=81∶19，流速3 mL/min]得到化合物2(tR=8.64 min)、化合物3(tR=10.423 min)和化合物4(tR=17.277 min)。Fr.3(198.3 mg)，Fr.6(372.2 mg)重结晶后得到化合物5和化合物6。化合物1～6的结构如图1所示。

图1 化合物1～6的化学结构式

3 结构鉴定

化合物1:黄色粉末。1H NMR (600 MHz,CD3OD)δH8.10 (1H,s,H-1),7.70 (1H,d,J=7.8Hz,H-3),8.18 (1H,d,J=7.8Hz,H-4),8.28 (2H,dd,J=5.4,9.0Hz,H-5,H-8),7.87 (2H,dd,J=5.4,9.0Hz,H-6,H-7),2.55 (3H,s,2-CH3);13C NMR(150MHz,CD3OD)δC128.3 (C-1),147.0 (C-2),136.2 (C-3),128.0 (C-4),127.9 (C-5,C-8),135.4 (C-6),135.3 (C-7),184.4 (C-9),184.1 (C-10),134.9 (C-1a),134.8 (C-4a),132.6 (C-5a),128.3 (C-8a),21.9 (2-CH3).上述数据与文献[9]对照基本一致，故鉴定化合物1为2-甲基蒽醌。

化合物2：黄色粉末。1H NMR (600 MHz,DMSO-d6)δH7.48 (1H,s,H-4),8.09 (1H,d,J=7.2Hz,H-5),7.82 (1H,t,J=7.2Hz,H-6),7.88 (1H,t,J=7.2Hz,H-7),8.14 (1H,d,J=7.2Hz,H-8),3.78 (3H,s,1-OCH3),2.15 (3H,s,2-CH3);13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δC160.7 (C-1),126.2 (C-2),162.4 (C-3),109.0 (C-4),125.8 (C-5),133.1 (C-6),134.3 (C-7),126.4 (C-8),180.1 (C-9),182.8 (C-10),117.5 (C-1a),133.8 (C-4a),134.6 (C-5a),132.1 (C-8a),60.3 (1-OCH3),8.8 (2-CH3).上述数据与文献[9]报道的基本一致，故鉴定化合物2为甲基异茜草素-1-甲醚。

化合物3:黄色粉末。1H NMR (600 MHz,DMSO-d6)δH7.95 (1H,s,H-1),7.53 (1H,s,H-4),8.15 (2H,m,H-5,H-8),7.88 (2H,m,H-6,H-7),2.28 (3H,s,2-CH3);13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δC124.7 (C-1),129.9 (C-2),162.0 (C-3),111.4 (C-4),126.6 (C-5),134.4 (C-6),133.9 (C-7),126.5 (C-8),181.3 (C-9),182.7 (C-10),133.2 (C-1a),132.1 (C-4a),133.3 (C-5a),133.1 (C-8a),16.3 (2-CH3).上述数据与文献[10]比对后基本一致，故鉴定化合物3为2-甲基-3-羟基蒽醌。

化合物4：黄色粉末。1H NMR (600 MHz,DMSO-d6)δH7.22 (1H,s,H-4),8.12 (1H,d,J=7.2Hz,H-5),7.89 (2H,m,H-6,H-7),8.19 (1H,d,J=7.2Hz,H-8),2.06 (3H,s,2-CH3),13.2 (1H,s,-OH);13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δC162.5 (C-1),117.2 (C-2),164.1 (C-3),108.0 (C-4),126.3 (C-5),134.6 (C-6),134.3 (C-7),126.7 (C-8),185.7 (C-9),182.1 (C-10),108.5 (C-1a),131.8 (C-4a),133.2 (C-5a),132.9 (C-8a),8.2 (2-CH3).上述数据与文献[9]对照基本一致，故鉴定化合物4为甲基异茜草素。

化合物5：白色粉末。1H NMR(600 MHz,CDCl3)δH4.46(1H,t,J=8.4Hz,H-3),5.32 (1H,br s,H-12),2.60(1H,dd,J=13.2,3.6Hz,H-18),0.83 (3H,s,H-23),0.84 (3H,s,H-24),0.90 (3H,s,H-25),0.71 (3H,s,H-26),1.11 (3H,s,H-27),9.37 (1H,s,H-28),0.88 (3H,s,H-29),0.89 (3H,s,H-30),2.02 (3H,s,3-OAc);13C NMR(150MHz,CDCl3)δC38.3 (C-1),23.7 (C-2),81.1 (C-3),37.9 (C-4),55.5 (C-5),18.4 (C-6),32.9 (C-7),39.7 (C-8),47.7 (C-9),37.1 (C-10),23.6 (C-11),123.4 (C-12),143.2 (C-13),41.9 (C-14),26.9 (C-15),22.3 (C-16),49.3 (C-17),40.6 (C-18),45.7 (C-19),30.8 (C-20),33.3 (C-21),27.9 (C-22),28.3 (C-23),16.9 (C-24),15.6 (C-25),17.2 (C-26),25.7 (C-27),207.6 (C-28),33.3 (C-29),23.7 (C-30),21.6 (3-OAc),171.3 (3-OAc).上述数据与文献[11]报道的数据基本一致，故鉴定化合物5为3β-乙酰基齐墩果醛。

化合物6：白色羽状结晶。1H NMR(600 MHz,CDCl3)δH4.47(1H,t,J=9.0Hz,H-3),5.25 (1H,br s,H-12),2.79 (1H,dd,J=13.8,3.6Hz,H-18),0.82 (3H,s,H-23),0.84 (3H,s,H-24),0.91 (3H,s,H-25),0.72 (3H,s,H-26),1.10 (3H,s,H-27),0.88 (3H,s,H-29),0.90 (3H,s,H-30),2.02 (3H,s,3-OAc);13C NMR(150MHz,CDCl3)δC38.2 (C-1),23.7 (C-2),81.1 (C-3),37.9 (C-4),55.5 (C-5),18.4 (C-6),32.7 (C-7),39.4 (C-8),47.7 (C-9),37.2 (C-10),23.6 (C-11),122.7 (C-12),143.8 (C-13),41.7 (C-14),27.8 (C-15),23.8 (C-16),46.7 (C-17),41.1 (C-18),46.0 (C-19),30.9 (C-20),34.0 (C-21),32.6 (C-22),28.2 (C-23),15.6 (C-24),16.9 (C-25),17.4 (C-26),26.1 (C-27),183.9 (C-28),33.3 (C-29),23.8 (C-30),21.6 (3-OAc),171.3 (3-OAc).上述数据与文献[12]所述基本一致，故鉴定化合物6为3β-乙酰基齐墩果酸。

4 结语

通过对黄根的乙醇提取物的系统分离，共得到6个化合物，包含4个蒽醌类化合物和2个齐墩果烷型三萜，分别鉴定为2-甲基蒽醌(1)，甲基异茜草素-1-甲醚(2)，2-甲基-3-羟基蒽醌(3)，甲基异茜草素(4)，3β-乙酰基齐墩果醛(5)，3β-乙酰基齐墩果酸(6)，其中化合物3、5、6为首次从黄根中分离得到，为进一步研究和开发利用黄根提供了一定的物质基础。