打箭菊水溶性成分的研究

齐桦琳，杜 艳，陈 玉，杨光忠，胡 鑫

(1.中南民族大学 药学院，湖北 武汉 430074;2.中南民族大学 化学与材料科学学院，湖北 武汉430074)

1 引言

打箭菊，又叫打箭鞑新菊、鞑箭菊、川西小黄菊鞑等，为菊科植物川西小黄菊(Pyrethrumtatsienens)的干燥头状花序。在西藏、云南、四川等地均有分布，是藏药“阿恰塞俊”的药源植物之一[1]。打箭菊体轻质软，气香，味微苦。现代药理学研究表明打箭菊入药具有止痛散瘀的功效，临床常用于治疗急性脑震荡、黄水病、太阳穴痛以及温热性痔疮疡[2]。据文献报道，从该植物中分离出的化合物打主要包括氨基酸、有机酸、黄酮类、生物碱[3]。为进一步研究其化学成分，探究打箭菊的药效物质基础，本文采用了正、反相硅胶柱层析及半制备高效液相色谱法，从打箭菊的正丁醇提取物中分离得到6个化合物，包含3个芳香类化合物和3个生物碱，根据其波谱数据分别鉴定为：2-苯乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)，3,5-dimethoxyl-4-hydroxybenzylalcohol-4-O-β-D-glucoside(2)，2-O-β-D-吡喃葡萄糖基顺式肉桂酸(3)，腺苷(4)，2'-O-甲基腺苷(5)，胸腺嘧啶脱氧核苷(6)，所有化合物都是首次从该植物中分离得到。

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

核磁共振辐射波谱仪(AM-600/500型,德国布鲁克)；紫外光谱分析仪(ZF-I型，上海顾村电光仪器)；循环水真空泵(SHB-IIIA型，上海贝菌科技)；高速旋转蒸发仪(RE2000A，上海亚荣生化仪器)；高效液相色谱仪(Ultimate 3000 半制备型，美国戴安，DAD检测器)；反相色谱柱(YMC-pack ODS-A，250 mm×10 mm，10 μm)；正相柱层层析硅胶填料(300～400母，济南博纳生物技术有限公司)；TLC(薄层硅胶分析板，济南博纳生物技术有限公司)；分析纯试剂(湖北弗顿生化制造有限公司)；色谱纯试剂(湖北弗顿生化制造有限公司)。

2.2 提取与分离

称取干燥的打箭菊12.0 kg并将其粉碎；然后在室温的条件下，将粉末完全浸泡在70%的乙醇中，反复浸泡3次，每次12 h。合并3次所得乙醇提取液，经抽滤后再将再将该减压抽取的滤液用旋转蒸发仪浓缩，从而得到乙醇提取物的浸膏2.92 kg。乙醇提取物先用石油醚萃取脱脂并除去极性小的组分，再用乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，分别得乙酸乙酯组分280 g和正丁醇组分535 g[4]。

本实验取正丁醇组分430 g使用大孔树脂柱层析的方法[5]，依次用30%、50%、70%、95%的乙醇梯度洗脱，分别得到浸膏100 g，120 g，20 g，10 g。将30%乙醇洗脱组分的100 g浸膏上正相硅胶柱，以乙酸乙酯/甲醇(100∶1→1∶100)为洗脱剂梯度洗脱，用薄层色谱法检测后合并，最终将洗脱液分为12个组分(Fr.1～Fr.12)，Fr.5和Fr.7经HPLC反复制备得到化合物1(3.5 mg),2(3.14 mg),3(5.86 mg)，4(2.5 mg),5(1.14 mg)和6(8.32 mg)。

图1 化合物1～6的化学结构式

3 结构鉴定

化合物1:白色粉末。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δH 7.18-7.26(5H,m),2.93(2H,m,H-7),4.09(1H,dd,J =16.2,8.4 Hz,H-8),3.86(1H,d,J =12.0 Hz,H-8),3.18-3.55(4H,m,H-2′,H-3′,H-4′,H-5′),3.66 (1H,dd,J =4.8,12.0 Hz,H-6′),3.76 (1H,dd,J =7.8,16.2 Hz,H-6′),3.66 (1H,dd,J =4.8,12.0 Hz,H-6′);13C NMR (150 MHz,CD3OD)δC 140.3 (C-1),129.5 (C-2),130.2 (C-3),127.4 (C-4),130.2 (C-5),129.5 (C-2,6),37.4 (C-7),71.9 (C-8),104.5 (C-1′),75.3 (C-2′),78.3 (C-3′),71.8 (C-4′),78.1 (C-5′),62.9 (C-6′)。将以上研究数据与相关参考文献[6]中的数据对照结果基本一致，故最终可以鉴定分析出的该有机化合物为2-苯乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物2：无色结晶。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δH 6.71 (1H,s,H-2),6.71 (1H,s,H-6),4.55 (2H,br s,H-7),4.85 (1H,d,J =7.5 Hz,H-1′),3.20-3.77 (6H,m,H-2′,H-3′,H-4′,H-5′,H-6′),3.85(6H,s,3-OCH3,5-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δC 135.2 (C-1),105.6 (C-2),154.2 (C-3),139.7 (C-4),154.2 (C-5,),105.6 (C-6),65.1 (C-7),105.4 (C-1′),75.7 (C-2′),77.8 (C-3′),71.3 (C-4′),78.3 (C-5′),62.5 (C-6′)，57.0 (C-3,5-OCH3)。将以上研究数据与相关参考文献[7]中的数据对照结果基本一致，故最终可以鉴定分析出的有机化合物为3,5-dimethoxyl-4-hydroxybenzylalcohol-4-O-β-D-glucoside。

化合物3:白色粉末。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δH 7.18 (1H,d,J =8.4 Hz,H-3),7.27 (1H,t,J =7.2 Hz,H-4),6.96 (1H,t,J =7.2 Hz,H-5),7.57 (1H,d,J =7.8 Hz,H-6),7.19(1H,d,J =12.0 Hz,H-7),5.99(1H,d,J =12.6 Hz,H-8),4.93 (1H,d,J =7.2 Hz,H-1′),3.38-3.51(4H,m,H-2′,H-3′,H-4′,H-5′),3.70 (1H,dd,J =4.8,12.0 Hz,H-6′),3.87 (1H,dd,J =1.8,12.0 Hz,H-6′);13C NMR (150 MHz,CD3OD)δC 127.3 (C-1),156.7 (C-2),116.6 (C-3),131.1 (C-4),123.0 (C-5),131.6 (C-6)，65.1 (C-7),105.4 (C-1′),75.7 (C-2′),77.8 (C-3′),71.3 (C-4′),78.3 (C-5′),62.5 (C-6′),136.4 (C-7),123.6 (C-8),172.7 (C-9),102.8 (C-1′),75.1 (C-2′),78.3 (C-3′),71.5 (C-4′),78.4 (C-5′),62.7 (C-6′)。将以上研究数据与相关参考文献[8]中的数据对照结果基本一致，故最终可以鉴定分析出该有机化合物为2-O-β-D-吡喃葡萄糖基顺式肉桂酸。

化合物4：白色粉末。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δH 8.18 (1H,s,H-2),8.31(1H,s,H-8),5.97 (1H,d,J =6.6 Hz,H-1′),4.74 (1H,dd,J =5.4,6.6 Hz,H-2′),4.33 (1H,dd,J =2.4,4.8 Hz,H-3′),4.17 (1H,q,J =2.4 Hz,H-4′),3.89 (1H,dd,J =2.4,12.6 Hz,H-5′),3.75 (1H,dd,J =2.4,12.6 Hz,H-5′);13C NMR (150 MHz,CD3OD)δC 153.7 (C-2),150.2 (C-4),121.2 (C-5),157.8 (C-6),142.2 (C-8)，91.4 (C-1′),75.7 (C-2′),72.9 (C-3′),88.4 (C-4′),63.7 (C-5′)。将以上研究数据与相关参考文献[9]中的数据对照结果基本一致，故最终可以鉴定分析出该有机化合物为腺苷。

化合物5：白色粉末。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δH 8.19(1H,s,H-2),8.34(1H,s,H-8),6.06 (1H,d,J =6.0 Hz,H-1′),4.43 (1H,dd,J =5.0,6.0 Hz,H-2′),4.49 (1H,dd,J =3.0,5.0 Hz,H-3′),4.16 (1H,q,J =2.5 Hz,H-4′),3.89 (1H,dd,J =3.0,13.0 Hz,H-5′),3.75 (1H,dd,J =2.4,12.6 Hz,H-5′),3.42(3H,s,2-OCH3);13C NMR (150 MHz,CD3OD)δC 153.8 (C-2),150.2 (C-4),121.1 (C-5),157.8 (C-6),142.0 (C-8)，89.4(C-1′),84.8(C-2′),71.0 (C-3′),88.6 (C-4′),63.4 (C-5′),59.0(2-OCH3)。将以上研究数据与相关参考文献[10]中的数据对照结果基本一致，故最终可以鉴定分析出该有机化合物为2′-O-甲基腺苷。

化合物6:无色针晶。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δH 7.82 (1H,d,J =0.6 Hz,H-2),6.28 (1H,t,J =7.2 Hz,H-1′),2.23 (2H,m,H-2′),4.40 (1H,m,H-3′),3.91 (1H,dd,J =3.0,6.6 Hz,H-4′),3.80 (1H,dd,J =3.0,12.0 Hz,H-5′),3.73 (1H,dd,J =3.6,12.0 Hz,H-5′),1.88 (3H,d,J =1.2 Hz,5-CH3);13C NMR (150 MHz,CD3OD)δC 152.6 (C-2),138.4 (C-4),111.7 (C-5),166.7 (C-6),86.4 (C-1′),41.4 (C-2′),72.4 (C-3′),89.0 (C-4′),63.0 (C-5′),12.75 (5-CH3)。将以上研究数据与相关参考文献[11]中的数据对照结果基本一致，故最终可以鉴定分析出该有机化合物为胸腺嘧啶脱氧核苷。

4 结语

本实验利用了多种色谱分离方法，以此对打箭菊的乙醇提取物进行了进一步的分离纯化最终得到了6个化合物。其中包含3个苯丙酸类化合物和3个生物碱类化合物，分别鉴定为2-苯乙基-O-β -D-吡喃葡萄糖苷(1)，3,5-dimethoxyl-4-hydroxybenzylalcohol-4-O-β-D-glucoside(2)，2-O-β-D-吡喃葡萄糖基顺式肉桂酸(3)，腺苷(4)，2′-O-甲基腺苷(5)，胸腺嘧啶脱氧核苷(6),为进一步研究和开发藏药打箭菊提供了一定的理论依据。