商品化甲氧苄啶胶体金快检试剂盒检测效果 评价与分析

叶雅真，骆和东,2*

（1.厦门市食品药品质量检验研究院，福建厦门 361012；2.睿科集团（厦门）股份有限公司，福建厦门 361015）

甲氧苄啶（Trimethoprim，TMP）是一种抗菌增效剂，在兽医临床常与磺胺类药物或其他抗生素联合使用，用于治疗鸡白痢、禽霍乱、呼吸道继发性细菌感染等，以降低抗菌药用量、增强抗菌药疗效、降低抗菌药残留及减少细菌对抗菌药的耐药性[1-3]。甲氧苄啶的广泛使用和不合理用药使动物性食品中存在药物残留，从而威胁人体健康。为了更有效地开展甲氧苄啶残留的快检监控工作，确保食品安全[4]。本文面向社会广泛征集符合评价验证方案要求的快检产品生产企业，参加评价验证，组建专家组对各品牌快检产品生产企业科研能力等技术实力进行资格审查，择优筛选出5个品牌快检产品进入检测能力方面的现场质量评价环节。通过统一制备盲样，由企业实验人员自行快检实验操作的方式，对这5个品牌商品化甲氧苄啶胶体金试剂盒产品进行统一的现场质量评价。本文拟对这5个品牌试剂盒产品的假阴性率、假阳性率、相对准确度等性能指标进行考察，为确定动物源性食品中甲氧苄啶的快速检测方法的研究方向提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

本次评价实验使用的甲氧苄啶快速检测试剂盒由各品牌生产企业自行准备。

1.2 实验方法

依据《食品快速检测方法评价技术规范》（食药监办科[2017]43号）[5]和《关于规范使用食品快速检测的意见》（征求意见稿）[6]制定评价方案。《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》 （GB 31650—2019）对家禽中肌肉靶组织的最大残留限量为50 μg/kg。因此，本文考察试剂盒对甲氧苄啶的检测限要求为50 μg/kg，并根据《食品快速检测方法评价技术规范》设定试剂盒质量评价性能指标考察要求为假阴性率应≤5%，假阳性率应≤15%。每家企业盲样数均为50份，其中阳性样和阴性样均为20～30份。各企业自行准备参加评价验证所必需的食品快检设备、辅助设备、试剂及实验耗材，由企业实验人员自行进行快检实验操作、出具快检结果。对所有快检结果进行汇总分析，统计各品牌甲氧苄啶试剂盒产品的假阴性率、假阳性率、相对准确度等指标。

2 结果与分析

为避免对企业造成影响，对试剂盒品牌进行编号表示，分别为A品牌、B品牌、C品牌、D品牌和E品牌，质量评价结果见表1和表2。质量评价结果显示，5个品牌产品的假阴性率在9.1%～25.0%，均不符合规定的假阴性率应≤5%的考察要求，其中A品牌、B品牌和E品牌产品假阴性率较高，漏检风险较高；5个品牌产品的假阳性率在0%～10.0%，均符合规定的假阳性率应≤15%的考察要求。

表1 质量评价结果汇总

表2 质量评价结果统计

A品牌试剂盒质量评价结果所示，A品牌试剂盒在0.5倍检测限未出现假阳性，对空白基质的快检结果假阳性率却高达12.0%，而且对1倍检测限的假阴性率高达25.0%，漏检率是5个品牌中最高的，快检结果相对准确度只有84.0%，是5个品牌试剂盒快检结果相对准确度中最低的。通过查阅各品牌试剂盒产品说明书，发现在5个品牌中，只有A品牌试剂盒为消线法胶体金快检产品，其余4个品牌的判定方式均为检测线（T线）与控制线（C线）比色法。经过市场调研发现，甲氧苄啶消线法胶体金试剂盒品牌极少，只调研到2家。根据试剂盒产品说明书，A品牌适用于鸡肌肉靶组织的检测，另一个品牌适用基质为血清。A品牌试剂盒产品的质量评价结果，假阳性率高可能是受甲氧苄啶的消线法胶体金快检技术的技术瓶颈影响，或是A品牌试剂盒产品的生产工艺问题所导致。

B品牌、C品牌、D品牌和E品牌试剂盒假阴性率分别为19.0%、11.1%、9.1%和19.2%，B品牌和D品牌假阳性率分别为3.4%和7.1%，C品牌和E品牌未出现假阳性情况。结果显示，4个品牌试剂盒都存在不同程度的漏检风险，假阴性率均不符合考察要求的≤5%，试剂盒产品的实际检测灵敏度均不够，应该对产品进行优化，降低各品牌产品的实际检测限，以降低产品假阴性率。

3 结论

胶体金快检试剂盒最理想的检测效果是0和0.5倍检测限的快检结果为明显的阴性（T线颜色明显深于C线颜色），1倍及以上检测限的快检结果为强阳性（T线颜色明显浅于C线颜色，甚至T线几乎不显色）。在试剂盒质量评价现场观察到，虽然B品牌试剂盒产品的绝对灵敏度最高，但是对空白基质的快检，B品牌试剂盒的快检结果为比较弱的阴性（T线颜色略深于C线颜色），试剂盒对0.5倍检测限和1倍检测限的识别差异不大，0.5倍检测限为弱阴性（T线颜色与C线颜色相当），1倍检测限为比较弱的阳性（T线颜色略浅于C线颜色）。在降低产品实际检测限后，试剂盒的假阳性率可能增高，增加误检风险。

因此，有必要进行快检方法研究，对方法进行优化，提高试剂盒产品实际检测灵敏度，提高快检准确度，确保试剂盒产品的快检监管效果。