对深圳市光明区婚检孕检夫妻地中海贫血基因检测结果的分析

刘 琛，胡海燕，文铖熹

〔1. 中国科学院大学深圳医院（光明）医学检验二科，广东 深圳 518107 ；2. 中山大学公共卫生学院（深圳）预防医学专业2 班，广东 深圳 518107〕

地中海贫血是指由于珠蛋白基因缺陷（突变、缺失）导致一种或多种珠蛋白肽链生物合成减少或完全被抑制所引起的一种溶血性疾病。此病属于珠蛋白肽链间的正常平衡异常、正常血红蛋白合成降低的遗传性血红蛋白病。地中海贫血可分为α、β、δβ 和δ 四个类型，其中以α 型和β 型地中海贫血最为常见[1-2]。地中海贫血属于单基因遗传病，因其治疗费用昂贵，因此目前国际上对于地中海贫血的防控重点主要是在孕前（如婚检）或孕期通过进行地中海贫血表型筛查、遗传咨询和产前诊断等，避免重型地中海贫血儿的出生[3]。本研究对深圳市光明区接受免费婚检、孕检的疑似患有地中海贫血的夫妻进行地中海贫血基因检测，以了解本地区地中海贫血基因的分型、分布，为优生优育、预防出生缺陷工作提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年10 月至2020 年6 月在中国科学院大学深圳医院东院区接受免费婚检、孕检的1860 例疑似患有地中海贫血的夫妻作为研究对象。其纳入标准是：平均红细胞体积（MCV）＜82 fl、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）＜27 pg、红细胞脆性试验结果＜68%、血红蛋白F（Hb-F）＞3.0、血红蛋白A2（HbA2）＜2.5 或＞3.5、血红蛋白电泳出现异常带；近期无输血史；知晓本研究内容，并签署了知情同意书。这些患者的年龄为20 ～38 岁，平均年龄为27 岁。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器与试剂 人体血细胞DNA 提取试剂盒（由深圳亚能生物技术有限公司生产），DNA扩增试剂（购自广州凯普医药有限公司），DNA提取仪（购自上海思路迪生物技术有限公司），ABI 2720 扩增仪（由美国应用生物系统公司生产），HB 2012A 杂交仪（由广东凯普生物科技股份有限公司生产）。

1.2.2 样本采集 采集研究对象的静脉血2 mL，加入EDTA-K2 进行抗凝处理。尽早对血液标本进行检测，若不能即刻检测应放入冰箱中在2℃～4℃下冷藏保存。

1.2.3 基因分型检测 在研究对象的外周血中提取出人类全基因组DNA 后，经扩增、导流杂交处理，进行3 种α 地中海贫血缺失检测：--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα ；3 种α 地中海贫血突变检测：αCSα/αα、αQSα/αα、αwSα/αα ；17 种β 地 中 海 贫 血 突 变 检 测：βCD17、βCD28、βCD29、βCD30、βCD31、βCD32、βCD43、βIVS-Ⅱ-654、βIVS-Ⅰ-1M、βIVS-Ⅰ-5M、βCD14-15、βCD27-28、βCD41-42、βCD71-72、βE、βInt、βCAP。有关文献报道以上23 种基因变异占中国人常见地中海贫血突变基因的90% 以上[4-5]。

1.3 观察指标

观察对1860 例疑似患有地中海贫血的夫妻进行地中海贫血基因检测的结果。

2 结果

对1860 例疑似患有地中海贫血的夫妻进行地中海贫血基因检测发现其中共有669 人为地中海贫血基因携带者，阳性检出率为35.97%。在669例地中海贫血基因携带者中，有455 例α- 地中海贫血患者，占68.01%（具体基因型见表1），共检出16 种型别，其中--SEA/αα 型别最为常见；有197 例β- 地中海贫血患者，占29.45%（具体基因型见表2），共检出10 种型别，其中以βCD41-42型别最为常见；有17 例α- 地中海贫血复合β- 地中海贫血患者，占2.54%（具体基因型见表3），共检出9 种型别，其中--SEA/αα 复合βCD28、-α3.7/αα 复合βCD17型别最为常见。

表1 α- 地中海贫血基因型及构成比

表2 β- 地中海贫血基因型及构成比

表3 α- 地中海贫血复合β- 地中海贫血基因型及构成比

3 讨论

地中海贫血又叫海洋性贫血，是一种单基因遗传病。此病可严重影响胎儿出生后的生活质量，甚至可导致其死亡。地中海贫血患儿多于出生后6 个月左右开始发病，若未得到及时的输血治疗，可导致其出现多种并发症，给其家庭和社会带来沉重的负担。目前，地中海贫血已成为全球关注的重大公共卫生问题之一。地中海贫血的发病具有明显的区域性，此病在我国的高发地区为两广地区和长江流域。相关的文献报道称，广东省居民α- 地中海贫血基因的携带率高达8.5% 左右，β- 地中海贫血基因的携带率高达2.5%[6-7]。深圳市尽管是一个以外来人口为主的城市，但地中海贫血的发病率仍较高。因此，深圳市政府将婚检、孕检中的地中海贫血相关检测定为免费、必查的项目。本研究对深圳市光明区1860 例疑似患有地中海贫血的夫妻进行基因检测发现其中共有669 人为地中海贫血基因携带者，阳性检出率为35.97%。在这669 例地中海贫血患者中，有455例患者患有16 种型别的α- 地中海贫血，有197例患者患有10 种型别的β- 地中海贫血，有17例患者患有9 种型别的α- 地中海贫血复合β-地中海贫血。这说明，本地区优生优育检测人群地中海贫血基因分型复杂、种类繁多。多数重型α- 地中海贫血胎儿出生即死亡，重型β- 地中海贫血胎儿虽不会出生即死亡，但其在出生后需进行定期输血、除铁、切脾等治疗，费用昂贵，不良反应多且疗效欠佳[8]。α- 地中海贫血复合β- 地中海贫血患儿虽然不用终身输血，但其生存质量显著低于健康儿童，且随着患儿年龄的增长，其病情可进一步加重，若未接受规范有效的治疗，可能发展成需要终生输血，给患儿的家庭带来沉重的负担[9]。造血干细胞移植是目前临床上治愈重型地中海贫血的唯一方法[10]。β- 地中海贫血是一种常见的因β- 珠蛋白基因突变引起的遗传性溶血性贫血， 其突变类型高达200 多种，以点突变为主。本研究中共检测出10 种突变类型，其中CD41-42 点突变类型所占的比例最高，其次为CD17 突变。现阶段随着三胎政策的全面放开，地中海贫血的防控工作更加紧迫，需加大对地中海贫血的检测力度。建议夫妻双方地中海贫血初筛阳性的应直接进行地中海贫血基因检测，以有效预防重度地中海贫血儿的出生。同时检验科的工作人员应警惕，进行地中海贫血基因检测的结果呈阴性并不能排除罕见的地中海贫血型别，若在工作中发现疑似罕见的地中海贫血型别，应及时与临床医生沟通，将患者转诊至上级医院进行地中海贫血基因全序列检测及遗传学咨询。

综上所述，深圳市光明区进行婚检、孕检的夫妻地中海贫血基因的携带率较高，该地区应重视地中海贫血的产前诊断，以降低重症地中海贫血儿的出生率。