广西地区男性不育患者精液质量与工作压力的相关性研究

钟慧芝 檀大羡 李征 黄霞梅

1.广西壮族自治区生殖医院 广西 南宁 530029；2.广西医科大学第一附属医院 广西 南宁 530021

在过去几十年里，男性精液质量成下降逐渐趋势，而男性不育发病率却上升趋势，这已成为一个重要的公共卫生问题。尽管男性精液质量逐年下降的原因还未能明确，但越来越多的研究表明不良的生活习惯，环境因素等会影响的男性精液质量[1]。

有研究表明，不同工作时间长度及不同工作压力会对人的免疫系统和心血管等方面造成影响[2-4]。然而，工作压力对男性精液质量存在的影响，目前尚未清楚。男性精液质量是评价男性生育能力的一项重要指标，同时也是人类辅助生殖技术（ART）成功与否的重要因素之一[5,6]。因此，本研究选取我院就诊的广西地区男性不育患者为研究对象，比较在不同程度的工作压力下，患者精液常规参数、精子形态和精子顶体酶活性是否存在差异，进而判断工作压力对精液质量是否存在影响，为男性不育患者的治疗提供相关依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2017年7月至2019年12月来我院就诊的795例广西地区男性不育患者为研究对象。纳入标准：男性患者与其配偶在未避孕的情况下进行正常性生活1年仍为怀孕，排除性功能障碍、无精子症、遗传病、生殖系统严重疾病以及吸烟 酗酒不良生活习惯的患者。

1.2 问卷调查

设计调查问卷，对研究对象进行问卷调查和详细的病历资料收集。工作压力问题内容包括：1觉得手上工作太多，无法完成；2感觉时间不够用，必须争分夺秒；3感觉没有娱乐时间，只想着工作；4想着工作的事情，夜晚难以入睡；5感觉不能完美的完全工作；6感觉未能被上司和同事认可；7平时容易烦躁生气；8与人交流时，喜欢打断别人说话；9担心工作做不好，会被开除；10担心自己的经济状况。每个问题都有从未、偶尔、经常3个选项，其对应的分值分别是0分、1分、2分，将分值总和分为3个档次：0～6分、7～12分和＞12分，分别对应3个等级的工作压力：无压力、压力小和压力大，并将所有研究对象按照工作压力大小分为3组，即Ⅰ组，无工作压力；Ⅱ组，工作压力小；Ⅲ组，工作压力大。

1.3 精液的采集和分析

精液常规分析按照世界卫生组织（WHO）所规定的方法和标准检测要求患者禁欲2～7天，通过手淫方式取精，将收集到的精液标本放入37℃水浴箱中等待液化。采集的精液标本在1h内完成常规分析。采用西班牙计算机辅助分析系统（CASA）对精子浓度、精子活动率、精子前向运动等参数进行分析，同时测量室精液量。

1.4 精子形态

采用Diif-Quik 快速染色法，按照试剂盒说明对精子标本进行染色。在油镜下观察精子形态，观察精子数不少于200条，并计算出精子正常形态百分率。

1.5 精子顶体酶活性的检测

精子顶体酶活性检测按照深圳华康生物医学工程有限公司顶体酶试剂盒说明书中的改良Kennedy法进行：将精液标本充分混匀并调节精液浓度使得每个反应管的精子个数为7.5106 条，并且每份标本设置反应管和对照管，将抑制剂和反应液同时加入反应管和对照管内，并在对照管内先加入反应终止液，将反应管和对照管置于24℃水浴箱中反应1h后向反应管加入终止液，使其终止反应并用酶标仪进行比色，计算出结果。正常精子顶体酶活性为48.2～218.7μU/106。

1.6 统计学方法

采用SPSS23.0进行数据的统计分析。计量资料用表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用两独立样本的t检验，检验水准设为 P＜0.05。

2．结果

2.1 患者的工作压力及精液常规参数、精子形态和精子顶体酶活性比较

通过对795例患者进行的工作压力问卷调查得出，其中Ⅰ组有69例，占研究人数的8.7%；Ⅱ组有386例，在研究人数的48.6%；Ⅲ组有340例，占研究人数的42.7%。统计显示，三组患者年龄、精液量、精子浓度和精子正常形态百分率差异均无统计学意义,但Ⅲ组患者的精子活动率、前向运动精子、精子顶体酶活性显著低于Ⅰ组和Ⅱ组，差异有统计学意义(P＜0.05)，如表1所示 。

表1 工作压力程度精液参数比较（±s）

*表示P值＜0.05

Ⅰ组 Ⅱ组 Ⅲ组 F值 P值N=69 N=386 N=340年龄（岁） 34.45±4.47 34.85±5.94 34.08±5.47 1.7 0.183精液量（ml） 2.98±1.28 2.98±1.42 2.91±1.55 0.19 0.822精子浓度（106/ml） 67.58±57.82 63.85±50.80 65.80±55.06 0.208 0.812精子活动率（%） 51.91±16.47 48.92±16.34 43.69±12.96 15.06 0.000*前向运动精子（%） 43.63±20.84 38.99±15.80 34.77±15.53 22.54 0.000*顶体酶活性（μU/106） 137.61±27.78 124.70±43.21 115.77±42.91 9.24 0.000*精子正常形态（%） 4.50±2.04 4.26±2.1 4.25±1.8 0.66 0.510

2.2 各组中正常睡眠患者与难以入睡患者精液参数的比较

通过统计分析，结果显示，Ⅲ组患者相比于Ⅰ、Ⅱ组患者，其夜晚难以入睡的比例明显增高，所占各组比例分别为26.8%、15.9%和15.5%，差异有统计学意义（P＜0.05）。分别对各组正常睡眠患者与难以入睡患者精液参数进行比较，结果显示相比于正常入睡的患者，难以入睡患者的精子活动率、前向运动精子和精子正常形态都成下降趋势，并且Ⅰ组和Ⅲ组中，难以入睡患者精子正常形态显著低于正常入睡的患者，差异有统计学意义（P＜0.05），如表2所示。

表2 3个组中正常睡眠患者与难以入睡患者精液参数的比较(±s)

表2 3个组中正常睡眠患者与难以入睡患者精液参数的比较(±s)

*表示P值＜0.05

精子正常形态（%）Ⅰ组N=69 正常睡眠 58 34.94±4.54 2.81±0.89 67.42±62.72 52.47±17.29 44.34±16.69 138.89±29.58 4.78±2.03难以入睡 11 31.91±3.17 3.87±2.35 68.40±19.17 49.89±14.29 40.83±14.86 131.00±14.56 3.82±1.81 t值 2.115 -1.475 -0.051 0.441 0.649 0.86 2.173 P值 0.038 0.169 0.959 0.661 0.519 0.393 0.033*Ⅱ组N=386 正常睡眠 326 35.29±5.89 2.95±1.35 62.70±53.25 52.31±12.35 43..29±12.70 123.92±43.94 4.33±2.24难以入睡 60 32.48±5.74 3.21±1.78 70.21±34.16 48.3.0±16.91 39.30±15.81 129.77±37.99 3.93±1.53 t值 3.409 -1.292 -1.052 1.753 1.846 -0.107 1.734 P值 0.001 0.197 0.293 0.080 0.066 0.228 0.086Ⅲ组N=340 正常睡眠 249 34.20±5.36 2.95±1.50 68.21±58.76 43.85±13.38 34.42±12.18 120.22.±48.31 4.4±1.86难以入睡 91 33.75±5.78 2.82±1.47 59.15±42.80 43.26±11.78 33.03±10.01 114.12±40.73 3.36±1.74 t值 0.665 0.681 1.345 0.373 0.973 1.16 2.628 P值 0.506 0.490 0.180 0.709 0.331 0.248 0.009*N年龄（岁） 精液量（ml） 精子浓度（106/ml）精子活动率（%）前向运动精子（%）顶体酶活性（μU/106）

3 讨论

精液常规检查已成为评估男性生育能力的一项最直接和最常用的指标，精液质量的优劣直接影响夫妇双方自然受孕的成功率[7-9]。此外，精液质量的优劣同样会对ART的结局造成影响[6]。然而，男性精液质量会受到吸烟，饮酒，熬夜等不良行为习惯以及诸多环境因素的影响[10,11]。通过本次研究，我们发现在所研究的对象中，将近一半的研究对象存在有工作压力大的现象。并且，随着工作压力水平的增加，男性不育患者精子的活动率、前向精子百分率以及精子顶体酶活性呈下降的趋势。这一结果与以往的研究结果是相似的。例如，有研究表明男性在压力较大的环境中生活，其精子活力会降低[12]，Bigelow等研究发现不孕不育夫妇人群中，男性患者的精液质量与工作压力水平呈负相关水平{58}。Jurewicz等[13]研究也发现工作压力与精子直线速率、精子平均路径速率成负相关，而与精子DNA碎片成正相关。还有研究显示，工作压力水平只影响男性的精液浓度和精子总数，而不影响精子的活率及精子前向运动[14]。本次的研究并未发现工作压力水平对精液浓度及精子总数造成影响。这一结果很可能是由于本次的研究人群与之前的研究所选择的人群不同所导致，本次所选择的研究对象为男性不育患者，而Zou[14]等人所选择研究对象为健康男性。工作压力水平增加对精液质量造成负面影响，可能的原因是在高水平的工作压力下，人体内分泌系统很大的几率会造成紊乱[15]。有研究报道，在受到外界心里压力的刺激下，体内糖皮质激素水平会大大增加，高水平的糖皮质激素会抑制睾丸中支持细胞合成和分泌睾酮，进而影响精子的正常发生，同时，高水平的糖皮质激素还会导致支持细胞和早期生精细胞的凋亡[16,17]。

此外，本次研究还发现随着工作压力水平的增加男性不育患者夜晚难以入睡的比例也显著增加。有研究表明，工作压力是影响睡眠质量的重要因素[18]。而低质量的睡眠质量会对人体诸多方面造成负面影响,例如高质量的睡眠是维持和修复机体的免疫功能的重要环节，而低质量的睡眠不仅会大大增加患心血管疾病的风险，而且还会对新陈代谢和神经系统造成负面影响[2,3]。此外，许多研究还显示，低质量的睡眠对生殖系统也会造成负面影响。例如睡眠受到干扰的小鼠，其局部生精小管间质减少，生精上皮细胞变薄，精子活率及精子正常形态率降低[19,20]。此外，还有研究报道相比于熬夜人群，早睡的男性人群会有更好精液质量，而长期睡眠时间不足的男性，其精子浓度、精子活率及其精子正常形态率显著下降，精子DNA碎片明显增高[21,22]。本次研究也得到相似的结果，我们发现3个组的研究对象中，夜晚难以入睡患者相比于正常入睡患者，其精子活动率、前向精子百分率和精子正常形态百分率都呈下降趋势，其中精子正常形态百分率显著降低。这一现象表明，睡眠质量很可能是影响精子形态的重要因素，因为本次研究发现，只有夜晚难以入睡患者的精子正常形态显著低于正常入睡患者的精子正常形态，并未因为工作压力程度的不同而出现不同结果。因此，工作压力不仅对精液质量造成负面影响，同时还对睡眠质量造成负面影响，而睡眠质量很可能通过另一种与工作压力不同的机制对精液造成负面的影响，这一现象有待我们进一步研究。

本次研究也存在着不足，如样本量的不足，研究的对象仅限于来我院就诊的男性不育患者，而没能获健康男性数据，此外，本研究是通过调查问卷的形式取得研究对象的工作压力情况，而未能完全避开其他一些混杂因素的影响，如不育患者本身可能存在着一定的心里压力，社会压力等，这些压力很可能都会对工作压力造成影响，因此会对所获取的数据造成一定的影响。

综述所述，尽管本次研究存在着一些不足的地方，但是通过本次研究可以发现本地区男性不育患者中，认为工作压力大的患者比例较多，并且随着工作压力水平的增加，患者精子活动率、前向运动精子百分率和精子顶体酶活性均成下降趋势；同时，随着工作压力水平的增加难以入睡患者比例也随之增加，严重影响患者睡眠质量。而低质量的睡眠进一步对患者的精液质量造成负面影响。通过这一研究，为今后男性不育患者的治疗提供新思路和理论依据。