碱性纤维母细胞生长因子与P16蛋白在乳腺癌组织中表达的临床意义研究

李慧芳

（1.江苏大学附属武进医院病理科，江苏常州 213004；2.徐州医科大学武进临床学院，江苏常州 213002）

乳腺癌是妇科女性常见病，调查显示，我国乳腺癌发病率逐年增加，且呈年轻化趋势[1]。近年来，随着医疗技术进步，乳腺癌治疗方案不断优化，预后得到改善，但研究显示，乳腺癌不良预后差异显著。尤其是中晚期乳腺癌患者，预后较差，5年生存率仅30%[2]。因此，准确评估乳腺癌病情，对乳腺癌进行早期筛查和治疗具有重要临床价值。碱性纤维母细胞生长因子（bFGF）是具有加快肿瘤组织分裂增殖的癌症相关蛋白分子，含146个氨基酸，既往已有报道显示，bFGF表达水平与乳腺癌预后相关[3]。P16蛋白位于人染色体9p21，既往研究显示P16蛋白属细胞周期蛋白依赖性激酶4抑制因子，调节肿瘤细胞增殖[4]。本研究收集84例乳腺癌患者临床资料，探讨bFGF和P16表达的临床意义，为临床诊疗提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年7月至2021年7月江苏大学附属武进医院收治的84例乳腺癌患者作为研究对象，患者年龄35~75岁，平均年龄（57.29±13.76）岁；病理分型：浸润性导管癌69例，导管内癌10例，浸润小叶癌5例；肿瘤直径1~5 cm，平均直径（3.27±1.33）cm；淋巴结转移：有27例，无57例。本研究经江苏大学附属武进医院伦理委员会批准。纳入标准：①符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2015版)》[5]中乳腺癌的诊断标准，并经病理组织活检确诊，且均在江苏大学附属武进医院接受治疗；②患者年龄≥18岁；③临床资料完整。排除标准：①妊娠或哺乳期患者；②有严重心、肺基础疾病或肝、肾功能不全者；③既往接受乳腺手术治疗者。

1.2 检测方法 取乳腺癌和癌旁组织各1.0cm×1.0 cm×1.0 cm作为检测标本，以苏木精-伊红常规染色，石蜡切片。采用全自动免疫组化染色系统（上海三崴医疗设备有限公司，国械备20160026号，型号：BenchMark ULTRA型）检测bFGF和P16蛋白表达水平。bFGF试剂盒购自上海彩佑实业有限公司，P16试剂盒购自上海信裕生物科技有限公司。随机选取10个视野，在高倍镜（×400）下计数1 000个乳腺癌细胞进行结果判断，分别按着色强度和阳性细胞数进行评分[6]，见表1。根据两项评分结果，计算乘积，以评分≤1分为阴性（-），2~3分为弱阳性（+），4~6分为阳性（++），≥7分为强阳性（+++）。

表1 免疫组化染色结果

1.3 观察指标 ①不同组织中bFGF和P16表达水平。包括癌组织和癌旁组织bFGF和P16表达水平。②比较不同bFGF表达水平患者病理特征。③比较不同P16表达水平患者病理特征。④比较不同bFGF和P16蛋白表达水平患者预后。所有患者均随访半年，记录半年生存率。⑤分析bFGF和P16蛋白判断患者短期预后价值。

1.4 统计学分析 采用SPSS 20.0软件进行数据处理，计量资料以（）表示，两两比较行t检验；计数资料以[例(%)]表示，两两比较行χ2检验，预测价值采用受试者工作曲线（ROC）分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同组织中bFGF和P16表达水平比较 84例患者中，癌组织内bFGF阳性率显著高于癌旁组织，P16阳性率显著低于癌旁组织，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 不同组织中bFGF和P16表达水平比较[例(%)]

2.2 不同bFGF表达水平患者病理特征比较 84例患者中bFGF阳性者73例，阳性率为86.90%，其中弱阳性（+）19例，阳性（++）24例，强阳性（+++）30例。不同bFGF表达水平患者肿瘤分期和淋巴结转移情况比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。不同bFGF表达水平患者病理分型和肿瘤直径情况比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表3。

表3 不同bFGF表达水平患者病理特征比较[例(%)]

2.3 不同P16表达水平患者病理特征比较 84例患者中P16阳性者48例，阳性率为57.14%，其中弱阳性（+）24例，阳性（++）15例，强阳性（+++）9例。不同P16蛋白表达水平患者肿瘤分期、肿瘤直径及淋巴结转移情况比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表4。

表4 不同P16表达水平患者病理特征比较[例(%)]

2.4 不同bFGF和P16蛋白表达水平患者预后比较 不同bFGF和P16蛋白表达水平患者半年生存率比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表5。

表5 不同bFGF和P16蛋白表达水平患者半年生存率比较[例(%)]

2.5 bFGF和P16蛋白判断乳腺癌患者短期预后价值分析 分别以免疫组化检测结果评分为检验变量，以半年内是否发生死亡为状态变量，绘制ROC曲线，分析结果显示，bFGF和P16判断乳腺癌患者半年生存率的AUC分别为0.782和0.761（P＜0.05），见图1、表6。

表6 bFGF和P16判断短期预后的ROC分析

图1 bFGF和P16判断乳腺癌患者短期预后的ROC曲线

3 讨论

目前临床对乳腺癌的发病机制尚未完全阐明，但普遍认为肿瘤血管的生成增长是维持肿瘤增殖、促进肿瘤进展的重要条件[7]。而肿瘤生长相关蛋白因子的表达可调节血管通透性，促进纤维蛋白原在细胞基质沉淀[8]，为肿瘤新生毛细血管网络的生长创造条件。因此，明确肿瘤相关蛋白因子将为肿瘤治疗提供新的靶点。bFGF为多肽生长因子，既往已有关于bFGF调节肿瘤生长的报道，bFGF可通过诱导VEGF合成，并与细胞膜特异性受体FGFR结合，调节肿瘤生长[9]。本研究也显示，癌组织中bFGF阳性率显著高于癌旁组织，且不同bFGF表达水平患者肿瘤分期和淋巴结转移情况比较，差异有统计学意义，提示bFGF在乳腺癌肿瘤病理进程中发挥重要作用。刘晨旭等[10]研究也证实bFGF可促进内皮细胞的有丝分裂过程，并通过降解细胞外基质，促进肿瘤细胞向瘤区外增殖迁移，形成新的肿瘤新生血管，促进肿瘤生长和转移。bFGF具有胞吞作用，内化后的bFGF可通过调节RNA聚合酶1，促进乳腺癌肿瘤细胞G0期向G1期转换，并经Ras、JAK/STAT细胞通路，调节乳腺癌分裂增殖[11]。因此，bFGF表达水平有助于评估肿瘤病理状态，为判断预后提供依据。

P16蛋白由3个外显子和2个内含子构成，通过与CDK结合，抑制催化真核细胞由G1向S期转化，从而达到抑制肿瘤细胞增殖的目的[12]。本研究显示，癌组织中P16阳性率显著低于癌旁组织，且不同P16表达水平患者肿瘤直径和肿瘤分期比较，差异有统计学意义，说明P16具有抑癌作用，P16表达缺失可能引起肿瘤增殖加速，促进肿瘤生长。本研究还显示，不同P16表达水平的患者半年生存率差异有统计学意义，bFGF和P16判断患者短期预后的AUC值均超过0.75，且敏感度分别达0.909和0.818，提示P16还有助于判断患者短期预后，这对于指导临床进行早期干预具有重要作用。但本研究未对bFGF和P16进行定量检测，还有待今后大样本研究证实。

综上，bFGF和P16表达水平与乳腺癌病理特征相关，监测bFGF和P16水平有助于评估肿瘤病情和判断预后。