涎腺类似乳腺分泌性癌与腺泡细胞癌的临床病理学特征比较

殷宪刚，陈洁，王素英，许珊珊

涎腺类似乳腺分泌性癌（MASC）是一种新定义的涎腺肿瘤，现已被收录至2017年第4版WHO头颈肿瘤分册，其具有独特的临床、形态、免疫表型和遗传学特征，其中遗传学上存在t（12；15）（p13；q25）易位，形成ETV6-NTRK3基因融合[1]。MASC被分类定义前，常被诊断为腺泡细胞癌（AciCC），其次是被诊断为低级别非特异性癌等。但相较于AciCC，MASC患者预后较差，且更易发生淋巴结转移。因此，明确MASC、AciCC临床症状、病理特征及瘤组织的免疫组织化学特征，可为临床MASC的鉴别诊断提供参考。本文现报道5例MASC和5例AciCC，重点表述上述两种肿瘤的临床病理学特征及免疫表型，并结合相关文献进行探讨，以加深临床对MASC和AciCC的认识。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年6月至2021年12月宁波市临床病理诊断中心收治的5例MASC患者及5例AciCC患者，所有患者均为男性，病程3～10年，年龄21～64岁，中位年龄47岁，过往均无手术史。

1.2 方法 所有手术切除标本均用3.7%中性甲醛固定，常规乙醇脱水，石蜡包埋，制成5 m左右厚度的组织切片。免疫组化染色采用EnVision二步法，其一抗包括DOG-1、MUC-4、S-100，苏木精-伊红染色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。BX53荧光显微镜购买自日本奥林巴斯公司。

1.2.1 苏木精-伊红染色 5 m染色组织切片经过梯度酒精复水后，用苏木精溶液染色5 min，然后在1%酸性乙醇（1%HCl/70%乙醇）中浸泡5 min，然后用蒸馏水冲洗。然后再用伊红溶液染色3 min，分级酒精脱水，二甲苯透明。采用中性树胶封片，最后使用显微镜观察和拍照。

1.2.2 免疫组织化学染色 5 m组织切片经过梯度酒精复水后，先后用抗原回收液孵育后，再用3%H2O2孵育30 min，水冲洗载玻片，并与一抗在4℃下孵育过夜。次日冲洗载玻片，用相应的二抗再孵育30 min后，分别用二氨基联苯胺（DAB）和苏木精染色。然后使用显微镜观察并拍照。采用Image-Pro Plus 6.0软件分析DAB染色。

1.3 结果判读 实验结果均由3位富有经验的病理医师进行核查。采用半定量计数方法，DOG-1以胞膜和胞质出现棕黄色染色为阳性，MUC-4以胞浆或胞膜出现棕黄色染色为阳性，S-100以胞质和胞核棕黄色为阳性。阳性强度判读：在高倍镜（×400）下选取10个代表性视野，计算细胞阳性率（阳性瘤细胞数/总瘤细胞数）×100%。细胞阳性率0～5%为阴性，6%～10%为灶阳性，11%～50%为中度阳性，51%～100%为弥漫强阳性。

2 结果

2.1 MASC与Aci CC患者的临床特征MASC和Aci CC患者均表现出缓慢长大的无痛性肿块，且质地较为硬实，肿瘤活动性差。MASC患者的平均无瘤生存期短于AciCC患者，颈部淋巴结转移的发生率高于Aci CC。

2.2 MASC与Aci CC瘤体的大体特征MASC肿瘤直径0.7～5.5 cm，中位直径为2.1 cm；肿瘤无包膜，但边界尚清楚或浸润性生长；肿瘤切面呈灰黄、灰红结节状，伴有出血或囊性变。AciCC肿瘤直径1.0～8.0 cm，中位直径为3.0cm；肿瘤为界限清楚的结节，可以有包膜，往往不完整；肿瘤切面呈灰白色或红褐色，瘤体质地软，多为实性，可见出血和囊性变。见封三彩图6。

2.3 MASC与AciCC的瘤体组织病理特征 MASC细胞呈中等大小或较小，细胞呈圆形、卵圆形、立方形及多边形，胞质较丰富，呈嗜酸性均质状，有时含空泡；肿瘤细胞核呈圆形及卵圆形，大小及形态较为一致；肿瘤排列方式呈实性巢状、囊状、微囊状或者滤泡状。AciCC肿瘤细胞以浆液性腺泡细胞为特征；肿瘤细胞排列呈实体状、梁状、条索状、腺泡状及微囊状。见封三彩图7。

2.4 MASC与AciCC的瘤体组织免疫组化染色观察 MASC中DOG-1呈阴性，S-100呈强阳性，MUC-4呈阳性或者局灶阳性；Aci CC中DOG-1呈强阳性，S-100呈阴性（或局灶阳性），MUC-4呈阴性。见封四彩图1。

3 讨论

在2010年，Skálová等[2]首次报道MASC，该研究发现16例涎腺肿瘤与乳腺分泌性癌具有相同的形态学特征、免疫表型等，且具有特异的遗传学改变，由此命名为MASC。随后，国内外学者对该肿瘤类型逐步展开研究。目前，有关MASC和AciCC的鉴别诊断研究较少，本研究通过收集MASC和AciCC病例，探讨两者在临床特征、病理特征及免疫组织化学上的区别，对MASC的临床诊断与治疗具有重要意义。

3.1 临床特点 MASC发病年龄范围广，成人、儿童均可发病，且该病多发于男性。腮腺是该病最常见的部位，其次发于颌下腺、口腔小涎腺[3]。大多数MASC患者通常表现为腮腺区缓慢增长的无痛性肿物，少数患者表现为疼痛和面神经瘫痪，通常由常规口腔检查或甲状腺疾病的影像学评估时发现。本研究纳入病例均为男性，病程3～10年，年龄21～64岁，中位年龄47岁；且MASC和AciCC患者均表现出缓慢生长的无痛性肿块，且质地较为硬实，肿瘤活动性差；并发现MASC患者的平均无瘤生存期要短于AciCC患者，且颈部淋巴结转移的发生率远高于AciCC患者，与文献[4]报道的临床特点一致。

3.2 临床病理特征 MASC呈边界清楚且无包膜的肿块，肿瘤切面呈灰白、灰黄、灰红色，多伴有囊性变，且囊腔内含暗红色或淡黄色液体，或形成巨大囊腔[5]。本研究纳入病例显示，MASC肿瘤直径0.7～5.5 cm，中位直径为2.1 cm；其肿瘤无包膜，但边界尚清楚或者浸润性生长，且肿瘤切面常呈现灰黄、灰红结节状，伴有出血或囊性变。MASC细胞呈中等大小或较小，细胞呈圆形、卵圆形、立方形及多边形，胞质较丰富，呈嗜酸性均质状，有时含空泡；肿瘤细胞核呈圆形及卵圆形，大小及形态较为一致；肿瘤排列方式呈实性巢状、囊状、微囊状或滤泡状。AciCC肿瘤直径1.0～8.0 cm，中位直径3.0 cm；肿瘤为界限清楚的结节，可以有包膜，往往不完整；肿瘤切面呈灰白色或红褐色，瘤体质地软，多为实性，可见出血和囊性变。AciCC肿瘤细胞则主要以浆液性腺泡细胞为特征，其肿瘤细胞排列呈实体状、梁状、条索状、腺泡状及微囊状。

3.3 免疫组织化学特点 MASC肿瘤内微囊及小管样腔隙中的分泌物呈耐淀粉酶消化的过碘酸雪夫（PAS）染色阳性及黏蛋白卡红染色阳性。MASC瘤细胞CK7、CK8、CK18、S-100、Vimentin常呈弥漫强阳性，CK19、GCDFP-15、EMA、MUC1和MUC4，STAT5a、Mammaglobin常呈强阳性[6-8]。在本研究中，MASC中DOG-1呈阴性、S-100呈强阳性、MUC-4呈阳性或局灶阳性；AciCC中DOG-1呈强阳性、S-100呈阴性（或局灶阳性）、MUC-4呈阴性，可见MASC、AciCC两种肿瘤DOG-1、S-100、MUC-4表达差异较大，以此联合检测鉴别具有重要意义。张金莲等[9]研究显示，MASC肿瘤中S-100、Vimentin及CK7均呈弥漫强阳性，Mamaglobin呈强阳性，其中S-100与本研究结果类似，均呈阳性表达。Serrano-Arévalo等[10]报道的4例MASC中，S-100、STAT5及钼靶蛋白均呈阳性表达,且该学者提出AciCC的免疫表型中S-100、STAT5及乳腺磁珠蛋白呈阴性表达。

3.4 鉴别诊断 MASC与AciCC鉴别诊断包括：（1）MASC患者平均无瘤生存期短于AciCC患者，且颈部淋巴结转移的发生率远高于AciCC患者。（2）AciCC多发于女性，且轻度嗜碱性酶原颗粒状的细胞质，罕见乳头状囊性结构。经淀粉酶处理后两者均呈PAS阳性结果，在AciCC中则呈颗粒状，但在MASC中呈球状（即黏液）。另外，据Guilmette等[11]研究表明，MASC具有独特的超微结构特征，能够同经典的AciCC的进行鉴别，MASC细胞型由条纹/插层的导管细胞分化组成，经典的细胞型即表现出腺泡细胞分化。（3）免疫表型：MASC中DOG-1呈阴性，S-100、MUC-4呈阳性，AciCC中DOG-1呈阳性，S-100、MUC-4呈阴性。（4）还可通过遗传学检测是否存在ETV6-NTRK3融合基因，AciCC不存在该基因融合。

3.5 治疗与预后 MASC是当前公认的一种低度恶性涎腺肿瘤，其生物学行为相对惰性，25%的病例可能会出现淋巴结转移，远处转移较为少见。目前，临床治疗MASC首选手术切除，腮腺全切除联合颈部淋巴结清扫术较部分腮腺切除、单纯肿块切除的患者复发风险低，若出现淋巴转移者可以辅助化疗。2016年有学者研究显示，MASC伴有ETV6-X融合基因、非典型融合基因具有更高的侵袭性，并提出ETV6-NTRK3融合基因易位可能是MASC的治疗靶点[12]。

综上所述，MASC是一种新近认识的涎腺低度恶性上皮源性肿瘤，少数病例可以复发及淋巴结转移，可结合临床特征、组织学及DOG-1、S-100、MUC-4检测，将其与AciCC鉴别区分，临床病理医生需进一步加强对其诊断要点的认识，以避免临床误诊和漏诊。