叶酸代谢障碍风险人群叶酸干预效果评估

胡允栋 孟庆红

(1 山东省郓城县妇幼保健计划生育服务中心 山东 菏泽 274700 2 山东省郓城县第二人民医院 山东 菏泽 274700)

前言

叶酸又被称为维生素B9，属于水溶性维生素之一。1992年中美预防神经管畸形合作项目启动，在研究中追踪了25万例新婚妇女以及妊娠解决之后发现，准妈妈在备孕时期就坚持服用0.4毫克的叶酸，对于神经管畸形高发区具有80%之上的预防概率，在神经管畸形低发区当中的预防概率也有41%，该科技成果也被全球各个国家广泛应用[1]。在孕妇妊娠期间如果叶酸摄入缺少将会导致胎儿出现神经管急性等等出生缺陷情况，因此，叶酸被产妇有效利用极为重要。本文正是基于此，主要选择了2017年1月至2019年7月期间在我院进行产检的209例叶酸代谢障碍风险孕妇为研究对象，对叶酸代谢障碍风险人群叶酸干预效果进行评估和分析，具体的研究情况报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

本研究重点分析了2017年1月至2019年7月期间在我院进行产检的209例叶酸代谢障碍风险孕妇，将不依据医嘱补服叶酸的105例孕妇为对照组，将依据医嘱补服叶酸的104例孕妇为观察组。对照组中产妇的年龄范围在20岁至32岁间，平均年龄值为(26.92± 4.55)岁，观察组中产妇的年龄范围在21岁至35岁间，平均年龄值为(27.83± 4.21)岁，对照组和观察组中的所有产妇一般资料经过软件分析后没有意义，可以进行后续分析。

1.2方法

(1)在孕妇整个孕期当中均对所有产妇进行常规性的孕期营养知识宣教，在日常的饮食当中增加产妇的叶酸摄入量。对照组中产妇未依据医嘱补服叶酸，观察组当中产妇依据医嘱进行叶酸补服，具体的服用方式为：1、叶酸代谢障碍检测低度风险产妇：在孕前3个月至整个孕期全程每天增加服用叶酸800μg。2、叶酸代谢障碍检测后呈中度和高度风险产妇：在产妇孕前3个月至整个孕期每天增补800μg 叶酸，每天补充2.4μg 的维生素B12。

(2)两个组别产妇均采取血液样本。使用柱式质粒DNA小量抽试剂盒对样本DNA进行提取。使用荧光定量PCR方式对相关基因多态性进行检测，详细操作如下：1)仪器与试剂：柱式抽提试剂盒(美国ABI公司；)，Taqman Universal Master Mix(美国ABI公司)，同型半胱氨酸监测试剂试剂盒(久强公司)，荧光定量RCR仪(美国ABI公司)，低温离心机Beckman J-6B(美国贝克曼库尔特有限公司)，PCR扩增仪(美国ABI公司)，TBA-120FR全自动生化分析仪(日本东芝)，2)方法：首先，提取细胞DNA：取口腔黏膜上皮细胞，取无菌棉签实施反复刮取，随后，使用柱式抽提试剂盒，提取样本DNA。其次，PCR反应体系：1uLDNA模板，5uL的Taqman Universal Master Mix，0.5ul的Taqman -MGB探针，3.5uL 去离子水。3)PCR反应条件：实施预变性，温度为95℃，持续10分钟；实施变性，温度92℃，持续1s。退火延伸，温度为60℃，持续1分钟，共循环20次。随后，在89℃下实施变性，持续15s，在60℃环境下，退火延伸，持续90s，共循环30次。其三，使用荧光定量PCR反应三个位点，应用Taqman_MGB探针，在反应结束后，由ABI7900型荧光定量PCR仪中对样品孔终点荧光进行读取，使用分析软件，对样本中基因分型的结果进行确定。

1.3观察指标

对比两组别产妇妊娠解决，在临床当观众对产妇产房以及产后45天妊娠解决进行追踪。具体主要有新生儿体重、分娩方式以及妊娠合并症等指标。

1.4统计学处理

2 结果

2.1两组新生儿情况分析

对照组中新生儿体重、新生儿体重异常概率、胎儿心脏结构异常发生率高于观察组，组别之间数据对比存在意义(P<0.05)，具体数据如下表1。

表1 两组新生儿情况对比

2.2两组孕妇分娩方式分析

对照组中剖宫产率显著高于观察组，产妇的顺产概率则低于观察组，组别之间数据对比存在意义(P<0.05)，具体数据如下表2。

表2 两组别孕妇分娩方式对比[例(%)]

2.3 两组妊娠合并症比较分析

对照组妊娠合并症出现概率显著高于观察组，组别之间数据对比存在意义(P<0.05)，具体数据如下表3。

表3 两组别妊娠合并症比较对比[例(%)]

2.4 妊娠合并症与未发妊娠合并症的基因多态性分析

妊娠合并症组C/T高于未合并妊娠合并症组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组C/C、C、T、T/C频率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T频率比较[n(%)]

妊娠合并症组A/G高于未合并妊娠合并症组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组A/A、A、G、G/G频率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表5。

表5 甲硫氨酸合成酶还原酶基因A66G频率比较[n(%)]

3 讨论

3.1 叶酸代谢障碍风险人群的叶酸干预应用效果

众所周知，新生儿体重是胎儿后续生长和发育过程当中的一大重要标志，其不仅仅胎儿在其胎儿期的生长以及营养状况进行反映，同时也是能够对胎儿出生之后的生长发育和健康状况进行决定[2]。产妇的妊娠期间营养摄入过多或者过少都会对妊娠解决造成一定的影响，造成低体重以及巨大儿的出生概率[3]。对患者进行必要的检测能够对孕妇情况进行了解，进而对其采取必要的措施进行干预。在本文的研究当中发现，所选择的209例产妇同样属于叶酸代谢障碍风险的孕妇群体，但是因为后续叶酸干预情况的不同，产妇的妊娠结局也存在一定的差异，在观察组别当中产妇的新生儿体重异常出现概率显著低于对照组中产妇。依据以往研究发现，新生儿体重与产妇体内叶酸水平趋势呈正相关，产妇孕早期期间叶酸水平过低将会大大增加低体重新生儿的发生概率。在本次以研究当中还发现，叶酸代谢风险人群当中产妇的妊娠结局母语并发症和其叶酸干预情况也所有关系，具体主要表现在妊娠合并高血压、早产、妊娠合并糖尿病、妊娠合并肝内胆汁淤积综合症等等。

3.2 妊娠合并症与叶酸代谢相关酶基因多态性分析

叶酸在食物中分布很广，它经过肠道吸收后，在肠壁、肝脏及骨髓等组织，经叶酸还原酶作用，还原成具有生理活性的四氢叶酸，后者作为细胞内一碳单位的载体，参与嘌呤和嘧啶合成，并为DNA、蛋白质的甲基化提供甲基，所示四氢叶酸甲基载体之一的5-甲基四氢叶酸由5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)催化生成，是血液和细胞中存在的主要叶酸类型。5-甲基四氢叶酸参与的唯一已知反应是作为甲基供体，在甲硫氨酸合成酶催化下，以维生素B12为辅酶，促进血液中同型半胱氨酸再次甲基化生成甲硫氨酸(蛋氨酸)，以维持正常的血浆同型半胱氨酸水平。随后，甲硫氨酸被ATP 磷酸化生成S-腺苷甲硫氨酸。S-腺苷甲硫氨酸参与机体内的生物大分子(包括DNA、蛋白质、脂类等)的甲基化，生成S-腺苷同型半胱氨酸。S-腺苷同型半胱氨酸再重新生成同型半胱氨酸，完成同型半胱氨酸代谢循环。因此，MTHFR 催化生成5-甲基四氢叶酸这步酶促反应至关重要，是叶酸代谢通路中的限速步骤。5-甲基四氢叶酸的存在是同型半胱氨酸向甲硫氨酸转变的必要条件，也是甲基传递的重要载体。在叶酸摄入量不变的情况下，5-甲基四氢叶酸的量受MTHFR 的控制，即MTHFR 酶活性高时5-甲基四氢叶酸的产量高，MTHFR 酶活性低时5-甲基四氢叶酸的产量低。足量的5-甲基四氢叶酸是维持血液中同型半胱氨酸水平的重要因素，也是确保体内甲基化程度正常的保证。

研究指出，在妊娠合并症患者的发病过程中，伴随不同程度同型半胱氨酸水平升高现象，在半胱氨酸的代谢中，同型半胱氨酸与蛋白质合成不具有明显关系，同型半胱氨酸利用诱导细胞，在细胞分裂期快速进入，进而实现细胞增殖；与此同时，在低密度脂蛋白的氧化过程中不断加速，同型半胱氨酸有助于血小板聚集，对血管内皮细胞产生损伤，使得机体中对于妊娠期高血压疾病疾病抵抗能力降低。同型半胱氨酸的再甲基化中，5-甲基四氢叶酸能够合成蛋氨酸、氢叶酸，在此过程中，需要亚甲基四氢叶酸还原酶作用。亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T点突变为临床常见错义突变，可使得丙氨酸被缬氨酸所取代，使得亚甲基四氢叶酸还原酶基氨基酸结构发生变化，最终对亚甲基四氢叶酸还原酶活性产生影响。

综上所述，孕妇进行叶酸干预行为将会对新生儿出生体重造成影响，孕妇的妊娠结局也会存在一定的差异。