联合检测抑制素A及波形蛋白在卵巢癌诊断中的价值研究

黎 华 黎 静 刘秋婷 杨云飞 梁雅茜

卵巢癌的早期症状一般不是很明显，所以经常被忽视，患病早期没有非常准确的检测技术，大部分患者发现的时候已经进入晚期。确定卵巢癌的肿瘤标志物，通过标志物检测为卵巢癌的诊断提供准确依据，这是实践中需要解决的一个重要问题。从研究成果来看，波形蛋白、抑制素A(INH-A)分别在识别肿瘤侵袭转移和早期病灶产生等方面具有明显的标志性作用，所以很多研究成果针对这两种标志物的检测及其在卵巢癌诊断中的价值进行了分析与研究[1,2]，本研究也是在这一背景之下针对这两种标志物的检测及其应用价值进行分析。

1.资料与方法

1.1 一般资料 为了更加详细客观地评价波形蛋白联合抑制素A检测在卵巢癌诊断中的应用价值，特向广西壮族自治区江滨医院医学伦理委员会申请并获得批准，经患者知情同意后选择我院门诊接诊的88例高度疑似卵巢癌的患者作为研究对象，患者的年龄为32～68岁，平均年龄(49.29±6.17)岁，体重为48～71kg，平均体重为(58.79±6.53)kg。排除标准：①患有自身免疫系统疾病患者；②心脏、肝脏、肾脏等严重脏器疾病患者；③合并患有其他恶性肿瘤。按照这一标准排查以后，上述患者当中均不存在上述情况，符合研究的标准和要求。

1.2 检测方法 由于患者均采用手术治疗，所以在研究中采用免疫组织化学方法对切除组织中的波形蛋白和抑制素A进行检测，具体的检测步骤如下。①手术结束后立即将患者的切除组织用石蜡包埋，然后制取切片(厚度为4μm)。②水化处理及灭活，使用梯度乙醇进行水化处理，再使用3%的过氧化氢对样本中内源性氧化酶灭活处理，最后再进行微波抗原清洗。③清洗后先密封10min，然后滴加第一抗体，静置孵育12h，再使用第二抗体等进行二次孵育20min，孵育过程中的温度要始终控制在4℃。④滴加氧化二氨基联苯胺(DAB)显色液染色5min，冲洗后经过复染等步骤在电子显微镜之下观察。

1.3 判断标准 以染色强度及阳性细胞占比作为评分标准，对所有患者进行评定，评定标准如下：①染色强度：棕色极强(3分)、棕黄色较强(2分)、淡黄色一般(1分)、无色(0分)。②阳性细胞占比评价标准：≥75%(4分)；<75%且≥51%(3分)；≤50%且≥26%(2分)；≤25%且≥5%(1分)；<5%(0分)。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0对研究中的相关数据进行处理分析，并对评价指标及检测结果与金标准之间进行一致性Kappa检测，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 病理诊断结果 88例高度疑似卵巢癌患者经过详细科学的临床病理检查以后，确诊卵巢癌41例，良性病变47例，分别占45.59%和53.41%。良性病变以纤维上皮瘤和纤维瘤为主，分别有16例和13例，占34.04%和29.79%，除此之外还有黏液性囊腺瘤、浆液性腺囊瘤。

2.2 波形蛋白联合抑制素A检测结果分析 本研究分别使用波形蛋白、抑制素A和上述两种联合检测方法进行检测，然后就检测结果与金标准进行比较分析，具体的检测结果见表1。

表1 波形蛋白联合抑制素A检测结果分析 单位：例

将上述研究结果进行一致性检验，从检验结果中来看，波形蛋白的一致性比较差，为0.195，说明检测结果与实际确诊数量之间存在不少的偏差。抑制素A的一致性检验结果为0.212，一致性也比较差。相对前两种结果，联合检测的一致性比较好，达到了0.805，前两者与联合检验之间的差异具有统计学意义0.089(P<0.05)。

3.结论

卵巢癌是女性常见恶性肿瘤之一，最近几年呈现发病率逐渐增长的趋势。导致卵巢癌发病率增长的原因有很多，除了遗传和内分泌等方面的因素之外，饮食和生活环境以及工作压力等也是非常重要的诱因。由于卵巢癌早期症状非常不明显，与腹痛、肠胃炎等症状非常相似，所以很容易被患者忽视，如果不进行详细的癌症早期临床诊断，单纯通过体检等方式很难发现早期症状，所以很多卵巢癌患者被发现时已经是癌症晚期，不管是治疗还是生活质量都会大受影响。另外，卵巢癌的细胞生物学特征非常复杂，这种复杂性的特征决定了不能用一般的肿瘤标志物对其检测，因为检测的准确度相对比较低，这是卵巢癌早期发现率比较低的一个非常重要的原因。要想破解卵巢癌早期症状诊断难的问题，需要有准确度和敏感度更加高的肿瘤标志物或更加先进的检测技术。波形蛋白是一种比较典型的中间纤维蛋白质，主要维持细胞骨架的完整性，现有的一些研究成果表明其参与肿瘤转移的过程，所以在很多肿瘤标志物检测中都将其作为一个重要的检测标志物[3～5]。波形蛋白一般情况下并非用于卵巢癌的早期检测，而是用于肝癌或者乳腺癌的检测，因为它在这些癌症中表达比较高。现有的研究成果表明，卵巢癌的临床分期及淋巴结转移也有密切的关系，所以在本研究中将其作为肿瘤标志物进行检测分析。抑制素A是女性卵巢颗粒细胞的异二聚体蛋白质激素，作用是抑制女性卵巢雌激素的分泌[6～8]，如果抑制素A指标出现异常，提示性腺激素的合成和释放出现异常。一些研究成果表明抑制素A会导致卵巢上皮细胞的异常增殖，所以有学者认为抑制素A异常是女性卵巢癌发病的一个重要标志[9～11]。 本研究将上述两种物质作为检测对象进行联合检测， 虽然抑制素A与波形蛋白都可以作为卵巢癌诊断的标志物，但是单一检测的准确度与敏感度比较差，会增加疾病漏诊率和误诊率， 但是联合检测的准确度与敏感度比较高。本研究中抑制素A与波形蛋白联合检测对疾病的判断与病理诊断的一致性达到了0.805，抑制素A与波形蛋白单独检测与联合检验之间的差异具有统计学意义(P<0.05)，联合诊断能够明显提高卵巢癌的诊断效能，与王博[12]、寇建芳[13]等的研究一致。

综上所述，波形蛋白、抑制素A在卵巢癌的诊断中都可以作为标志物，但是单一检4测方法的准确性比较差，联合检测准确性比较高，在临床上可以将联合检测作为早期确诊的重要辅助依据[14,15]。