血清甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3联合诊断肝细胞肝癌的临床价值

李 辉 赵 娟 徐沛演 张成芳 谭丽娟 刘美三

1.广州市花都区人民医院内科，广东广州 510800；2.广州市花都区人民医院检验科，广东广州 510800；3.广州市花都区人民医院感染性疾病科，广东广州 510800；4.广州市花都区人民医院肿瘤科，广东广州 510800

肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）为临床常见恶性疾病[1]。研究显示，HCC 发病隐匿，进展快，易转移，多数患者确诊即为中晚期，已丧失最佳手术时机，故早期诊断HCC 极为重要[2]。肿瘤标志物（tumor markers，TM）检测尽管取材方便，简便易行，但单一指标检测敏感性、特异性相对较低，临床常易出现漏诊、错诊[3]。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）、甲胎蛋白异质体（Alpha-fetoprotein-L3，AFP-L3）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（glypican-3，GPC3）为诊断HCC的重要TM，对于准确诊断HCC 具有重要价值，但单一TM 诊断效能相对较低，临床多行2 种或多种TM 联合诊断，以提高TM 的诊断效能。本研究探讨AFP、AFP-L3、GPC3 联合诊断HCC 的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年4月至2021年3月广州市花都区人民医院诊断的136 例疑似HCC 患者纳入HCC 组，129 例肝脏良性疾病患者纳入良性组，选取同期广州市花都区人民医院诊治的140 例肝炎肝硬化患者纳入对照组。HCC 组中，男86 例，女50 例；年龄29～78岁，平均（53.74±5.53）岁；中国肝癌的分期方案（China liver cance staging，CNLC）分期：Ⅰa 期14 例，Ⅰb 期19例，Ⅱa 期24 例，Ⅱb 期46 例，Ⅲa 期33 例；Child 分级：A 级104 例，B 级32 例； 美国东部肿瘤协作组（Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG） 评分0～2 分，平均（1.18±0.13）分。纳入标准：①患者符合《原发性肝癌诊疗规范》[4]标准；②患者对本研究知情同意；③患者卡氏（Karnofsky，KPS）评分＞60 分。排除标准：①有放化疗史者；②转移性肝癌者；③肿瘤已转移者；④合并其他恶性肿瘤者；⑤依从性差者。良性组中，男81例，女48 例；年龄29～76 岁，平均（53.81±5.55）岁。对照组中，男89 例，女51 例；年龄28～78 岁，平均（53.95±5.60）岁。三组患者的性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会审核批准。

1.2 方法

HCC 组、良性组患者均于入院后第2 天抽取患者5 ml 清晨空腹静脉血，置于促凝管内，以离心机离心5 min，离心半径：8 cm；离心速度：3000 r/min，分离血清并保存于-20℃冰箱内待检。AFP 以化学发光法检测；AFP-L3 以微量离心柱法检测；GPC3 以酶联免疫法检测。上述检测均严格按照试剂盒规定步骤进行。对照组患者以上述方法检测AFP、AFP-L3、GPC3 水平。比较三组患者的各项检测结果。阳性预测值=真阳性例数/（真阳性+假阳性）例数×100%；阴性预测值=真阴性例数/（真阴性+假阴性）例数×100%；灵敏度=真阳性例数/（真阳性+假阴性）例数×100%；特异度=真阴性/（真阴性+假阳性）例数×100%；准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数×100%。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料用率表示，两组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson 相关系数法，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平的比较

HCC 组患者的血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平均高于良性组、对照组，良性组患者的血清AFP、AFPL3、GPC3 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 三组患者血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平的比较（±s）

表1 三组患者血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平的比较（±s）

注 与HCC 组比较，aP＜0.05； 与良性组比较，bP＜0.05；AFP： 甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白异质体；GPC3：磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3；HCC：肝细胞肝癌

组别 例数 AFP（μg/L） AFP-L3（%） GPC3（μg/L）HCC 组良性组对照组F 值P 值136 129 140 140.86±16.31 101.89±11.87a 16.52±1.85ab 4127.678＜0.001 16.09±1.74 12.64±1.33a 7.07±0.73ab 1622.252＜0.001 10.19±1.21 2.73±0.30a 1.08±0.13ab 6113.744＜0.001

2.2 AFP、AFP-L3、GPC3 单独、联合诊断HCC 的诊断效能

对HCC 组所有患者进行诊断效能分析，AFP、AFP-L3、GPC3 联合诊断HCC 的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、准确度均高于AFP、AFP-L3、GPC3 单独及两两联合诊断（表3）。

表3 AFP、AFP-L3、GPC3 单独、联合诊断HCC 的诊断效能[%（n/N）]

3 讨论

影像学检查及肝组织病理活检是诊断HCC 的重要方法[5]。影像学检查可明确诊断体积较大的HCC 病灶。但对于初发微小病灶，影像学检查却并无优势[6]。肝组织病理活检是诊断HCC 的金标准，该方法诊断HCC 尽管具有较高的诊断符合率，但难以取材，无法进行普查[7]。

TM 是肿瘤发生、进展过程中产生的标志性物质，在肿瘤筛查及早期诊断中具有重要价值[8]。研究显示，血清TM 检测有助于HCC 的诊断[9]。AFP 为人胚胎期即存在的糖蛋白，出生后其水平常降低至常态。通常，成人肝细胞不分泌AFP，故其血清AFP 水平相对较低，多不高于20 ng/ml[10]。肝细胞癌变时，未分化的肝细胞可表达大量AFP，且随着癌变程度加重，AFP 表达程度也逐渐升高，导致血清AFP 水平升高，因此检测血清AFP 可掌握HCC 发生进展[11]。资料显示，尽管血清AFP 可用于HCC 的诊断，但因良性肝病、妊娠期女性AFP 也存在程度不同升高，故其临床诊断率相对较低，且部分晚期HCC 患者AFP 水平并无特异性改变，临床诊断较为困难[12]。郭鸿雁等[13]研究显示，HCC 患者的血清AFP 高于肝脏良性疾病患者及正常人，且其AFP 诊断HCC 的敏感度（71.3%）、特异度（77.7%）偏低。

肝病患者多存在蛋白糖基化异常，生成多种具有肿瘤特异性的糖链结构[14]。AFP-L3 为肝脏分泌的AFP 异质体，既往常用于评价早期血管浸润及肿瘤转移，因其血清水平与肿瘤恶化程度成正相关，故近年来多用于早期HCC 的临床诊断[15]。曾繁利等[16-18]证明，与正常人群及肝脏良性疾病相比较，HCC 患者的AFP-L3 水平显著升高，且AFP-L3 单独诊断HCC 的敏感度为76%，特异度为93%。

GPC-3 为磷脂酰肌醇蛋白聚糖，可经Yes 相关蛋白、生长因子及Wnt 通道调控HCC 的发生及进展[19]。GPC-3 高表达可诱导生成Wnt-frizzled 复合物，进而激活下游β-catenin，促进HCC 发展。GPC-3 可结合成纤维细胞生长因子，诱导后者结合其相关受体促进HCC 增殖[20]。研究显示，GPC-3 在肝炎肝硬化患者及正常人血清中表达不显著，但高表达于HCC 患者，故其可作为诊断HCC 的TM[21]。与AFP、AFP-L3 相似，GPC-3 诊断HCC 的敏感度也相对偏低[22]。王艳等[23]研究显示，GPC3 诊断HCC 的灵敏度为69.5%。

本研究结果显示，HCC 组患者的血清AFP、AFPL3、GPC3 水平均高于良性组、对照组，良性组患者的血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；AFP、AFP-L3、GPC3 联合诊断HCC 的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、 准确度均高于AFP、AFP-L3、GPC3 单独及两两联合诊断，提示AFP、AFP-L3、GPC3 是反映HCC 的重要指标，三者联合诊断HCC 可获得更好的试验评估结果。

综上所述，血清AFP、AFP-L3、GPC3 与HCC 关系密切，检测其水平有助于HCC 的临床诊断，且三者联合检测可显著提高HCC 的诊断率，更大程度避免误诊、漏诊。