肿瘤相关自身抗体联合肿瘤标志物对肺癌的诊断价值

荆梦君 陈 葳

西安交通大学第一附属医院检验科，陕西西安 710061

肺癌是当今全球癌症致死的首位原因，占癌症致死总数的18%，严重威胁着人类的健康，也给社会公共卫生系统造成了极大的负担[1]。有资料显示肺癌晚期患者的中位生存期不足一年[2]，因此早期筛查和诊断肺癌，对于改善患者预后至关重要。近年来，各种研究表明，在癌症发展初期，机体的免疫系统就可以识别肿瘤细胞内表达的异常蛋白，又称肿瘤相关抗原，分泌针对这些抗原的自身抗体，称为肿瘤相关自身抗体（tumor associated autoantibody，TAAB），由于免疫系统的敏感性和稳定性，可在影像学诊断出肺癌的5年前被检出[3-4]。这种自身抗体的检测具有无创、简便易测且灵敏度及特异度均较高的优点，对发现早期肺癌具有重要的临床价值[5]。本研究拟探讨7 种肿瘤相关自身抗体（7-TAABs），即p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE-A1、CAGE，和肿瘤标志物鳞状上皮细胞癌抗原（squamous cell carcinoma，SCC）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、细胞角蛋白19 片段（cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1）的联合检测对肺癌的诊断价值，以期为肺癌筛查提供更有利的依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年12月至2021年7月西安交通大学第一附属医院收治的149 例肺癌患者为肺癌组，选取同期86 例肺部良性疾病患者为对照组。肺癌组中，男93 例，女56 例；平均年龄（62.9±9.5）岁；腺癌82 例，鳞癌52 例，小细胞肺癌15 例；Ⅰ～Ⅱ期60 例，Ⅲ～Ⅳ期89 例。对照组中，男52 例，女34 例；平均年龄（60.4±10.5）岁；非特异性炎性结节患者33 例，机化性肺炎患者24 例，肺结核患者15 例，肺错构瘤患者10 例，其他类型患者4 例。两组患者性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。本研究获得医院医学伦理委员会批准。

纳入标准： ①肺癌组患者病理活检确诊为肺癌，符合中华医学会肺癌临床诊疗指南（2018 版）的诊断标准[6]；②年龄18～85 岁，首次确诊，未行放疗、化疗、手术或靶向治疗；③组织病理分型、TNM 分期明确及其他临床资料、辅助检查资料完整；④患者及家属签署知情同意书。排除标准：①患有自身免疫性疾病和血液病；②合并有其他严重并发症，如糖尿病、缺血性心脏病等；③合并其他胸外肿瘤病史；④严重精神障碍患者且不能配合研究者。

1.2 方法

两组研究对象于清晨空腹状态采外周静脉血样4 ml，以离心半径10 cm、转速4000 r/min 离心10 min分离血清，8 h 内进行检测。7-TAABs 选用杭州凯保罗生物科技有限公司生产的检测试剂盒，采用酶联免疫吸附法检测。7-TAABs 阳性判断值分别为：p53＞13.1 U/ml，PGP9.5＞11.1 U/ml，SOX2＞10.3 U/ml，GAGE7＞14.4 U/ml，GBU4-5＞7.0 U/ml，MAGE-A1＞11.9 U/ml，CAGE＞7.2 U/ml。SCC、CEA、CYFRA21-1 使用德国罗氏全自动化学发光免疫分析仪及罗氏公司提供的配套试剂盒，采用电化学发光法进行检测。各肿瘤标志物参考范围为：SCC<2.7 ng/ml、CEA<5 ng/ml、CYFRA21-1<3.3 ng/ml。

利用灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分析自身抗体和肿瘤标志物检测的诊断价值。灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%；特异度=真阴性/（假阳性+真阴性）×100%；准确度=（真阳性+真阴性）/总例数×100%；阳性预测值=真阳性/（真阳性+假阳性）×100%；阴性预测值=真阴性/（真阴性+假阴性）×100%。

1.3 统计学方法

采用SPSS 23.0 软件进行数据分析，对于符合正态分布的计量资料，用均数±标准差（±s）的形式进行描述，采用独立样本t 检验，对于不符合正态分布的资料，用中位数（下四分位数，上四分位数）[M（P25，P75）]进行描述，组间比较采用Mann-Whitney U 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清7-TAABs 和肿瘤标志物水平的比较

肺癌组患者血清中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE-A1 抗体以及3 项肿瘤标志物SCC、CEA、CYFRA21-1 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），CAGE 抗体水平与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1、2）。

表1 两组患者7-TAABs 水平比较[U/ml，M（P25，P75）]

表2 两组患者肿瘤标志物水平比较[ng/ml，M（P25，P75）]

2.2 两组患者7-TAABs 和肿瘤标志物联合检测阳性率比较

7-TAABs 联合检测、3 项肿瘤标志物联合检测及7-TAABs 联合3 项肿瘤标志物联合检测的阳性率均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。同时在肺癌组患者中，7-TAABs+3 项肿瘤标志物联合检测的阳性率最高，为83.22%（表3）。

表3 两组患者7-TAABs 和3 项肿瘤标志物联合检测阳性率比较[n（%）]

2.3 7-TAABs 与3 项肿瘤标志物检测对肺癌患者的诊断效能

7-TAABs 联合检测的灵敏度为57.72%，准确度为68.51%，阴性预测值为54.35%，均高于单项抗体检测结果。三种联合检测组合里，7-TAABs +3 项肿瘤标志物联合检测的灵敏度、准确度、阴性预测值最高，分别为83.22%、79.15%、71.26%（表4）。

表4 7-TAABs 和3 项肿瘤标志物检测对肺癌的诊断价值[%（n/N）]）

3 讨论

据资料显示，肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，患者的5年生存率仅为15%左右[7-8]。然而，肺癌早期发病隐匿，多数患者就诊时已经为中晚期，因此肺癌的早期诊断已成为临床上的重大难题。目前，对于肺癌的各种筛查手段中，CT 检查假阳性率高达96.4%，且具有筛查过度和辐射诱发肿瘤的危险，病理学检查也具有创伤性和标本取材困难的缺陷，均限制了临床应用[9-10]。

肿瘤自身抗体作为一种新型的血清标志物，其检测创伤小，标本易获得，且半衰期长达30 d，稳定性好，受到了临床的广泛关注[11]。p53 是最早发现的抑癌基因之一，参与DNA 修复和诱导细胞凋亡，其突变促进了癌症的发生、发展[12]。PGP9.5 是一种泛素水解酶，在早期肺癌中就可呈高表达状态[13]。SOX2 是一个转录因子，可促进肺癌细胞的增殖[14]。GAGE7、GBU4-5、MAGE-A1 和CAGE 均属于肿瘤/睾丸基因家族，多表达于恶性肿瘤和睾丸组织，不在正常的组织中表达，对肿瘤细胞的生长、增值以及扩散起到了重要作用[15-16]。

此研究显示，7-TAABs 中的p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE-A1 这6 项自身抗体水平均高于对照组，差异有统计学意义，与Du 等[17]的结论略有差异，其研究结果认为肺癌组7 种自身抗体的水平均明显高于肺部良性病变组。此次研究中CAGE 抗体在肺癌组中检测水平较低，可能与样本量及样本组成不同、 试剂灵敏度不高以及患者间个体差异有关，还需要扩大样本量深入研究。7-TAABs 单项抗体检测的特异度（96%～100%）较高，但灵敏度较低，仅分布于为5%～19%之间，并且准确度低于50%，并不能满足临床筛查肺癌的需要，将自身抗体进行联合检测后，灵敏度（57.72%）和特异度（87.21%）均达到了较高的水平，并且准确度提高至68.51%，与陈志等[18]的研究结论基本相同，提示7-TAABs 联合检测能有效鉴别肺癌人群与肺部良性疾病人群，具有更好的诊断效能。但由于本研究中良性病例纳入的人数较少，所以特异度稍低。Dai 等[19]学者研究结果显示自身抗体联合检测的敏感性达到了68.9%，优于本研究，原因可能与所选抗体谱不同、试剂灵敏度和人群差异等因素有关。

另外，本研究显示3 项肿瘤标志物水平均明显高于对照组，差异有统计学意义，并且其联合检测对于肺癌筛查也具有较高的灵敏度 （67.79%） 和特异度（83.72%），有一定的临床应用价值。一项前期的研究结果[20]显示7-TAABs 组比传统肿瘤标志物具有更高的敏感性，但此次研究中得出肿瘤标志物联合检测的灵敏度稍高于7-TAABs 组，出现这种情况的原因可能是肿瘤标志物水平为肿瘤负荷的标志，与肿瘤分期相关，本研究肺癌组中晚期患者纳入相对较多，已有大量的特异性蛋白进入循环系统，因而肿瘤标志物检出率高，相比于早期肺癌，其对中晚期肺癌可能更有诊断意义，此结论还需深入研究。进一步分析抗体与肿瘤标志物联合检测结果发现，7-TAABs + 3 项肿瘤标志物联合检测在肺癌组患者中阳性率（83.22%）明显上升，其阳性率明显高于7-TAABs 联合检测和3项肿瘤标志物联合检测。虽然联合检测损失了一部分特异度，但灵敏度和准确度提升至83.22%和79.15%，同时阴性预测值明显提高至71.26%，表明如果患者该联合测定结果均为阴性，诊断为肺部良性疾病的可能性可达71.26%，提示了该联合检测具有较高的排除非肺癌患者的能力。以上结论均表明抗体与传统肿瘤标志物联合检测可针对更多基因靶点，提高肺癌检出率，降低漏诊率和误诊率，协助临床医生对肺癌患者进行更准确的诊断。但本研究中小细胞肺癌和处于Ⅰ+Ⅱ期肺癌患者样本量相对较少，后续研究可增加样本量，丰富患者类型，研究不同病理类型和组织分型之间各抗体水平的差异，得出更可靠的结果。

综上所述，血清7 种肿瘤相关自身抗体联合检测可作为鉴别肺部良恶性疾病的一种高效且可靠的方法，并且与传统肿瘤标志物结合可提高诊断效能，为肺癌的诊断和筛查提供更有利的依据。