人工诱导发情对繁殖季节绒山羊繁殖性能和血清指标的影响

王 涛，马跃军，胥福勋，沙如拉，阿拉木斯，高玉林，苏日娜，刘 斌*

(1.内蒙古自治区农牧业科学院，呼和浩特 010031；2.巴彦淖尔市农牧业科学研究所，内蒙古 巴彦淖尔 015000；3. 乌拉特中旗畜牧业服务中心，内蒙古 巴彦淖尔 015300；4.鄂托克旗农牧技术推广中心，内蒙古 鄂尔多斯 016100)

内蒙古绒山羊主要包括二狼山型白绒山羊、阿尔巴斯型白绒山羊和阿拉善型白绒山羊。 绒山羊繁殖性能主要受遗传、营养、环境的影响，内蒙古地区绒山羊繁殖性能差异较大，部分高繁绒山羊繁殖率可达160%以上，而在阿拉善、巴彦淖尔市等荒漠草原牧区仅为90%左右。近年来，随着人们对羊绒和肉产品的需求不断提高，如何提高绒山羊繁殖率已成为必然趋势。 中草药因其纯天然、毒性小、副作用小等特点在生产中广泛应用，合理配伍的中草药可有效提高动物的繁殖性能和抗应激能力[1]，提高绒山羊产区的养殖效益，增加农牧民的收入。 国内大量研究表明，中草药饲料添加剂对非繁殖季节动物具有促发情作用[2，3]，可有效调节动物机体免疫性能、抗氧化及生产性能[4，5]。 PMSG 是一种经济实用且高效的外源生殖激素，在生产中应用广泛，合适的注射剂量和使用时间可显著提高动物的繁殖性能[6]。 本研究采用中草药添加剂和孕马血清促性腺激素(PMSG)对内蒙古绒山羊进行了催情处理，通过测定并分析血清生化指标和产羔性能，探究两种不同处理方式对内蒙古绒山羊血清生化指标和产羔性能的影响，以期为提高绒山羊的繁殖性能提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

试验动物选择体重和年龄相近的内蒙古二郎山型绒山羊成年经产母羊264 只，分为中草药试验Ⅰ组108 只、PMSG 试验Ⅱ组96 只和对照组60 只，试验羊采用放牧加补饲饲养方式，放牧草场属于半荒漠化草场，放牧结束后自由饮水并补饲玉米200 g/只。 试验Ⅰ组于试验开始前7 d 开始饲喂中草药，每次50 g/只，每2 d 饲喂1 次，共3 次，停止饲喂中草药后观察母羊发情情况并放入优质种公羊进行本交；试验Ⅱ组于试验开始前12 d 放置孕酮阴道海绵栓， 试验开始第一天早饲前撤栓的同时肌肉注射PMSG 200 IU/只，次日观察母羊发情情况并放入优质种公羊进行本交；对照组采用常规饲喂方式饲喂，观察母羊发情情况并放入优质种公羊进行本交。 在试验开始第二天早饲前各组选取5 只颈静脉采血5 mL，静置20 min 后置于离心机中以3500 r/min 离心10 min，吸出上层血清置于1.5 mL 离心管中，放置于-20 ℃冰箱中保存待测。 试验地点位于内蒙古自治区乌拉特中旗。

1.2 试验药品

中草药添加剂配方按照下述质量份进行配伍：淫羊藿30～50 份、熟地10～30 份、山芋20～30 份、山药15～25 份、茯苓15～25 份、泽泻15～25 份、锁阳15～25 份、知母15～25 份、何首乌15～25 份、益母草15～25份、菟丝子20～30 份，将组分量中草药用粉碎机进行粉碎、过40 目筛并搅拌均匀即可。

PMSG(1000 IU/支)，上海市计划生育科学研究所生产；PRID(1000 IU/只)：孕酮阴道海绵栓，美国。

1.3 测定指标

1.3.1 产羔性能

1.3.2 血清生化指标

血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血清葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)；所有血清样本均送至北京华英生物技术研究所测定。

1.3.3 生殖激素指标

促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)和睾酮(T)，所有血清样本均送至北京华英生物技术研究所测定。

1.3.4 统计方法

试验数据采用SSPS19.0 统计软件ANOVA 程序进行单因素方差分析，采用Duncan 法进行组间的多重比较，结果用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊产羔性能的影响

如表1 所示，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组发情率和产羔率均显著高于对照组(P＜0.01)，试验Ⅱ组双羔率极显著高于试验Ⅰ组和对照组(P＜0.01)，试验Ⅰ组和对照组之间无显著差异(P>0.05)。

表1 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊产羔性能的影响

2.2 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊血清生化指标的影响

如表2 所示，试验Ⅱ组IgA 和IgG 显著高于对照组(P＜0.05)，其他指标三组之间均无显著差异(P>0.05)。

表2 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊血清生化指标的影响

2.3 不同处理方式对内蒙古绒山羊血清抗氧化性能的影响

如表3 所示，试验Ⅱ组GSH-PX 显著高于试验Ⅰ组和对照组(P＜0.05)，试验Ⅰ组和对照组之间无显著差异(P>0.05)。

表3 不同处理方式对内蒙古绒山羊血清抗氧化性能的影响

2.4 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊血清生殖激素的影响

如表4 所示，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组雌二醇E2 显著高于对照组(P＜0.05)，试验Ⅱ组促卵泡素FSH 和促黄体素LH 显著高于试验Ⅰ组和对照组(P＜0.05)。

表4 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊血清生殖激素的影响

3 讨论

3.1 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊繁殖性能的影响

在中草药研究应用的历史长河中，人们发现一部分中草药对动物的发情、产仔以及成年羊的生长具有积极作用，国内很多研究也表明，中草药添加剂可有效诱导动物的发情，对动物的繁殖性能具有积极作用[7]。 使用外源激素是诱导非繁殖季节母畜发情的技术手段之一，对于提高牛、羊等季节性发情动物的繁殖性能具有很高的应用价值。 国内外相关研究表明，使用海绵栓+PMSG 处理秋季空怀多浪母羊的发情率为80.4%，产羔率为94.4%[8]，李成(2015)等在利用CIDR+PMSG 对甘肃高山细毛羊进行同期发情的试验表明，在放栓后一定时间注射一定剂量的PMSG 可使其繁殖率达到最高[9]。本研究中试验Ⅰ组(中草药)和试验Ⅱ组(PMSG)发情率和产羔率均极显著高于对照组(P＜0.01)，试验Ⅱ组(PMSG)双羔率极显著高于试验Ⅰ组(中草药)和对照组(P＜0.01)，表明使用中草药添加剂和PMSG 均可极显著提高繁殖季节内蒙古绒山羊的产羔率，但使用PMSG 能极显著提高其双羔率。

3.2 不同处理方式对内蒙古绒山羊血清生化指标的影响

血清总蛋白(TP)由白蛋白(ALB)和球蛋白(GLB)组成，动物机体对蛋白质的消化和利用程度通常可体现在血清总蛋白含量的变化，当机体蛋白质代谢旺盛时，血清TP 随之升高，另外，血清TP 具有维持血管渗透压、酸碱平衡、运输代谢物等多种功能，与机体免疫功能密切相关，因此也能反映机体的抗病能力[10]。 国内相关研究表明，中草药的饲喂量与机体蛋白质的代谢有直接的关联，随着饲喂水平的提高，血清TP 和ALB 也会随之增加[11]，同时，孙明海等对仔猪的试验表明，中草药饲料添加剂可显著提高哺乳仔猪TP 和ALB 的含量，增强抗病力、体内蛋白质的沉淀和利用率，并促进其成长[12]。 本研究中试验Ⅰ组(中草药)和试验Ⅱ组(PMSG)血清TP 和ALB 较对照组有升高的趋势，表明中草药添加剂和PMSG 对内蒙古绒山羊机体蛋白质的代谢具有积极作用。

动物免疫球蛋白主要存在于动物血清中，其含量的高低为评估其免疫状况的重要指标之一。 相关研究表明，IgG 是哺乳动物血清中含量最高的免疫球蛋白，机体体内IgG 的含量与机体免疫能力的强弱成正比关系，IgG 能够与抗原结合，有效发挥吞噬细胞和病毒的作用。IgA 是一种蛋白质，这种蛋白质能够对机体消化道、呼吸道等局部粘膜起到作用，并保护机体的肠道免受伤害，IgM 是机体应对抗原物质最早出现的免疫球蛋白，能与机体结合清除病原体，在抗感染中起着至关重要的作用[13]。 玄家洁(2018)的研究指出，在育成羊的饲料中添加不同剂量的复方中草药饲料添加剂均可提高其血液中免疫球蛋白IgA、IgG 的含量，且随着添加量的增加，免疫球蛋白的含量也随之增加[14]。 本研究中试验Ⅱ组(PMSG)IgA 和IgG 显著高于对照组(P＜0.05)，试验Ⅰ组(中草药)较对照组也具有升高的趋势，表明PMSG 可有效增强内蒙古绒山羊机体的免疫性能， 中草药添加剂对绒山羊机体的免疫性能有一定影响但统计学差异不显著(P>0.05)，但具有积极作用，分析认为可能与中草药添加剂的饲喂量有关。

3.3 不同处理对内蒙古绒山羊血清抗氧化性能的影响

抗氧化酶可反映机体抗氧化功能， 生产中主要以SOD、GSH-Px 等抗氧化酶类含量和活力及氧化代谢产物MDA 水平作为评价机体组织器官机能的重要指标。正常情况下，机体氧自由基的产生与清除保持平衡，但在衰老、疾病或特殊生理情况下，机体抗氧化酶的活性显著降低，这些氧自由基大量积累，对机体造成极大破坏作用[15]。 MDA 作为评价机体抗氧化性能的一种重要物质，间接的反映了机体受自由基损害的严重程度，辣根过氧化物酶(HRP)具有消除机体过氧化物的作用，通过催化过氧化物反应和还原反应对机体起到一定的保护作用。 国内外相关研究表明，较高水平的GSH-Px 和SOD 和较低水平的MDA 可体现动物机体具有较高的抗氧化性能。 本研究中试验Ⅱ组(PMSG)GSH-Px 含量显著高于试验Ⅰ组(中草药)和对照组(P＜0.05)，MDA 和SOD 三组之间无显著差异，但试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的SOD 含量较高于对照组，试验Ⅰ组(中草药)的MDA 含量最低，表明中草药添加剂和PMSG 对内蒙古绒山羊机体的抗氧化性能具有积极作用。

3.4 不同处理方式对繁殖季节内蒙古绒山羊血清生殖激素的影响

FSH 和LH 可促进卵泡成熟和排卵，刺激卵泡内膜细胞产生雌激素等其他性激素[16]。在动物发情周期中LH 分泌有明显的规律性，呈脉冲式分泌，卵泡期基本保持稳定，通常在发情期出现最高峰，FSH 在发情期也出现一个高峰，但没有LH 明显[17]。 E2 可刺激卵泡发育、诱导发情行为，与催乳素协同作用，促进乳腺导管系统发育。研究表明，母羊在发情时E2 可达高峰，之后会迅速降低[18]。欧阳富龙(2017)等的研究表明，复方中草药对奶牛血清中E2、FSH、LH 含量具有一定的调控作用，能缓解由E2 剧烈变化引起的生理应激[19]。S.Ocak(2013)等使用FSH+600 IU PMSG 处理绵羊，子宫内腹腔镜辅助人工授精后，能获得(7.8±1.2)个可移植胚胎，其认为单次注射FSH 较好于传统递减法注射FSH 的效果[20]。 K.C.Lehloenya(2013)使用FSH+350 IU PMSG 肌肉注射波尔山羊，48 h 后撤除孕酮阴道海绵栓，单次注射FSH 可获得(9.56±1.90)个胚胎，而多次注射FSH 只获得(0.22±0.2)个胚胎，表明单次注射FSH 对波尔山羊的超数排卵效果更好[21]。

本研究中试验Ⅰ组(中草药)和试验Ⅱ组(PMSG)E2 显著高于对照组(P＜0.05)，试验Ⅱ组(PMSG)FSH 和LH 显著高于试验Ⅰ组(中草药)和对照组(P＜0.05)，表明中草药添加剂和PMSG 可显著提高内蒙古绒山羊血液E2 的水平，使用PMSG 可显著提高内蒙古绒山羊血液FSH 和LH 的水平，综上，中草药添加剂和PMSG 均可有效提高内蒙古绒山羊血清相关生殖激素的水平， 从而促进其发情， 且使用PMSG 效果更佳。

4 结论

中草药添加剂和PMSG 处理可显著提高繁殖季节内蒙古绒山羊的发情率和产羔率(P＜0.01)，且使用PMSG 可显著提高其双羔率(P＜0.01)；使用两种不同方式均能有效改善其机体的抗氧化性能，增强机体免疫能力；中草药添加剂和PMSG 处理均能提高繁殖季节内蒙古绒山羊血清相关生殖激素的水平，且使用PMSG 效果更佳。