中国假脐菇属一新记录种1)

2022-03-28于晓东王雪峰姜怿徐济责

东北林业大学学报 2022年1期

于晓东王雪峰姜怿徐济责

(吉林农业大学，长春，130118) (吉林农业科技学院)

假脐菇(Tubaria)属担子菌门(Basidomycota)，伞菌纲(Agaricomycetes)，伞菌目(Agaricales)，假脐菇科(Tubariaceae)，建立于1876年，模式种 [T.furfuracea(Pers. ex. Fr) Gillet.][1]。假脐菇属曾因形态特征与丝膜菌科(Cortinariaceae)物种相近而被归入其中[2]，但1986年，Singer[3]因假脐菇属孢子光滑，菌柄中生，认为其与靴耳属(Crepidotus)、暗褶伞(Melanophyllum)属相近，而将其归入靴耳科(Crepidotaceae)中；此外，Horak[4]还曾认为假脐菇属属于球盖菇科(Strophariaceae)。但是，多数分子系统学的研究结果均支持假脐菇属作为独立的分支[5-7]，Vizzini[8]于2008建立假脐菇科(Tubariaceae)，将假脐菇属作为该科的模式属。

假脐菇属主要特征：子实体亚脐菇至金钱菌状，菌盖较小；菌褶直生至延生；菌柄中生；菌幕有或无，常有丝膜状假根；孢子纹饰有或无，肾形、杏仁形、椭圆形至近圆柱形，无芽孔；缘生囊状体常见，异形或近异形；侧生囊状体无；子实层菌髓规则或近规则；盖皮菌丝平匐，色素有或无[3]。

截至目前，假脐菇属共有90个物种。在我国，仅有4个物种被报道过，即石栎假脐菇(TubarialithocarpicolaM. Zang)、粗糙假脐菇(Tubariaconfragosa(Fr.) Harmaja)、鳞皮假脐菇(Tubariafurfuracea(Pers.) Gillet)、鳞柄假脐菇(TubariasquamataY. Li & H. Zeng)[9-11]。本研究报道1个新记录物种，散生假脐菇(Tubariaconspersa(Pers.) Fayod)。

1 材料与方法

1.1 标本采集

标本于2021年8月采自吉林省白山市与吉林市，新鲜子实体的生境及宏观形态照片采用佳能80D相机拍摄。详细记录其形态特征后，将新鲜的子实体置于电热鼓风干燥箱中55 ℃烘干，烘干后的标本保存于吉林农业科技学院真菌标本馆中(HMJU)。

1.2 标本形态观察

宏观特征描述根据标本采集记录以及宏观形态照片，详细记录新鲜担子体的外部形态特征，包括担子果各部分(菌盖、菌褶、菌肉、菌柄)的形态、尺寸、颜色等一切特征，颜色的记录使用比色卡对照[12]。微观特征观察时，徒手切取干标本的组织，选用质量分数3%的KOH作为浮载剂，待组织充分复水后，使用Olympus BX 53光学显微镜进行观察，必要时使用质量分数1%的刚果红染色。分别使用棉蓝染液、铁-醋酸洋红染液、梅氏试剂，检验孢子的嗜蓝反应、担子中的嗜铁颗粒有无以及孢子的淀粉质。使用Cellstandard软件进行显微数据测量和拍照，测量时随机选取至少30个孢子、担子及囊状体，数据以(a)b—c(d)的形式记录，其中b—c包括90%的数据，a和d代表最小值和最大值。Q代表孢子长宽的比值，Qm代表Q的平均值。在扫描电镜下观察孢子的表面状态，依据微观特征使用针管笔和硫酸纸绘制线条图。

1.3 分子系统学分析方法

采用生工基因组DNA提取试剂盒提取DNA。18S rDNA和28S rDNA 基因转录间隔区序列(ITS序列)扩增选用引物ITS1/ITS4[13]，28SrDNA大亚基序列(nrLSU序列)扩增选用引物LR0R/LR7[14-15]。聚合酶链式反应(PCR)程序参考Xu et al.[16]，①ITS，94 ℃ 4 min、(94 ℃ 45 s，52 ℃ 45 s，72 ℃ 1 min)×34个循环、72 ℃ 10 min；②nrLSU，94 ℃ 4 min、(94 ℃ 40 s，46 ℃ 45 s，72 ℃ 40 s)×30个循环、72 ℃ 4 min。聚合酶链式反应产物送样测序，测序由北京华大基因有限公司完成。所得序列提交至基因数据库(Genbank)。系统发育分析的序列，选择参考生物大分子序列比对搜索工具(BLAST)的比对结果与近年的系统发育分析研究[7，11，17]，所用的序列信息见表1。将所选序列通过MAFFT软件比对后，在Bioedit软件中手动调整。模型选择通过ModelFinder软件完成，选用的最佳模型为GTR+F+I+G4。采用MrBayes 3.2.2软件和IQTREE软件分别用贝叶斯分析法(Bayes)和最大似然法(ML)构建系统发育树。将锈色暗皮伞(FlammulasterferrugineusMaire ex Watling)设为外群。所得拓扑结构使用Figtree查看和修饰。

表1 系统发育分析所用序列信息

续(表1)

2 结果与分析

2.1 形态特征

散生假脐菇——中国新记录种(见图1、图2)。

Tubariaconspersa(Pers.) Fayod, Annls Sci. Nat., Bot., sér. 7 9: 355 (1889)

≡AgaricusconspersusPers., Icon. Desc. Fung. Min. Cognit. (Leipzig) 2: pl. 50 (1800)

≡Naucoriaconspersa(Pers.) P. Kumm., Führ. Pilzk. (Zerbst): 76 (1871)

≡Inocybeconspersa(Pers.) Roze, Bull. Soc. bot. Fr. 23: 113 (1876)

≡Hylophilaconspersa(Pers.) Quél., Enchir. fung. (Paris): 103 (1886)

=Agaricusconspersusvar.ochraceusAlb. & Schwein., Consp. fung. (Leipzig): 166 (1805)

=Tubariaconspersavar.brevisRomagn., Revue Mycol., Paris 5(1): 37 (1940)

担子果亚脐菇至金钱菌状；菌盖直径0.95～1.25 cm，平展，近圆形，中央呈棕橙色(7E8)，边缘浅棕橙色(6C4，6C5)，表面近水渍状，有细小的白色绒毛，向边缘渐密，边缘平展，有浅条纹，有的存残余菌幕；菌褶直生至稍延生，0.25 mm厚，0.8～1.2 mm宽，不等长，初期呈淡灰橙色(6B3)，子实体成熟呈现土橙色(7C7)，稀疏，边缘齿状；菌柄(19.0～24.5)mm×(1.8～2.0)mm，圆柱形，整体呈淡橙色(6A5)，表面有淡的纵向条纹，密被细小的白色绒毛，基部绒毛较密集，中实。菌肉呈土橙色(7C7)，薄。

图1 屑皮假脐菇宏观形态特征及孢子电镜照片

A为孢子；b为褶缘囊状体；c为担子；d为菌盖皮层菌丝。标尺：a为1 μm；b、d为10 μm；c为5 μm。

担孢子[(4.2)4.3～5.8(5.9)]μm×[(3.1)3.2～3.9]μm，Q=(1.21)1.26～1.73，椭圆形或近泪滴形，淀粉质，光滑，无色，薄壁。担子[(16.2)17.2～21.7(22.3)]μm×[(4.5)5.3～7.5(8.4)]μm，棍棒形或近圆柱形，无色透明，2～4孢子，担子小梗长(2.4)2.7～5.1(5.9)μm；褶缘囊状体[(17.8)19.9～36.3(53.7)]μm×[(6.8)7.7～13.0(14.3)]μm，簇生，窄棍棒状至棍棒状，无色透明，壁薄；褶侧囊状体未见；菌髓菌丝平行，圆柱形，透明，薄壁，2.22～15.52 μm宽；菌盖皮层规则，近平行，菌丝圆柱形，透明，薄壁，3.52～22.52 μm宽；菌柄皮层菌丝规则，近平行，菌丝圆柱形，透明，薄壁，4.17～14.99 μm宽。

生境：单生或散生于针阔混交林地上。

分布：英国[18]；印度[19]；中国。

标本信息：于晓东，刘汶鑫，2021年8月8日，吉林省白山市抚松县露水河镇红松王风景区，HMJU3949；徐济责，于晓东，2021年8月19日，吉林省吉林市昌邑区左家镇马虎头山，HMJU4297。

2.2 系统发育分析结果

新得序列上传至基因数据库(登录号：HMJU3949，ITS，OK448261，LSU，OK448330；HMJU4297，ITS，OK448262)。基于ITS的系统发育树共包含40条序列，其中38条是从基因数据库下载得到的，用最大似然法和贝叶斯法构建的系统发育树得到相同的拓扑结构(见图3)，在此仅显示贝叶斯树，贝叶斯分析支持率小于0.95的和最大似然分析支持率小于75的用“--”代替，新获得的序列标为橙色。由图3可见：标本HMJU3949、HMJU4297均与T. conspersa的序列聚在同一支，且有较高的支持率(贝叶斯分析支持率为1，最大似然分析支持率为100)。