醋延胡索饮片中延胡索乙素与其炮制温度的相关分析

2022-03-23郑镇永陈春娣黄昌杰黄华强杨素明

中国药学药品知识仓库 2022年1期

关键词：温度

郑镇永　陈春娣　黄昌杰　黄华强　杨素明

摘要：目的：验证HPLC法测定醋延胡索饮片中的延胡索乙素含量，探索不同炮制温度醋延胡索饮片中延胡索乙素的相关性，以及内在差异;方法：色谱方法为：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.1%磷酸溶液（55：45）为流动相;检测波长为280nm; 结果：醋炙温度的变化会影响醋延胡索中延胡索乙素的含量。结论：本检测方法简单，结果准确，重现性好;能准确的指导日常醋炙温度参数的设置，用140℃进行醋炙延胡索乙素含量最高。

关键词：醋延胡索;延胡索乙素;醋炙;温度;

【中图分类号】R97 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2022）1--01

延胡索（CORYDALIS RHIZOMA）为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎。夏初茎叶枯萎时采挖，除去须根，洗净，置沸水中煮至恰无白心时，取出，晒干。延胡索辛、苦，温。归肝、脾经。能活血，行气，止痛。用于胸胁、脘腹疼痛，胸痹心痛，经闭痛经，产后瘀阻，跌扑肿痛^[1]。。延胡索药用价值高，应用范围广，临床常用来镇痛抗炎，抗肿瘤，治疗胃肠道及心血管疾病;延胡索主要生于丘陵草地。本实验采用HPLC法测定醋延胡索饮片中延胡索乙素含量测定，进一步分析醋炙温度和时间与其延胡索乙素含量的相关性，为该饮片提供更全面的实验依据，探索更合理的醋炙条件。

1仪器、设备与试药

1.1仪器

LC-16型高效液相色谱仪（岛津仪器（苏州）有限公司）;HH-8型数显恒温水浴锅（常州澳华仪器有限公司）;SHZ-D（Ⅲ）型循环水式多用真空泵（河南省予华仪器有限公司）; MSE3.6P-0CE-DM型精密分析天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）;AUW120D型分析天平（日本岛津）;DZF6020MBE型真空干燥箱（上海博迅实业有限公司）;QHRO-10L型超纯水仪（东莞市谦和水处理工程有限公司）等。

1.2 设备

RY-3000润药机（方型）（杭州富阳康华制药机械有限公司）、SQY-300往复式切药机（杭州富阳康华制药机械有限公司）、LG-KFFRS-15IIW热泵烘干抽湿机（东莞市蓝冠环保节能科技有限公司）、CY550-Ⅲ电热炒药机（常熟市中药机械厂）、XY-700洗药机（杭州富阳康华制药机械有限公司）等。

1.3 试药

延胡索乙素（批号：110726-202020，中国食品药品检定研究院）;甲醇、乙腈（色谱纯，霍尼韦尔贸易（上海）有限公司），其余试剂均为分析纯;延胡索样品来自浙江，经副主任中药师黄昌杰鉴定為罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎，具体信息见表1;米醋（批号：F200401，山西醯湖美食品有限公司）。

2 饮片的制备

2.1 炮制工艺

2.1.1 净制：清除混在药材中的杂质及霉变品、泥土及灰尘等。

2.1.2 洗润：将净制后的中间产品，用流动的饮用水清洗，将药材表面的泥沙杂质清洗干净，用洁净的盛器接盛洗好的药材。

2.1.3 切制：按切药机操作规程操作，设置好刀距及切制速度，切药时先试切，用游标卡尺检测，调整好切制厚度，符合要求后再正式切药，片厚3mm。

2.1.4 醋炙：设置炒药机温度，开启炒药机预热，待升至设定温度时，将闷润好的药材倒入炒药机中;每次醋炙时，用文火^[5]（120～150℃）炒干，微有醋香气，出料。

2.2 样品的准备取延胡索药材，除去杂质后清洗干净沥干水，加入米醋拌匀，放入润药机中润15h至无干心米醋吸尽，切3mm片的;炒药机分别设置120℃、125℃、130℃、135℃、140℃、145℃、150℃进行醋炙。

3 方法与结果

3.1 测定方法

对照品溶液的制备取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含46μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取经2.2处理过的粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入浓氨试液-甲醇（1：20）混合溶液50ml，称定重量，冷浸1小时后加热回流1小时，放冷，再称定重量，用浓氨试液-甲醇（1：20）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）（55：45）为流动相;检测波长为280nm。理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

3.2线性关系考察

分别制成浓度为9.32μg/ml、23.30μg/ml、46.35μg/ml、74.56μg/ml、93.20μg/ml的对照品溶液，按3.1项下色谱条件测定，以对照品浓度x为横坐标，峰面积y为纵坐标，计算回归方程：y= 8274.8x+40890，r=0.9996，表明延胡索乙素在0.093ug～0.932ug范围内有较好的线性关系。

3.3精密度试验

精密吸取46.35μg/ml对照品溶液10uL，连续进样6次，按3.1项下色谱条件测定，结果：峰面积RSD：0.4%，出峰时间RSD：0.04%（n=6），表明仪器精密度良好。

3.4重复性试验

按照3.1项下供试品溶液的制备方法平行制备6份供试品溶液，按3.1项下色谱条件进行测定延胡索乙素的含量，延胡索乙素的平均含量：0.103%，RSD：0.5%（n=6），说明该方法重现性良好。

3.5 加样回收率试验

取醋延胡索粉末9份，按照3.1项下供试品溶液的制备9份供试品溶液，分别加入46.35μg/ml对照品溶液5ml、10 ml、15 ml各3份，按3.1项下色谱条件测定含量。结果平均加样回收率：99.8%，RSD：1.1%。结果见表2。

3.6 测定

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色譜仪，测定，即得，见表3

4讨论

4.1 从表3数据可得出，温度升高会影响醋延胡索中延胡索乙素含量。

4.2 本研究进行了延胡索不同醋炙温度的比较，温度达到140℃时，延胡索乙素到达一个最高值，随后温度的升高延胡索乙素的含量也会相应的下降;实验表明延胡索乙素会随着温度升高到一个顶点后，随着温度再次升高会趋于下降状态。

4.3 通过对醋炙延胡索温度的研究，结合HPLC指标成分分析，建立中药有效成分含量与醋炙温度的技术研究，有利于规范法定标准炮制条件的设定，更客观的对中药饮片进行质量控制。根据不同的温度对含量影响探究，才能更好地把控饮片的质量，促使中药饮片行业向着更好的方向发展。