30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽及2种蜘蛛的室内毒力测定

彭宇聪 高 源 王梦思 崔清梅 徐 卓 彭 宇

(1.湖北大学资源环境学院 湖北武汉 430062；2.湖北大学生命科学学院 湖北武汉 430062；3.湖北省恩施州农业科学院茶叶研究所 湖北恩施 44500)

茶脊冠网蝽Stephanitischinensis又名茶网蝽，是我国西南茶区主要害虫[1]。茶脊冠网蝽具有体积小、易繁殖、易扩散、易爆发、多重危害和难以控制等特点[2]。主要集中在成熟茶叶的背面刺吸叶片汁液，种群数量较大时也会危害到新生长出来的嫩叶，使受害茶树叶片正面呈现许多白色斑点，危害严重时茶园整体远看一片灰白[3]，影响茶树生长，导致茶树产量和质量下降[4]，甚至会导致茶树枯死。

近年来，由于商贸往来、种苗采购、气候变化等使得该虫传播速度增长较快[5]。2012年茶脊冠网蝽于陕西省紫阳县、镇巴县向东北方向呈梯次的传播形式进行扩散[6]。2013年底，茶脊冠网蝽已扩散到镇巴县的10个镇，紫阳县5个镇，大片茶园受到不同程度的危害[3]。截止2017年，茶脊冠网蝽已蔓延到汉江流域、嘉陵江流域的十五个重点产茶乡镇，约7297hm2茶园发生了茶脊冠网蝽危害[5]。2016-2020年茶脊冠网蝽在恩施州及其周边茶区大爆发，已成为当地茶叶生产中最严重的虫害之一。

现阶段茶脊冠网蝽的防治仍以化学防治为主，但化学防治会导致环境污染、农药残留、害虫抗药性和伤害天敌等问题[7-9]。30%茶皂素水剂为近年登记的植物源农药，对环境的兼容性好、无污染、残留低，对多种茶园害虫具有较好的防控效果[10]。为探究30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽的防治效果，我们测定了30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽和蜘蛛的室内毒性，为利用30%茶皂素水剂防治茶脊冠网蝽提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试昆虫

供试昆虫为茶脊冠网蝽Stephanitischinensis2至3龄若虫，采自恩施州农科院茶叶所试验基地。

供试蜘蛛为机敏异漏斗蛛Agelenadifficilis、白斑猎蛛Evarchaparalbaria，采自恩施州农科院茶叶所试验基地。将采回的蜘蛛单头饲养于玻璃管(长13cm，直径2cm)中[11]。

1.2 供试杀虫剂

30%茶皂素水剂，湖北信风作物保护有限公司提供。0.3%苦参碱水剂，河北沃德丰药业有限公司提供。

1.3 30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽若虫的室内毒力测定

采用叶片浸药饲虫法[12]测定30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽若虫的毒性。将30%茶皂素水剂配置为10、20、40、80和160(单位：g/L)5个浓度。混配液为30%茶皂素水剂+0.3%苦参碱水剂。配置5个浓度梯度(单位：g/L)(5+2、10+4、20+8、40+16、80+32)。选用化学农药2.5%联苯菊酯配置5个浓度梯度(单位：mg/L)(1、2、4、8和16)作为对照。

将新鲜茶叶用蒸馏水洗净晾干，浸入药液30s取出沥干至茶叶表面不再形成水珠。用脱脂棉包住茶叶柄基部，滴加相对应浓度的药液以防叶片失水干枯。将浸药茶叶置于直径9cm培养皿中，每皿接入茶脊冠网蝽2-3龄若虫20头，置于培养箱中(T=28±1℃、RH=80%±5%、L：D=14：10)。每个浓度重复5次，以清水为空白对照。处理24h、48h和72h后观察茶脊冠网蝽的死亡数。

1.4 30%茶皂素水剂对2种蜘蛛的毒性测定

使用药膜法[13]测定30%茶皂素水剂及混配液对机敏异漏斗蛛、白斑猎蛛的毒性。将30%茶皂素水剂和混配液按照田间使用浓度进行稀释。即30%茶皂素水剂用水稀释300倍，30%茶皂素水剂和0.3%苦参碱水剂等体积混合，用水稀释500倍。用滴管向玻璃管(长度13cm、直径2cm)中分别滴加稀释过的30%茶皂素水剂和混配液。转动玻璃管至玻璃管内壁均被药液润湿后将其倒置，等待玻璃管内壁自然风干。向风干的玻璃管中接入1头蜘蛛。24h和48h后检查蜘蛛是否存活。每种药剂处理蜘蛛30头。

1.5 30%茶皂素水剂对2种蜘蛛的驱避率测定

参照秦燕妮的方法测定供试药剂对蜘蛛的驱避作用[14]。供试药剂及处理包括：30%茶皂素水剂300×、混配液同上和2.5%联苯菊酯乳油1500×，以清水作为对照。先将直径12cm的圆形滤纸对折分成4等份。用滴管将供试药剂滴加到滤纸上，待药液干后，将滤纸放入直径12cm的培养皿中。每皿接入1头蜘蛛，每1h观察并记录蜘蛛的所在位置。每种蜘蛛共测定30头，每个处理重复5次。试验过程于安静环境下进行。

1.6 数据处理及统计分析

死亡率=试虫死亡数/试虫总数×100%

校正死亡率=(处理死亡率-对照死亡率)/(1-对照死亡率)×100%

驱避率=(对照试虫数-处理试虫数)/对照试虫数×100%

运用SPSS 22.0统计软件对数据进行统计分析。按照Finney几率值分析法[15]，求毒力回归方程、致死中浓度、95%置信限。在不同滤纸上蜘蛛的停留头数差异采用单因素方差分析，平均数的多重比较采用最小显著性极差法。

2 结果与分析

2.1 30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽若虫的毒力测定

30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽若虫具有一定的毒杀活性。24h后，茶脊冠网蝽在取食了供试药剂处理的叶片后其活动减弱，触碰虫体其反应强度降低。供试药液浓度越高茶脊冠网蝽致死性越强，且随时间延长，死虫数增加。30%茶皂素水剂处理24h、48h和72h后，对茶脊冠网蝽若虫的致死中浓度LC50(单位：g/L)分别为98.74、55.66和43.11(表1)。30%茶皂素水剂与0.3%苦参碱水剂混配液对茶脊冠网蝽若虫的作用效果与30%茶皂素水剂一样，随时间延长，毒杀效果逐渐增加。但LC50与30%茶皂素水剂相差不明显，表明混配增效作用不明显。2.5%联苯菊酯处理后，迅速有若虫死亡。随时间延长，死亡数逐渐增加。其对茶脊冠网蝽若虫的速效性及毒力均高于30%茶皂素水剂。

表1 30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽若虫的毒力回归方程

表2 2.5%联苯菊酯乳油对茶脊冠网蝽若虫的毒力回归方程

2.2 30%茶皂素水剂对2种蜘蛛的毒性

30%茶皂素水剂300倍稀释液及其混配液处理的机敏异漏斗蛛和白斑猎蛛在24h、48h后均活动正常。说明30%茶皂素水剂300倍稀释液及其混配液对供试的2种蜘蛛均无直接毒杀作用。

2.3 30%茶皂素水剂对2种蜘蛛的驱避作用

药剂对蜘蛛驱避程度的大小可用该种试剂处理区域内停留蜘蛛的数量表示，驱避程度大则该种试剂处理区域停留的蜘蛛数量少[16]。30%茶皂素水剂处理滤纸上蜘蛛的停留数与对照无差异，表明30%茶皂素水剂对机敏异漏斗蛛的驱避作用与对照没有差异，极显著低于化学药剂2.5%联苯菊酯处理，但混配液对机敏异漏斗蛛有一定的驱避作用(表3)。

表3 机敏异漏斗蛛在不同杀虫剂处理滤纸上的停留数量

不同药剂处理对白斑猎蛛的驱避作用与机敏异漏斗蛛类似(表4)。30%茶皂素水剂处理滤纸上白斑猎蛛的停留数与对照并无差异，但白斑猎蛛的在混配液处理的滤纸上停留的头数显著低于对照。表明30%茶皂素水剂对白斑猎蛛没有驱避作用，但混配液对白斑猎蛛存在一定的驱避作用。30%茶皂素水剂及混配液对白斑猎蛛驱避作用均极显著低于2.5%联苯菊酯。

表4 白斑猎蛛在不同杀虫剂处理滤纸上的停留数量

3 讨论

茶脊冠网蝽的爆发已经严重影响恩施州的茶叶产量与质量，成为恩施州茶叶产业发展被制约的主要因素之一。30%茶皂素水剂作为植物源农药，具有纯天然且环保、作用方式繁多、杀虫针对性更强等诸多特点[17，18]。

本研究表明，30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽3龄及以下若虫表现出毒杀活性，且随时间延长，处理药剂浓度增加，其作用效果逐渐增强。尽管30%茶皂素水剂及混配液对茶脊冠网蝽的毒性比化学农药2.5%联苯菊酯低，但对茶园蜘蛛的影响小[19]，对供试的机敏异漏斗蛛和白斑猎蛛没有毒性，也无明显的驱避作用，表明30%茶皂素水剂对茶脊冠网蝽的田间防治具有一定的潜力。

Pekar and Benes 认为杀虫剂对不同类型的蜘蛛的影响可能不同，由于蛛网的作用，结网型蜘蛛可能比游猎型蜘蛛具有更大的生存优势[20]。本研究的两种蜘蛛均为恩施州茶园优势种蜘蛛[21]，其中，机敏异漏斗蛛为结网型蜘蛛，白斑猎蛛为游猎型蜘蛛，供试杀虫剂对这两种蜘蛛的驱避作用并没有差异。由于本研究测定的蜘蛛种类较少，30%茶皂素水剂对蜘蛛的影响还有待进一步研究。