H2S、HBP、sTREM-1在尿源性脓毒血症中的表达及诊断价值分析

谈朦 卢子文 李卫林

尿源性脓毒血症是泌尿外科常发生的抑制危急重症，其特点是发病急，进展迅速，病情较为凶险，大部分患者在住院前已经伴随全身炎症反应综合征发生，如果治疗不及时，会向脓毒性休克方向发展，严重的患者出现多器官功能障碍，病情难以控制，增加死亡率［1-2］。因此，早期诊断尿源性脓毒血症，有助于提高患者生存率。内源性硫化氢（Endogenous hydrogen sulfide，H2S）是一种主要在组织细胞中所表达的气体信号分子，可参与多种病理、生理反应［3］。尿肝素结合蛋白（Urinary heparin-binding protein，HBP）是具有杀菌活性的物质，主要由中性粒细胞激活后所分泌，可与内皮细胞相互作用，增加血管通透性，最终引发水肿及脏器损伤［4］。髓样细胞触发受体1（Myeloid cell trigger receptor 1，sTREM-1）是与细菌性脑膜炎、肺炎、炎症性肠炎、脓毒症等多种疾病存在联系的TREM-1 可溶形式［5］。目前临床关于H2S、HBP、sTREM-1 在尿源性脓毒血症联合检测的相关研究甚少，本文旨在研究H2S、HBP、sTREM-1 与尿源性脓毒血症严重程度的相关性，为临床诊断提供理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019 年5 月至2021 年5 月在本院诊断尿源性脓毒血症患者140 例分为观察组。选择同期经皮肾镜或经输尿管镜手术后非尿源性脓毒症患者120 例分为对照组。收集患者一般资料，年龄、BMI、性别、实验室指标C 反应蛋白（C-reactive protein，CRP）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、降钙素原（Procalcitonin，PCT）、白细胞计数（White blood cell count，WBC）、纤维蛋白原（Fibrinogen，FIB）、肿瘤坏死因子-ɑ（Tumor necrosis factor-ɑ，TNF-ɑ）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）。（1）纳入标准：所有患者均符合《泌尿系感染诊断治疗指南》中［6］的诊断标准，存在泌尿系统感染症状；患者脓尿、尿生化检查为阳性；尿细菌菌落计数≥105 CFU/mL；所有患者均为首次行皮肾镜、输尿管镜手术。（2）排除标准：合并肿瘤、血液疾病、冠心病患者；免疫功能障碍患者；其他原因造成的全身性炎症反应综合征患者；两次以上行皮肾镜、输尿管镜手术患者；精神异常患者。

1.2 方法 （1）标本采集：抽取两组患者清晨空腹静脉血3 mL，置入肝素化离心管内充分混匀，用离心机以3,000 r/min 的转速分离，离心半径为12 cm，取上层血清保存至-20℃的冰箱中，冷藏待测。（2）生化指标检测方法：通过去蛋白法贵两组受试者H2S 水平进行检测。通过酶联免疫吸附（ELISA）法对两组患者HBP、sTREM-1 水平进行检测，将10μL 待测样品与40 μL待测样品稀释液加入孔中，轻微摇晃均匀，向孔中加入100 μL 酶标试剂，并进行封板，将其在37℃下孵育60 min，后弃去孔中液体，使用Wash Sohltion 进行重复清洗，清洗后加入显色剂50μL，摇晃均匀后在37℃下进行显色处理15 min，后加入50μL 终止液，终止反应，在450 nm 波长下检测OD 值，查出HBP、sTREM-1。HBP、sTREM-1 ELISA 试剂盒由上海富雨生物科技有限公司提供，货号分别为FY-03806H2、FY-04104H2。

1.3 统计学方法 采用SPSS 26.0 统计软件。计量资料符合正态分布以（±s）表示，采用独立样本t检验。ROC 曲线，分析H2S、HBP、sTREM-1 及三项联合对尿源性脓毒血症的诊断价值。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料比较 两组年龄、BMI、性别对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。观察组CRP、IL-6、PCT、WBC、FIB、TNF-ɑ、IL-1β 水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组基线资料比较

2.2 两组H2S、HBP、sTREM-1 水平对比 观察组H2S、HBP、sTREM-1 水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组H2S、HBP、sTREM-1水平对比（±s）

表2 两组H2S、HBP、sTREM-1水平对比（±s）

组别 n H2S（ng/mL） HBP sTREM-1对照组 120 45.63±5.01 226.79±24.88 3.14±0.43观察组 140 75.63±8.45 301.79±30.71 5.71±0.79 t 值 34.090 78.470 31.820 P 值 0.001 0.001 0.001

2.3 尿源性脓毒血症的因素分析 以是否发生尿源性脓毒血症为因变量（0=否，1=是），CRP、IL-6、PCT、WBC、FIB、TNF-ɑ、IL-1β、H2S、HBP、sTREM-1为自变量，建立Logistic 回归模型，并校正年龄、BMI、性别等混杂因素影响，最终CRP、IL-6、PCT、TNF-ɑ、H2S、HBP、sTREM-1 是发生尿源性脓毒血症的危险因素，见表3。

表3 尿源性脓毒血症的因素分析

2.4 H2S、HBP、sTREM-1 对尿源性脓毒血症的诊断价值 ROC 曲线显示，三项联合对尿源性脓毒血症的诊断价值高H2S、HBP、sTREM-1 单项诊断，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 H2S、HBP、sTREM-1对尿源性脓毒血症的诊断价值

3 讨论

脓毒血症是指患者血液中的感染源造成的全身性炎症反应综合征，尿源性脓毒血症是泌尿系统发生的脓毒血症。相关研究显示，经皮肾镜或者是经输尿管镜手术后尿源性脓毒血症发病率达23%，死亡率达35.2%，发生的主要原因是由于患者及其医护人员手术后重视不足，存在诊断滞后，容易错过最佳的治疗时间［7］。尿源性脓毒血症治疗每延迟1 h，患者的存活几率就下降8%，早期诊断尿源性脓毒血症是提高患者生存质量的关键［8］。

H2S 是具有细胞保护、促炎、调节血管收缩、调节氧化应激等作用的气体信号分子，在泌尿生殖系统、心血管、消化、内分泌系统中均发挥着重要作用［9-10］。研究表明［11］，H2S 在尿源性脓毒血症症中呈高表达，可通过促进趋化因子、IL-8、IL-10 等炎症因子的释放，且可使炎症细胞印在炎症部位转移，进而参与患者的炎症反应，推动了尿源性脓毒血症患者病情的进一步发展。本文研究显示，H2S 在尿源性脓毒血症症中呈高表达，其结果与既往研究结果一致，且高表达的H2S 与尿源性脓毒血症存在密切联系，提示H2S 为尿源性脓毒血症发生的危险因素。分析其原因为高表达的H2S 可促进尿源性脓毒血症患者炎症因子的释放，进而加重了患者炎症反应，推动了患者病情的进一步发展。

HBP 作为脓毒血症、器官功能衰竭、重症肺炎、脑膜炎、肾综合征出血热进展的预测指标，在细菌感染发展为脓毒血症时其水平明显升高［12-13］。正常情况下，HBP主要在中性粒细胞中的嗜天青颗粒、分泌颗粒中所存在，在细菌感染时，可释放进入血浆，进而对单核细胞、巨噬细胞起到了激活作用，且可与毛细血管内皮细胞相互作用，最终使得患者血管通透性增加，炎症反应加强，进而推动了尿源性脓毒血症患者病情的发展［14-15］。本文研究显示，在尿源性脓毒血症患者血清中HBP呈高表达，分析其原因为HBP 经A 型链球菌M1 蛋白复合体、纤维蛋白原激活后，可促进组织水肿的发生，最终可造成脏器严重损伤，加重了尿源性脓毒血症患者病情。此外本研究ROC 分析显示HBP 预测尿源性脓毒血症的AUC 达0.731，提示HBP 是孕妇发生尿源性脓毒血症的警示指标。

sTREM-1 是对尿源性脓毒血症早期诊断、病情严重程度评估、预后情况具有评估作用的TREM-1 可溶形式，TREM-1 主要在中性粒细胞、成熟单核-巨噬细胞等炎症细胞表面所表达，属于免疫球蛋白超家族成员，TREM-1 溶解于体液后可转化为sTREM-1，进而对急性炎症反应作用起到了促进作用［16］。研究显示［17］，sTREM-1 在化脓性关节炎、急性肾损伤、重症肺炎、急性胰腺炎等多种疾病中均呈高表达，可对患者感染严重程度进行反映。本文研究显示，尿源性脓毒血症患者血清中sTREM-1 呈高表达，且与尿源性脓毒血症的存在密切联系，提示sTREM-1 为尿源性脓毒血症发生的危险因素。分析其原因为过度表达的sTREM-1 会可加重机体炎症反应，造成局部血流动力学紊乱，且可促进氧化应激功能障碍的发生，进而推动了尿源性脓毒血症的发生。

综上所述，本文研究显示，H2S、HBP、sTREM-1在尿源性脓毒血症患者中表达较高，三者均为尿源性脓毒血症的独立危险因素，且ROC 曲线显示，三者联合对尿源性脓毒血症的诊断价值较高，对H2S、HBP、sTREM-1 水平进行动态检测，可为患者治疗效果、预后的判定提供一定借鉴。但因样本量过少，且未对其作用机制进行分析，因此还需后续进一步分析H2S、HBP、sTREM-1 参与尿源性脓毒血症发生、发展的具体机制。