15%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂的液相色谱法分析

2022-02-24许艳秋王广成安万霞吴春先高立明

世界农药 2022年1期

许艳秋，王广成，安万霞，吴春先，李婷，高立明

(1.四川省农药检定所，四川成都 610041；2.成都楠光先业科技有限公司，四川成都 610041)

氟啶虫酰胺(flonicamid)，化学名称为N-氰甲基-(三氟甲基)烟酰胺，CAS登记号为158062-67-0，是由日本石原产业株式会社开发的新型低毒吡啶酰胺类杀虫剂，目前已在全球30多个国家登记上市[1]。氟啶虫酰胺具有良好的渗透作用，通过阻碍害虫的吮吸作用从而将其饿死，在实际生产中广泛用于作物蚜虫等刺吸式口器害虫的防治[2]。联苯菊酯(bifenthrin)又名氟氯菊酯，化学名称为2-甲基联苯基-3-基甲基(Z)-(1R,3R; 1S,3S)-3-(2-氯-3,3,3-三氟丙-1-烯基)-2,2-二甲基环丙烷羧酸酯，CAS编号82657-04-3，具有触杀和胃毒作用，无内吸和熏蒸作用，是一种杀虫谱广、作用迅速的拟除虫菊酯类杀虫剂和杀螨剂[2]。联苯菊酯与氟啶虫酰胺进行复配可以弥补氟啶虫酰胺在速效上的不足[3]，从而达到更好的防治效果。

2020年6月23日，欧盟食品安全局(EFSA)发布消息称拟制定农作物和动物源食品中氟啶虫酰胺的进口限量[4]。因此，对氟啶虫酰胺相关产品质量进行监督和控制十分重要。目前，氟啶虫酰胺水分散粒剂含量[5]的检测方法已有文献报道，联苯菊酯乳油的检测方法也有相关标准[6]。然而，其混配制剂的检测方法却未见报道。因此本文建立了一种能够快速有效分离和测定混配制剂中氟啶虫酰胺和联苯菊酯的液相色谱方法，为其质量控制和监督管理提供技术支持。

1 试验部分

1.1 供试药剂

氟啶虫酰胺标准品[质量分数99.3%，国家农药质检中心(沈阳)]；联苯菊酯标准品(质量分数98.5%，上海市农药研究所有限公司)；15%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂(某公司提供)；乙腈(色谱纯，飞世尔科技公司)；超纯水(实验室制备)。

1.2 仪器

Agilent 1260高效液相色谱仪配二极管阵列检测器(美国安捷伦科技有限公司)；ZORBAX SB-C18不锈钢柱色谱柱[150 mm×4.6 mm (i.d.)，5 μm，安捷伦科技(中国)有限公司]。

1.3 色谱条件

流动相：乙腈+水，梯度淋洗，淋洗参数如表1所示；流速：1.0 mL/min；柱温：(30±2) ℃；检测波长244 nm；进样体积：5.0 μL。在该色谱条件下，氟啶虫酰胺和联苯菊酯的保留时间分别约为4.1 min和10.3 min。

表1 梯度淋洗参数

上述为典型操作条件，实际操作中可根据仪器自身特点作适当调整，以获得理想的效果。典型色谱图见图1。

图1 氟啶虫酰胺+联苯菊酯标样(上)和15%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂样品(下)的色谱图

1.4 试验步骤

1.4.1 标准溶液配制

分别准确称取氟啶虫酰胺标准品0.06 g (精确至0.000 2 g)、联苯菊酯标准品0.03 g (精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入适量乙腈超声溶解，恢复至室温后，用乙腈稀释至刻度，摇匀备用。

1.4.2 试样溶液的配制

准确称取15%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂样品0.6 g (精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用约5 mL水稀释混匀，加入适量乙腈超声溶解，恢复至室温后，用乙腈稀释至刻度，过滤备用。

1.4.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，用标准溶液连续进样，当相邻2针样品峰面积变化小于1.5%后，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进样测定。

1.4.4 计算

根据标准品和样品溶液中氟啶虫酰胺(或联苯菊酯)的峰面积，计算试样中氟啶虫酰胺(或联苯菊酯)的质量分数ω(%)，计算公式如下：

式中：A1为标样溶液中氟啶虫酰胺(或联苯菊酯)峰面积的平均值；A2为试样溶液中氟啶虫酰胺(或联苯菊酯)峰面积的平均值；m1为氟啶虫酰胺(或联苯菊酯)标样的质量，g；m2为试样的质量，g；p为标样中氟啶虫酰胺(或联苯菊酯)的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 流动相的选择

根据氟啶虫酰胺、联苯菊酯以及悬浮剂的特征，选择乙腈+水作为溶剂溶解样品。并以乙腈+水作为流动相，由于氟啶虫酰胺和联苯菊酯极性差别较大，在等度淋洗条件下保留时间差异大，容易造成氟啶虫酰胺出峰过早，影响目标物与杂质等的分离效果；或联苯菊酯出峰时间过晚，致使分析时间过长影响试验效率。因此，本文采用梯度淋洗方式进行洗脱，并优化了梯度淋洗条件(表1)。在该条件下基线平稳，氟啶虫酰胺、联苯菊酯和杂质能够有效地分离，且峰形对称，保留时间适中，分析时间较短，是理想的分离条件。

2.2 检测波长的确定

采用DAD检测器，对氟啶虫酰胺和联苯菊酯标样在210~400 nm波长下进行紫外扫描，得到其紫外吸收图(图2)。由图2可知，氟啶虫酰胺和联苯菊酯的最大吸收波长分别为265 nm和219 nm。由于吸收波长在219 nm附近可能存在的杂质干扰比较多，而在265 nm时联苯菊酯的吸收比较差，因此本文选择氟啶虫酰胺和联苯菊酯紫外吸收曲线的交叉点244 nm作为检测波长。在此条件下，氟啶虫酰胺和联苯菊酯都有较好的吸收，且无杂质干扰。

图2 氟啶虫酰胺和联苯菊酯标样的紫外吸收图

2.3 分析方法的线性相关性

分别配制5个浓度分别为0.439 1、0.864 4、1.093 8、1.339 1、1.685 3 mg/mL的氟啶虫酰胺标准溶液，按本文操作条件进行测定。以氟啶虫酰胺浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线(图3)。由图3可见，氟啶虫酰胺质量浓度与其响应值之间表现出良好的线性相关，其线性回归方程为y=2 172.3x-3.165 4，相关系数R2=0.999 9。

图3 氟啶虫酰胺和联苯菊酯的线性关系图

按照如上方法，配制5个浓度分别为0.360 5、0.516 1、0.638 3、0.758 5、1.138 7 mg/mL的联苯菊酯标准品溶液进行测定，得到联苯菊酯的线性回归方程为y=7 339.2x+28.263，相关系数R2=0.999 2。

2.4 方法精密度

采用本方法对同一批次样品中氟啶虫酰胺和联苯菊酯的质量分数进行6次平行测定，测试结果见表 2。从表 2可知，氟啶虫酰胺和联苯菊酯的质量分数平均值分别为10.47%和5.38%，标准偏差分别为0.056和0.041，变异系数分别为0.54%和0.76%。

表2 精密度测定结果

2.5 方法准确度

按照配方比例将除原药以外的所有助剂混匀，配制成15%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂空白样品，准确称取空白样品6份，分别加入一定量的氟啶虫酰胺标样、联苯菊酯标样，按照上述方法进行回收率测定，结果见表3。由表3可见，在氟啶虫酰胺和联苯菊酯的添加量分别为 59.14~64.78 mg和 30.73~33.98 mg时，其相应的回收率范围分别为 99.49%~100.50%和99.27%~100.25%，平均回收率分别为99.92%和99.85%。