沉默信息调节因子1在结肠腺癌组织中的表达及意义

张美兰，金仁顺，肖 斌，张 璇，张学武

(1.延边大学附属医院病理科，吉林 延吉 133000;2.延边大学医学院，吉林 延吉 133000)

结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，随着生活水平的提高、饮食结构的改变，我国结肠癌的发病率呈逐年上升趋势[1]。沉默信息调节因子1(SIRT1)是Sirtuins 家族成员之一，依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的组蛋白去乙酰化酶，在体内使组蛋白及非组蛋白去乙酰化参与细胞凋亡和细胞衰老等正常生理过程，近年的研究表明，SIRT1与多种肿瘤的发生发展有关，在不同肿瘤的发生发展过程中起不同作用[2-5]。本文选择结肠腺癌组织标本，采用免疫组化染色观察SIRT1在结肠腺癌中的表达，探讨其在结肠癌中的表达以及与临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2008年1月～2010年12月年确诊为结肠腺癌的石蜡组织标本58例(包括癌旁组织)为研究对象。所有组织经10%中性甲醛溶液固定24～48 h后常规脱水、石蜡包埋，进行厚3 μm连续切片，做常规HE染色和免疫组化染色。58例患者中男35例，女23例，年龄37～82岁，平均66岁。所有病例根据性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和远处转移以及TNM分期分两组，TNM分期参照世界卫生组织(WHO)肿瘤分类及诊断标准[6]。本次研究经本院医学伦理委员会同意。

1.2免疫组化染色结果判定标准：SIRT1定位于细胞核和细胞质，具体判断标准如下：按阳性细胞在切片中所占比率，<10%计0分，11%～50% 计1分，>50%计2分；根据染色强度，未着色为0分，黄色为1分，棕褐色为2分。两者相乘得出综合评分，0分为阴性(-)，1分为弱阳性(+)，2～4分为强阳性(++)。

1.3统计学分析：所有数据采用统计学软件SPSS22.0进行分析，计数资料以率(%)表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1SIRT1在结肠腺癌及癌旁组织中的表达：SIRT1在结肠腺癌和癌旁组织中阳性率分别为43.1%和6.9%，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。在高分化腺癌中，SIRT1在胞质和胞核均有表达，但在低分化腺癌中SIRT1主要表达于细胞核，仅有1例胞质也有表达，另外发现细胞异型性越大，染色越强。在部分腺腔内分泌物中也观察到SIRT1的表达。见图1、图2、表1。

图1 SIRT1在高分化腺癌细胞质中表达(Envision，×400)

表1 SIRT1在结肠腺癌组织及癌旁组织中的表达[n(%),n=58]

2.2SIRT1在结肠癌组织中的表达与临床病理特征的关系：SIRT1在结肠癌中的表达与患者年龄与肿瘤细胞的分化程度有关，与其他因素无关。见表2。

图2 SIRT1在低分化腺癌细胞核中表达(Envision，×200)

表2 SIRT1在结肠癌组织中的表达与临床病理特征的关系(n,n=58)

3 讨论

结肠腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一，其发生除了与遗传因素有关外，还与众多基因的改变和相互作用有关。SIRT1是依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的组蛋白去乙酰化酶在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用[7-8]。研究表明SIRT1在胰腺癌、宫颈癌、卵巢浆液性癌和肝癌等组织中的表达均高于癌旁正常组织，并与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关，其阳性率随着病变加重而增高，患者预后较差[9-12]。本研究结果显示SIRT1在结肠腺癌组织中表达明显高于癌旁组织，同时在低分化癌中的表达高于高-中分化癌，并在有淋巴结转移组和TNM分期越高其阳性率越高，与上述研究结果相似，提示SIRT1可能参与结肠癌的发展过程，与患者的预后不良有关。另外，在本研究还发现SIRT1在不同分化的结肠腺癌中其表达部位不同，即在低分化腺癌中在细胞核中表达，且细胞核异型性越大，染色强度越深，而在高分化腺癌中胞浆、胞核都均有表达，目前，SIRT1在细胞核和细胞质中表达意义尚不很明确。最初研究认为SIRT1是一种核蛋白，只在细胞核中存在，但之后研究发现SIRT1含有至少两个核定位信号和两个核输出信号，认为SIRT1是一种核质穿梭蛋白[13-14]，可以定位于细胞核和(或)细胞质，有研究报道在肝癌组织中SIRT1在胞质中表达的患者比在细胞核中表达的患者预后良好，可以作为判断预后的指标，结果提示SIRT1在结肠腺癌中表达部位与肿瘤的分化程度有关，认为SIRT1在核中表达可作为预测预后指标。SIRT1不仅参与肿瘤的发生，还是衰老相关的因子，随着年龄的增长人体内的SIRT1表达水平会逐渐降低[15-17]。有研究表明，椎间盘退变程度越高，其髓核细胞内SIRT1的表达量越低[18]。本研究发现SIRT1在结肠腺癌中的表达与年龄有关，<60岁的年龄组中的表达高于>60岁，因此认为随着年龄的增长SIRT1的表达可能会减少。

总之，SIRT1的阳性表达率和表达部位与结肠腺癌分化程度有关，即SIRT1阳性表达率越高，同时在结肠癌细胞核中的表达越高，其恶性程度越高，提示SIRT1在肿瘤中的高阳性率及细胞核中的高表达，可作为结肠腺癌患者的不良预后的预测指标。