八月瓜根际AM真菌资源调查

陶光耀，赵晨心，迟焕星

(贵州农业职业学院，贵阳 551400)

AM真菌是一种通过与植物根系产生互惠共生系统，彼此交换生长发育所需的营养物质的一类内生真菌[1]。在提高果树抗逆性、抗病、提高果实品质、促进植株的生长代谢以及改善植物对矿质营养的吸收具有显著作用。AM真菌与桃树[2]、梨树[3]、葡萄[4]、蓝莓[5-6]等20余种果树均能产生丛枝结构[7]。但八月瓜根际AM真菌的调查还未见报道。八月瓜是一种药食两用的木通科藤本植物，别称木通子、八月札、八月炸、预知子、腊瓜、野香蕉等。在我国分布于云南、贵州、四川、湖北、江西和西藏东南部海拔600～2 600 m的山坡、山谷密林等地[8]。因其富含多种营养物质以及多酚、黄酮、抗衰老等成分，具有较高的营养价值，在药用方面，其果皮、果实、叶、藤茎、根均可入药[9]。本实验取样于贵州百宜八月瓜种植基地的根际土壤，对AM真菌进行分离，通过比较形态学方法进行菌种鉴定，分析其AM真菌的多样性，筛选优势种属。旨在为后续研究八月瓜与AM真菌的共生系统提供参考。

1 材料与方法

1.1 土样采集

2021年10月，在贵州百宜八月瓜种植基地(26°49′54″N，106°56′17″E)采集植株根际土壤14份，采集时去表面2 cm的腐殖土层，采距地表5～15 cm 土层中的根际土壤1.5 kg左右，装入封口袋，土壤经风干之后放于4 ℃的冰箱保存备用。

1.2 AM真菌孢子的分离和鉴定

每份风干的土样中取50 g，采用湿筛倾注-蔗糖离心法，分离AM真菌孢子，挑取具有代表性的成熟和幼龄孢子[10]。置于生物显微镜下观察孢子的大小、颜色、形状、孢子壁的层数、厚度，连孢菌丝的形状，菌丝壁，连孔连通情况以及孢子表面有无纹饰或附着物、孢子内含物以及在 Melzer’s 试剂和棉蓝试剂染色中的反应等特征[11]。依据Mycobank Database(http://www.mycobank.org/)、Schnck和perez编著的《Manual for the identification of VA mycorrhizal fungi》、INVAM 网(http://invam.wvu.edu/home)和波兰农业大学(http://www.zor.zut.edu.pl/)上提供的图片和种属描述，并参阅其他有关分类资料和近年来发表的新种，新记录种，按照球囊菌门丛枝菌根真菌最新分类系统菌种名录进行分类[12]。

1.3 AM 真菌多样性指标测定方法

按上述孢子分离方法，每个土样重复3次测定以下指标：

孢子密度(SD):50 g风干土样中孢子的总数。

频度(F):(AM真菌某属或种出现次数/土样数)×100%。

相对多度(RA):该采样点某种孢子数占该采样点总孢子数的比例。

重要值(I):频度和相对多度的平均值，I=(F+RA)/2。

等级(Dom)：将AM真菌优势度按重要值(I)划分为4个等级(A、B、C、D)，A：I>60% 为优势属(种)，B：40%

2 结果与分析

2.1 AM真菌种类鉴定

经对八月瓜13份根际土样AM真菌的分离，共鉴定得AM真菌7属17种(见表1，图1)。

表1 AM真菌物种

2.2 八月瓜AM真菌多样性分析

贵州百宜八月瓜种植基地共鉴定出7属17种AM真菌，通过对重要值的计算比较(表2、表3)，未出现I>60%等级为A的种属，故此将重要值40%

表2 八月瓜根际AM真菌种多样性指标

表3 八月瓜根际AM真菌属多样性指标

3 结果与讨论

研究结果表明，通过对八月瓜根际土壤AM真菌的分离，鉴定出7属17种。但在实验过程中发现土壤中依然存有部分未知种，说明八月瓜根际AM真菌资源丰富。在已鉴定出的品种中初步判定幼套近明球囊霉为优势菌种，该结果可作为后续繁育八月瓜共生菌株的实验依据。

注：1为柯氏无梗囊霉[14]；2为细凹无梗囊[13]；3为椒红无梗囊霉[13]；4为大型无梗囊霉[14]；5为空洞无梗囊霉[13]； 6为幼套近明球囊霉[15]；7为近明球囊霉[16]；8为珠状巨孢囊霉[13]；9为美丽盾巨孢囊霉[13]；10为多梗球囊霉[13]；11为卷曲球囊霉[13]；12为悬钩子硬囊霉[13]；13为棒孢硬囊霉[13]；14为台湾硬囊霉[13]；15为高山隔球囊[17]；16为叉状隔球囊霉[18]；17为缩隔球囊霉[13]。图1 AM真菌物种形态(此图彩色版见封三)