羧甲淀粉钠中氯乙酸残留对马来酸氯苯那敏稳定性的影响*

2022-02-18伍伟聪王彩媚

中国药业 2022年2期

伍伟聪，王淼，陈英，王彩媚

（广东省药品检验所·国家药品监督管理局药用辅料质量控制与评价重点实验室，广东广州 510663）

羧甲淀粉钠具有良好的吸水性和膨胀性，在口服固体制剂中主要作为崩解剂［1-2］。羧甲淀粉钠的生产工艺国内多采用有机溶剂法，常以乙醇为溶剂，马铃薯淀粉或玉米淀粉作为原料，经氢氧化钠碱化后加入氯乙酸醚化生成羧甲淀粉钠，然后经离心、中和、干燥、粉碎与过筛等步骤制得成品［3］。其中，氯乙酸属受管制的危险化学品。欧盟《物质和混合物分类、标签和包装法规》（CLP）将其列为急性毒性类，吸入、皮肤接触及口服均会引起中毒，出现呼吸功能、循环系统或肝肾功能受损等情况［4-5］。世界卫生组织（WHO）和美国饮用水法规中均对饮用水中氯乙酸的最高允许浓度作了限定［6］。氯乙酸作为羧甲淀粉钠生产的起始物料，在成品中存在残留风险。本研究中采用离子色谱法［7］测定羧甲淀粉钠中氯乙酸的残留量，并以马来酸氯苯那敏为模型药物，考察羧甲淀粉钠中氯乙酸残留对其稳定性的影响。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

ICS-5000 型离子色谱仪（美国Dionex 公司）；KF115型恒温恒湿培养箱（德国Binder公司）；1100型高效液相色谱仪（美国Agilent 公司）；CP225D 型电子分析天平（德国Sartorius 公司，精度为十万分之一）；M8800H-C型超声波清洗仪（美国Bransonic公司）。

1.2 试药

羧甲淀粉钠65批（生产企业18家），其中国产48批（生产企业13家），进口17批（生产企业5家）；氯乙酸对照品（上海麦克林生化科技有限公司，批号为C10105800，含量为98.0%）；马来酸氯苯那敏对照品（中国食品药品检定研究院，批号为100047-201507，含量为99.7%）；磷酸二氢铵、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 氯乙酸含量测定

2.1.1 色谱条件

色谱柱：AS11-HC 阴离子交换树脂柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：10 mmol/ L 氢氧化钾溶液；流速：1.0 mL/ min；柱温：30 ℃；进样量：25 μL；电导检测器［7］。

2.1.2 溶液制备

取氯乙酸对照品适量，精密称定，用水溶解并稀释制成每1 mL 含氯乙酸40 μg 的对照品溶液。取样品约0.5 g，精密称定，置50 mL 烧杯中，加水适量使其分散，滤过，残渣用水洗涤，合并滤液与洗涤液，置25 mL容量瓶中，用水定容，摇匀，滤过，即得供试品溶液。

2.1.3 方法学考察

系统适用性试验：取2.1.2 项下2 种溶液各适量，按2.1.1 项下色谱条件进样测定，记录色谱图。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置有吸收峰。理论板数按氯乙酸峰计应不低于3 000，分离度大于1.5，基线分离良好。详见图1。

精密度、重复性试验：按要求进行，结果的RSD均小于2.0%，表明仪器精密度、方法重复性均良好。

2.1.4 含量测定

取61 批样品，按2.1.2 项下方法制备供试品溶液，按2.1.1 项下色谱条件进样测定，计算样品中氯乙酸含量。结果均有氯乙酸残留，近20%的样品氯乙酸残留超过0.2%，最高达1.68%。根据测定结果，选取8 批（批号A-H）含不同氯乙酸残留量的羧甲淀粉钠样品，与马来酸氯苯那敏进行试验。

2.2 有关物质测定

2.2.1 色谱条件

色谱柱：Fernigen C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢铵11.5 g，加水适量使溶解，加磷酸1 mL，用水稀释至1 000 mL）-乙腈（80∶20，V/V）；流速：1.0 mL/ min；检测波长：225 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL［8］。

2.2.2 供试品制备

取羧甲淀粉钠样品（批号A），定量加入氯乙酸，混合后使供试品含氯乙酸14.0%。分别取马来酸氯苯那敏对照品约8 mg、上述羧甲淀粉钠供试品约0.6 g［9］，精密称定，研磨均匀，置称量瓶中，作为试验用供试品，自编号为1#～9#；另取2.1.4项下A-H供试品各约0.6 g，作为空白对照品，自编号为10#～17#。取上述1#～17#供试品，分别按不同条件（见表1）存放。

2.2.3 溶液制备

称取表1 中对照品适量，精密称定，置100 mL 容量瓶中，用流动相溶解并定容，摇匀，滤过，即得对照品溶液。取2.2.2 项下各放置条件下的供试品，加流动相溶解，移至100 mL容量瓶中，超声（功率250 W，频率40 kHz）20 min，用流动相定容，摇匀，滤过，即得供试品溶液；取2.2.2项下各放置条件下的空白对照品，加流动相溶解，移至100 mL 容量瓶中，超声20 min，用流动相定容，摇匀，滤过，即得空白对照品溶液。

表1 存放条件Tab.1 Storage conditions

2.2.4 方法学考察

系统适用性试验：取2.2.3项下3种溶液，按2.2.1项下色谱条件进样测定，记录色谱图。结果供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置有吸收峰。理论板数按马来酸氯苯那敏峰计应不低于3 000，分离度大于1.5，基线分离良好。详见图2。

精密度、重复性试验：按要求进行，结果上述试验的RSD均小于2.0%，表明仪器精密度、方法重复性均良好。

2.2.5 有关物质含量测定

取2.2.3 项下3 种溶液，按2.2.1 项下色谱条件进样，分别测定对照品及1#～17#供试品中有关物质含量。结果见表2。可见，马来酸氯苯那敏对照品在20 ℃与40 ℃条件下存放均较稳定；相同存放条件下，马来酸氯苯那敏的降解速率随羧甲淀粉钠中氯乙酸含量的增大而提高；氯乙酸含量相同的羧甲淀粉钠供试品，其放置温度越高，马来酸氯苯那敏的降解速率越快。

表2 有关物质含量测定结果（%）Tab.2 Results of content determination of related substances（%）

3 讨论

3.1 羧甲淀粉钠中氯乙酸的残留原因

氯乙酸多在强碱条件和一定温度下与淀粉反应，生成羧甲淀粉钠与氯化钠，同时有少量氯乙酸与氢氧化钠发生副反应，生成乙醇酸钠与氯化钠。当反应不完全时可能残留起始物料氯乙酸，反应是否完全，一方面与碱液的体积分数相关，另一方面也与反应时间相关，通过工艺参数优化控制，可减少氯乙酸的残留。

3.2 氯乙酸对马来酸氯苯那敏稳定性的影响

由结果可见，马来酸氯苯那敏本身对热稳定，但与羧甲淀粉钠混合并按一定条件放置后，在相同放置条件下，随着羧甲淀粉钠中氯乙酸含量的增大，马来酸氯苯那敏的降解速率加快；当羧甲淀粉钠中氯乙酸含量相当时，放置温度越高，马来酸氯苯那敏的降解速率越快，即在氯乙酸存在的情况下，羧甲淀粉钠中氯乙酸的量及两者相容时的放置温度均与马来酸氯苯那敏的降解速率呈正相关。提示羧甲淀粉钠中氯乙酸的残留量影响马来酸氯苯那敏的稳定性。

3.3 氯乙酸影响马来酸氯苯那敏稳定性的原因

氯乙酸结构中，由于氯原子的电负性较碳原子大，导致C-Cl键中碳原子带部分正电荷，易被带负电荷或未共享电子对等试剂进攻发生亲核反应［10-11］，而马来酸氯苯那敏为常用抗组胺类药，其分子结构中胺基基团的2个N 正好可提供未共享电子对，作为亲核试剂对氯乙酸中带正电荷的碳原子进攻，发生亲核取代反应，氯原子作为离去基团。