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超声-天然抑菌防腐性高分子联用科学养护党参的初步探析

2022-02-17李芳蓉张建军赵云峰韩秀凤

畜牧兽医杂志 2022年5期
关键词:苍术党参法测定

李芳蓉,牛 娟,张建军,赵云峰,韩秀凤

(甘肃中医药大学 药学教学部,甘肃 定西 743000)

党参为桔梗科多年生草本植物党参(codonopsis pilosula)的干燥根,是重要的传统大宗道地药材。性平,味甘,无毒,具有补中益气、和胃生津、祛痰止咳等功效,可用于治疗脾肺虚弱,食少便溏,心悸气短无力,虚喘咳嗽、心悸、津伤口渴,慢性肾炎等症。党参营养丰富、药用和食用价值极高,常作为人参的替代品。党参也是中草药饲料添加剂常用候选中药之一。党参在新型兽药的复方制剂中亦有广泛应用,如党参可溶性粉具有抗应激和免疫增强功能。党参多糖对鸡血生化指标影响较大。随着中医药事业的发展,党参药材市场需求量不断增加,保证党参药材品质问题亟待解决。党参药材味甜质柔润,含有较多糖类等营养成分,在实际贮藏过程中极易受潮发生霉变、虫蛀、变色、变软发黏、泛糖、走油等现象,根头上疣状突起的痕及芽或枝根折断处尤易发生,使药材质量和用药安全有效性降低,且造成严重经济损失。目前民间党参的贮藏养护大多仍沿用传统硫磺熏蒸法,虽然有较好的防霉、防虫蛀等效果,但一定程度上会影响主要成分含量改变及其疗效,且有害人体健康。

1 超声净洗清除潜在寄生虫、虫卵及霉菌、细菌和病菌等病害微生物

超声波(Ultrasound)是高频短波辐射,具有特殊的物理性能、安全、无毒、无化学污染及残留、使用便捷。超声清洗(Ultrasonic Cleaning)主要利用超声空化效应对物体表面污物撞击、剥离。超声清洗中药材快速彻底,不留死角,且空化效应能在细胞液与细胞壁间产生微射流及局部高热高压,抑制虫卵,强烈杀灭细菌、霉菌、病菌等。超声清洗清洁度高,节水节能、省时省力,快速高效洗涤,绿色环保,药材有效成分散失少,是理想的中药材清洗方法。党参药材收获后,在贮藏保存前预先进行超声波清洗,提前消除潜在隐患,清除掉可能存在的寄生虫、虫卵、霉菌、细菌和病菌等微生物,然后足干,有利于后期的贮藏养护。

2 超声联用养护中药材党参的天然抑菌性高分子

天然抑菌性环境友好高分子在果蔬保鲜中的应用较多。研究中拟采用在食品保藏、果蔬和粮食保鲜方面应用广泛和研究较多的甘露聚糖、壳聚糖等作为与超声联用养护的天然抑菌性高分子,进行试验。

甘露聚糖(Konjacglucomanna,KGM)无色、无毒、无异味,是一种天然可再生的食品抑菌防腐剂,具有亲水性、成膜性、凝胶性、抗菌性和膳食纤维的功能特性等,能够有效抑制真菌及细菌的生长和繁殖。甘露聚糖水溶液可在果蔬表面形成一层薄膜,有效阻止空气氧化、减少水分蒸发、抑制果蔬表面病害微生物的生长繁殖,降低果实的呼吸强度,能减缓CO2和O2的透过使果蔬保鲜。经甘露聚糖涂膜后的苹果可有效防止褐变和保持水分等,能够明显保持感官效果。甘露聚糖能够抑制纤维素水解。甘露聚糖能有效地防止食品腐败变质、发霉和遭受虫害,具有较强抗菌性,能延长包装食品货架期。

壳聚糖(Chitosan,CS)是由甲壳素脱乙酰基得到的一种重要的可再生资源,化学名称是聚-β-(1,4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖,是一种理想的绿色安全的抗菌材料,来源丰富、价格低廉、无毒、无害、多功能、潜力巨大的新型环保天然防腐剂。具有可生物降解性、生物相容性、成膜性、通透性、高活性,抗菌谱广、可再生,广泛应用于食品、医学、检测、纺织、造纸、工农业、化工、化妆品等领域,抑菌活性良好,能有效防止水果在贮藏期间发生腐烂并维持其品质,故在食品保藏和水果保鲜方面的应用尤为重要。可抑制微生物的呼吸作用并影响营养物质的吸收,导致细胞缺氧、能量供应不足,造成微生物死亡。水溶性壳聚糖在酸性介质中抑菌性能更好,在贮藏期内可有效防止中药材霉变虫蛀。

将党参贮藏前预先超声清洗,清除潜在寄生虫、虫卵及霉菌、细菌和病菌等病害微生物。然后将党参药材浸没于天然抑菌性高分子溶液中,利用超声分散作用,在药材表面均匀涂布一层天然抑菌性高分子进行联用养护,使药材与外界环境隔离,阻断贮藏期细菌、霉菌和病毒等病害微生物的再次侵蚀,是绿色、安全、高效、无化学污染、科学的党参贮藏养护技术。

3 超声波联用技术养护中药材党参评价养护效果的待检药效成分及测定方法

3.1 待检药效成分

党参具有促进造血机能,增加红血球数,改善贫血,调节血糖,降压、抗氧化、抗缺氧,抗肿瘤、耐疲劳,抗衰老,增强免疫力,调节胃肠收缩及抗溃疡等作用;提升化疗放疗引起的白细胞下降;有强心,促进凝血,缩宫,抗炎、提高输出量、扩张外周血管;党参主要药效成分为党参炔苷、苍术内酯Ⅲ、党参多糖等。党参炔苷具有抗癌、抗菌、抗炎、镇静、抗氧化,缓解缺血再灌注损伤等功效,对胃黏膜损伤具有很好的保护作用。苍术内酯Ⅲ具有抗炎、抗肿瘤,抗氧化,抗衰老等药理活性。王峥涛等认为苍术内酯Ⅲ是党参的特征性成分,可作为评估党参道地药材的成分。党参多糖具有抗氧化、抗疲劳、清除自由基、抗衰老、免疫调节、提高记忆力、抗肿瘤等药理作用,来源广泛、价格低廉、资源丰富、毒副作用小是党参多糖的重要特点。

3.2 待检药效成分分析测定方法

为了评价养护效果,选择确定了超声波联用技术养护党参后药效成分的分析测定方法。

3.2.1 高效液相色谱法分析测定党参炔苷、苍术内酯Ⅲ (1)党参炔苷的分析测定,党参炔苷(Lobetyolin)是党参重要的质量评价和控制指标,其含量分析测定,应用较广的方法是高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),方法专属性好,简单可靠,多采用C18色谱柱,流动相乙腈和水,以HAc调节pH。陈慧慧等采用HPLC法测定11批不同产地党参中党参炔苷含量。方法简便易行、准确度高,满足定量测定要求。陈前锋等以HPLC法同时测定不同产地党参中党参炔苷等含量,该法色谱峰分离良好,操作简便、快速,稳定可靠。周媛等以HPLC 法同时测定党参固本丸中党参炔苷等7种成分含量,方法线性关系良好,回收率和RSD均符合要求。孟秀杰等以HPLC 法同时测定复方党参片中党参炔苷等9种成分含量,各成分线性关系良好,回收率和RSD均符合要求。贡东军等建立了同时测定党参中党参炔苷及苍术内酯Ⅲ的HPLC方法。各成分分离良好,操作简便、准确,重复性好。(2)苍术内酯III的分析测定,苍术内酯Ⅲ(biatractylolide Ⅲ)是党参的另一重要的药效成分,也是鉴定党参真伪和评定其质量的公认特征指标之一。HPLC法是苍术内酯Ⅲ的含量测定的经典方法。刘书斌采用HPLC测定苍术内酯Ⅲ等的含量,探讨党参商品等级与质量评价指标的相关性,并为行业商品等级标准的规范化提供经验与方法。关琳静则采用RP-HPLC法,测定74批次党参药材中党参炔苷和苍术内酯Ⅲ的含量,并比较差异,表明不同基源、产地和栽培、加工处理方式的党参特征图谱有明显差异。邹元锋等建立同时测定党参中党参炔苷及苍术内酯Ⅲ含量的HPLC分析法。方法操作简便、准确,重复性良好,可作为党参中党参炔苷与苍术内酯Ⅲ同时测定的有效方法。刘付松等建立同时测定党参药材中党参炔苷和苍术内酯Ⅲ等5种成分的含量方法,方法操作简单、准确、灵敏度高、重复性好。结果表明不同品种及采收期党参药材中5种有效成分含量存在较大差异。孟瑞丽等研究了不同储藏方式对党参化学成分的影响,党参水分与气温成显著正相关,浸出物、苍术内酯Ⅲ与气温无相关性。

本课题组采用HPLC法,对传统养护和超声波联用技术养护后党参中党参炔苷、苍术内酯III的保留情况进行对比检验和评价养护效果,具有合理性和科学性。

3.2.2 紫外可见光谱法测定党参多糖 党参多糖(Codonopsis pilosula polysaccharide,CPP)是党参重要的有效成分,含量高低能初步鉴别和反映党参药材质量高低,特别是道地产区药材中党参多糖的含量。党参多糖在畜禽养殖的治疗与疾病预防上具有广泛的应用价值。紫外可见光谱法(ultraviolet visible spectrometry,UV-Vis)是党参多糖含量的测定应用较多的方法,其中苯酚一浓硫酸比色法最为经典有效。时军等采用硫酸-苯酚比色法测定党参总多糖成分,结果样品中党参炔苷与总皂苷含量相关,与总多糖不成正比。张丽等采用苯酚-浓硫酸法测定了3批党参多糖口服液中多糖含量。方法适于党参多糖口服液多糖的含量测定。王桂红等采用苯酚-硫酸法测定板桥党参中党参多糖含量。该法简便快速、准确、重现性好。徐广侠采用苯酚-硫酸法测定党参提取物中多糖含量。方法简便、快速。卢新生等采用苯酚-硫酸法测定甘南党参多糖含量,正交优化多糖提取条件,得到党参多糖提取的最佳工艺条件。杜清等应用苯酚-硫酸法测定不同野生产地和商品明党参中多糖的含量。石玲玲等采用苯酚-硫酸法测定黔党参中多糖的含量,方法简便快速、准确可行。

4 小结

党参临床药用和食用价值极高,但因其营养成分丰富,含糖量高,以及传统贮藏养护技术方法欠科学等诸多问题,霉烂和虫蛀等各种变质变异现象严重,影响药材质量和用药安全,故研究其科学贮藏养护势在必行。超声波洗涤中药材快捷方便、节水节能、环保,抑制虫卵、强烈杀虫、灭菌等,能有效保护药材,药效成分散失少。天然抑菌性高分子在果蔬、粮食保鲜中应用广泛,利用无毒、无害、安全、绿色、高效的超声-天然抑菌高分子科学贮藏养护党参,既可提前消除隐患又能后续防霉、防蛀、防变异等,研究和应用前景光明广阔。选定超声波联用技术养护党参后评价养护效果的待检药效成分及其测定方法分别为HPLC法测定党参炔苷、苍术内酯Ⅲ,UV-Vis法测定党参多糖。各待检成分代表性强,测定方法经典,简捷,稳定、高效、可靠,实际应用广泛。

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