2020年湖南及周边地区猪伪狂犬病病毒血清学调查及分析

周宇骏，杜雅萍

（湖南中科基因技术有限公司，湖南 长沙 410128）

伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）属α疱疹病毒亚科（Herpesviridae），可引发伪狂犬病（Pseudorabies, PR）。PRV可感染多种家畜或野生动物，并引起十分严重的临床症状，严重时可导致死亡。尽管如此，猪（包括家猪、野猪）是PRV唯一的自然宿主，且不同生长阶段猪群（肥育猪除外）感染PR后均可出现严重的临床症状，该病对繁殖母猪和仔猪危害最大，可导致其出现繁殖障碍和严重的神经症状、呕吐和腹泻等，同时PR可导致发病仔猪出现高死亡率[1]。当前对PR治疗无特异性的药物，对于该病的防控主要依赖于疫苗免疫接种，且当前针对PR的疫苗主要是基因缺失弱毒苗或灭活苗，疫苗的广泛应用不但有效抑制了该病在我国猪场的流行，甚至还使部分猪场成功净化了PR[2]。2011年以来，我国越来越多的已免疫接种Bartha-K61疫苗的猪场仍然暴发了PR，且研究人员通过对毒株基因组序列分析发现，该毒株基因组与国内之前流行的传统毒株（如Ea株）和Bartha株所属的genotype I型毒株差异较大，因此命名为PRV变异株，且进一步试验表明变异株较传统株（如Ea）对小鼠或猪的致病力更强[3-5]。

当前针对PR的疫苗主要是gE基因缺失疫苗，针对gE蛋白开发的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测技术可有效区分伪狂犬病野毒和疫苗毒，同时针对gB蛋白开发的检测技术则可初步分析猪群产生保护性抗体情况，这为猪场开展PR防控和相应疾病的净化提供了科学依据[1，6-7]。为初步了解湖南省2020年猪群PR野毒流行及疫苗免疫情况，笔者于2020年1—12月对湖南省不同地区238个猪场送检的血清样品分别进行PRV-gE和PRV-gB抗体检测，其统计数据结果如下。

1 材料与方法

1.1 样品来源

2020年1—12月湖南及周边地区238个猪场共送检血液样品7 194份。血液样品采集并标记后，低温送至湖南中科基因技术有限公司进行抗体检测，血液样品经低速离心后（3 000 r/min，5 min）取上清液即为血清，将其保存于4 ℃，待检。所有被调查猪场的猪群均已免疫接种PRV基因缺失疫苗（灭活苗或弱毒苗）。

1.2 检测方法及判定标准

猪伪狂犬病病毒gB和gE抗体检测试剂盒均购自于美国IDEXX公司，其操作步骤及判定标准均严格按照试剂盒说明书进行，同时每次检测均设置阳性对照和阴性对照。

2 调查结果

2.1 2020年湖南及周边地区猪伪狂犬病病毒gB和gE抗体检测结果

研究通过对湖南及周边地区238个猪场送检的7 194份血清样品进行PRV gE和gB抗体检测，结果发现，虽然被调查的猪场PRV-gB场阳性率达100%，但被调查的238个猪场中有98个猪场存在PRV野毒流行，其场阳性率达41.18%（98/238）；被调查的7 194份血清中有5 937份血清为PRV-gB抗体阳性，平均阳性率为82.53%，但也有9.27%（667/7 194）血清样品检测为PRV-gE抗体阳性。此外，有近90%猪场中PRV-gB阳性率超过70%，符合国家制定的标准。

2.2 不同生长阶段猪群伪狂犬病病毒gB和gE抗体检测结果

将被调查血清样本按照不同生长阶段猪群进行分类汇总，结果如表1所示。本试验采集仔猪、保育猪、肥育猪、繁殖母猪和种公猪血清样品数分别为3 097份、2 389份、316份、1 115份和277份，其中繁殖母猪和种公猪血清PRV-gB抗体阳性率相对较高，分别为93.09%和95.31%，仔猪和保育猪抗体阳性率分别为79.04%和81.79%，肥育猪gB抗体阳性率最低（73.73%）。就PRV-gE抗体阳性率而言，繁殖母猪和仔猪抗体阳性率较高，分别为11.66%和11.30%，而肥育猪抗体阳性率较低，为5.70%。

表1 不同生长阶段猪群伪狂犬病病毒gB和gE抗体检测结果

2.3 不同季节猪群伪狂犬病病毒gB和gE抗体检测结果

如表2所示，笔者将采集的血清样品按照季节进行划分，结果发现，春季（3～5月）和秋季（9～11月）样品血清PRV-gB抗体阳性率相对较高，分别为83.75%和83.35%；而夏季（6～8月）和冬季（12月至翌年2月）相对较低，分别为79.47%和78.88%。就PRV-gE抗体阳性率而言，秋季阳性率最低（7.69%），春季、夏季和冬季阳性率差异较小。

表2 不同季节猪群伪狂犬病病毒gB和gE抗体检测结果

3 讨论

得益于PRV-gE基因缺失疫苗（弱毒疫苗或灭活疫苗）的广泛使用，研究人员研发了检测PRV-gE和PRV-gB抗体的ELISA试剂盒用于区分PRV野毒感染或疫苗免疫后产生抗体，若血清样品仅为PRV-gB抗体阳性则为PRV野毒感染阴性，若同时为gB和gE抗体阳性，则为野毒感染阳性[8]。为了解2020年湖南及周边地区（以湖南省为主）猪伪狂犬病免疫及野毒感染情况，笔者对238个猪场送检的7 194份血清样品进行PRV-gB和PRV-gE抗体检测，结果发现个体PRV-gB抗体阳性率为82.53%（5 937/7 194），且超过90%比例猪场来源样品抗体阳性率高于70%，符合国家要求的标准；但41.18%（98/238）猪场中存在PRV-gE抗体阳性猪群，个体gE抗体阳性率为9.27%。以上结果说明当前猪场对PRV疫苗免疫效果较为理想，但仍然存在PRV野毒感染情况，且PRV野毒感染场阳性率较高。值得注意的是，湖南省动物疫病控制中心团队曾于2018年对湖南省规模化猪场伪狂犬病进行血清学调查，结果发现个体PRV-gE抗体阳性率为21.0%[9]，而本研究样品主要来源于湖南省，这在一定程度上说明湖南省对PRV野毒的防控效果较为理想。这可能与样品来源和猪场提高了生物安全防控水平等有关。

进一步分析不同生长阶段猪群PRV-gB和PRV-gE抗体阳性率差异，笔者发现繁殖母猪和种公猪PRV-gB抗体阳性率较高，肥育猪最低，这可能与猪场送检PRV-gB抗体检测的目的有关，对于繁殖母猪和种公猪而言，一般是免疫接种后再检测猪群PRV-gB抗体阳性率和整齐情况，并根据检测情况及时补充免疫，而肥育猪一般是免疫接种前检测猪群PRV-gB抗体水平，以确定免疫的最佳时间段，或者是由于肥育猪的免疫接种十分麻烦，部分兽医会对猪群“打飞针”，这可能会影响免疫效果。值得注意的是，不同生长阶段猪群中种公猪和肥育猪PRV-gE抗体阳性率较低，其中种公猪最低，可能是由于养猪企业提高了疫苗的免疫次数或剂量，而肥育猪则可能是因为猪群接触PRV野毒几率较繁殖母猪低，同时又不存在母源抗体；而母猪和仔猪抗体阳性率稍高，则可能是由于繁殖母猪接触PRV野毒几率较高，因此进一步导致仔猪血清抗体也相对较高。

进一步分析不同季节猪群PRV-gB和PRV-gE抗体阳性率差异，笔者发现春季和秋季猪群PRV-gB抗体阳性率较高，但夏季和冬季抗体则相对较低，这可能是由于高热或寒冷季节容易导致猪群免疫力下降，接种疫苗后抗体水平相对较差；不同季节中秋季猪群PRV-gE抗体阳性率最低，因为秋季气候相对适宜，猪群免疫力相对较高，这在一定程度上也更加有利于PR的防控。总体而言，当前湖南及周边地区猪群仍然存在PRV野毒感染情况，且对于该病的防控不能单纯依赖于疫苗的免疫接种，提高猪群饲养管理水平和猪场生物安全防控也是十分必要的。