三种市售洗手液的抑菌效果比较

侯晓阳

（厦门市产品质量监督检验院，福建厦门 361000）

随着人们生活水平的不断提高，洗手液已经成为家庭必备的洗手产品。与传统的香皂和肥皂相比，洗手液具有很明显的优势。首先，和香皂、肥皂一类的产品相比，洗手液配备的挤压泵头可以有效地避免交叉污染，即使多人使用也可以保证内部产品的卫生，而且挤压泵头使产品相对密封，与环境和空气隔绝，可以长时间的保证产品中的有效成分的活性；再次，传统的香皂、肥皂产品基本都是单一的皂基成分，对皮肤的刺激性较强，长期使用会造成皮肤的干燥、皲裂、脱皮等现象，而洗手液中添加了各种椰油、甘油等温和成分，pH值呈弱酸性，可以有效地保护手部皮肤，防止皮肤干裂。

目前市售的洗手液主要有以下2种类型：一种是主打去污、除垢、护肤等功能的洗手液，这种洗手液一般标有“卫妆准字”的标识，其功能就和一般和洗发露、洗面奶的功能一样，只能达到去污、清洁的目的。另外一种是主打消毒、抑菌、杀菌功效的洗手液，这种洗手液一般带有“卫消证字”，属于消毒产品，比如日常生活中可能接触到的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、致病性肠杆菌等，通过洗手液中的有效成分即可达到杀灭和抑制病菌生长的目的。这两类产品虽然都是洗手液，但是批准文号却是不同单位颁发的，“卫妆准字”是卫生部化妆品检测部门针对化妆品颁发的，属于化妆品范畴，而“卫消证字”则属于消毒产品，需要省市卫生厅局核发生产许可证。2020年的新冠病毒的大爆发，让人们更加重视消毒、杀菌、抑菌功效洗手液的重要性。而且由于手部与外界环境接触的频繁性，很多便携的、免水洗的消毒、杀菌洗手液受到了很多消费者的青睐。这种洗手液不仅方便携带，而且摆脱了对水源的依赖，可以随时保障人们的健康安全。

为了验证洗手液产品的抑菌效果，本次实验选择了市面上常见的3种抑菌型洗手液，分别选择了具有代表性的2种致病菌：革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌ATCC 6538和革兰氏阴性菌大肠埃希氏菌ATCC 25922，通过QB/T 2738-2012 《日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》对其抑菌效果进行了检测，为消费者选择洗手液产品时提供一些消费建议。

1.材料与方法

1.1 材料

3种市售品牌洗手液，分别为趣净泡沫洗手液、屈臣氏牌抑菌泡沫洗手液和蓝月亮抑菌洗手液。

1.2 供试菌株

金黄色葡萄球菌ATCC 6538，大肠埃希氏菌ATCC 25922，均保种于厦门市产品质量监督检验院。

1.3 仪器与试剂

电子分析天平（梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司）、移液枪（Eppendorf ）、高压蒸汽灭菌锅（HIRAYAMA）、恒温培养箱（上海精宏实验设备有限公司）、冰箱（海尔）、正倒置一体化荧光显微镜（ECHO）、恒温干燥箱（上海爱朗仪器有限公司）、生物安全柜（The baker company）。

营养肉汤培养基（陆桥）：称取18.0g于1L蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，分装，115℃高压灭菌30min备用。

营养琼脂培养基（陆桥）：称取33.0g于1L蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，121℃高压灭菌15min，冷却至46℃左右备用。

0.03mol/L磷酸盐缓冲液 (PBS)：称取无水磷酸氢二钠2.83g、磷酸二氢钾1.36g，加蒸馏水1000mL，待完全溶解后，调pH至7.2～7.4，经121℃压力蒸汽灭菌20min后备用。

标准硬水（硬度342mg/L）：称取氯化钙（CaCl2）0.034g、氯化镁（MgCl2·6H2O）0.139g，加蒸馏水1000mL，经121℃压力蒸汽灭菌20min后备用。

1.4 实验方法[1]

（参照QB/T 2738-2012日化产品抗菌抑菌效果的评价方法7.3抑菌型日化产品的抑菌效果检验方法：悬液定量法）

1.4.1 细菌繁殖体悬液的制备

（1）从-80℃冰箱中取出冻干金黄色葡萄球菌ATCC 6538和大肠埃希氏菌ATCC 25922菌株管，在生物安全柜内打开，取少量加至5.0mL营养肉汤，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散，置37℃培养24h。

（2）取一环第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，于37℃培养24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37℃培养24h，即为第3代培养物。

（3）取菌种第3代营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（24h），用5.0mL吸管吸取3.0mL稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔，随后，用5.0mL吸管将洗液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合（振荡）20s，使细菌悬浮均匀。

1.4.2 菌液稀释

用PBS将1.4.1制备的菌悬液稀释至浓度为105CFU/mL左右的工作浓度。

1.4.3 样品稀释

取原液和用无菌标准硬水稀释至50%和10%浓度的样品，各5.0mL放入灭菌试管中，20℃恒温5min。

1.4.4 菌液与样品混合

吸取试验菌液0.1mL加入含5.0mL样品的试管中，迅速混匀，并立即计时20min。

1.4.5 倾倒平板

取0.5mL混合液加入4.5mL灭菌的PBS试管中，充分混匀。放置10min后，吸取样液1mL置于灭菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。倾注15mL左右的营养琼脂培养基，转动平皿使其混合均匀，待培养基凝固后翻转平皿并置于37℃培养48h。以PBS代替试验样品，同时按上述步骤操作，作为对照样品。

1.4.6 抑菌效果评价

记录菌落总数并求平均值，按照公式：

抑菌率（%）=(Ⅰ-Ⅱ)/Ⅰ×100 计算抑菌率。

式中：Ⅰ—对照样品平均菌落数；

Ⅱ—试验样品平均菌落数。

2.结果与分析

3种洗手液的实验结果如表1所示，其中样品1为趣净泡沫洗手液，样品2为屈臣氏牌抑菌泡沫洗手液，样品3为蓝月亮抑菌洗手液。

表1 3种洗手液的实验结果

从实验结果来看，3种洗手液的抑菌效果都很不错，而且即使在浓度为10%的情况下，3种洗手液都有明显的抑菌效果。对照有效成分说明，发现3种洗手液的有效成分不同。样品1趣净泡沫洗手液的有效成分为0.05%～0.1%的O-伞花烃-5-醇。这种物质又叫作3-甲基-4-异丙基苯酚或者1-羟基-3-甲基-4-异丙基苯，目前常作为防腐剂和抗氧化剂用于牙膏、化妆品中，也用于一些治疗皮肤病的药品中。这种成分可以帮助清洁皮肤，也可以破坏和抑制微生物的生长，尤其是当它和锌联用时，可以穿透牙菌斑深处，并迅速作用细菌的细胞膜，达到很好的杀菌作用，所以这种成分在牙膏中的应用最多。而且该成分风险系数低，无毒、无刺激，孕妇适用[2]。样品2屈臣氏牌抑菌泡沫洗手液的有效成分为0.08%～0.1%的苄索氯铵。苄索氯铵属于季铵盐类化合物，又4个乙基基团连接到一个中央氮原子上，这种成分由于具有很好的表面活性，常用于日化产品中的防腐剂和杀菌剂，也广泛用于医院环境的消毒[3]。但是苄索氯铵具有比较强烈的刺激性，只能限于一些淋洗类的产品中使用，比如牙膏等这类口腔产品就不允许使用。样品3蓝月亮抑菌洗手液的有效成分为0.32%～0.38%的水杨酸。水杨酸是一种脂溶性的有机酸，对很多细菌、真菌都有很好的杀灭和抑制作用，可以用于很多蔬菜、水果、鲜花的保鲜剂[4-8]。而且作为药物成分的水杨酸也可以祛除汗臭、止痒消炎。我国化妆品卫生规范中对洗化产品中有效成分的规定添加量是不能超过一定浓度的，比如O-伞花烃-5-醇和苄索氯铵不可以超过0.1%，水杨酸不能超过0.5%[9]。此外不同品牌的产品还有一些其他的有效成分，比如乙醇、对氯间二甲苯酚、三氯生、三氯卡班、聚六甲基胍、氯扎苯胺等。近年来，还发展研制出一些植物提取物，比如从牡丹皮、甘草、茶果、艾叶中提取的抑菌成分。这些抑菌成分大致分为生物碱类、有机酸类、挥发油类、黄酮类、多酚类、多糖类、皂苷类和单宁类等[10-15]。

由于我们的皮肤有吸收渗透的功能，建议消费者在使用洗手液洗手时，除了要保证充分的时间搓洗彻底，更要保证洗手液冲洗干净，避免其中的化学成分残留在手上。尤其要注意很多免水洗洗手液，虽然基本要求要选择可以全部挥发的有效成分，但是频繁使用有可能造成皮肤表层成分的累积，部分成分残留在皮肤上，长期也会造成对皮肤的刺激和伤害。除非外界条件实在不允许，比如流行病大爆发，户外缺水，作为应急可以使用免水洗洗手液，非必要的情况下还是使用流水配合普通洗手液清洁更彻底。

此外，液体型洗手液和泡沫型洗手液也有一些差别。在液体型洗手液的泵头上增加一些特殊的装置可以立刻得到丰富的泡沫，这种设计可以增强趣味性，调动小朋友的吸收积极性，不过泡沫对污渍的吸附能力较弱，需要足够覆盖整只手的量才可以达到清洁效果，而液体型洗手液的有效成分则需要慢慢搓洗出泡沫之后才能有效释放，需要足够的时间并配合大量的流水才可以达到清洁效果，所以不同的产品要注意不同的使用方法。