半滑舌鳎“鳎优1号”

2022-01-15

中国水产 2021年12期

农业农村部2021年第451号公告公布了经全国水产原种和良种审定委员会审定通过的虹鳟“水科1号”、禾花鲤“乳源1号”等11个水产新品种。为促进这些新品种在水产养殖生产中的推广应用，提高养殖效率，本刊将分期宣传这些品种的繁殖及养殖技术。

一、品种概况

（一）培育背景

半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）隶属于鲽形目、舌鳎科、舌鳎属，有“鳎米”“鳎目”和“牛舌头”等俗称，是一种暖温型底层鱼类，在我国从南海到渤海均有分布，但以渤海为多。在韩国和日本的近海海域，也有一定分布。半滑舌鳎肉质细腻、味道鲜美，极受消费者欢迎，市场价值很高。自2002年中国水产科学研究院黄海水产研究所科技人员与莱州明波水产有限公司合作突破半滑舌鳎人工繁殖和育苗技术以来，其养殖业发展迅速。2017年，半滑舌鳎作为我国九大海水养殖鱼类之一入选国家海水鱼产业技术体系，成为我国海水鱼类养殖业的主导品种之一。

随着半滑舌鳎养殖业的快速发展，一些问题相继出现，影响较大的是：（1）半滑舌鳎雌、雄生长差异大，雄鱼比例过高影响渔民养殖的积极性和苗种推广。半滑舌鳎雌、雄鱼生长差异巨大，尽管鱼苗时期不是很明显，但到了成鱼期，雌鱼生长速度是雄鱼的2倍～4倍（见图1）。雄鱼个体小、生长慢严重影响了渔民养殖的积极性，加之，养殖几年后长不大的雄鱼比例越来越高，通常达到70%～90%，降低了养殖产量，减少了养殖效益，限制了半滑舌鳎养殖产业的发展。所以，解决半滑舌鳎雌雄差异大、雄鱼比例过高的问题，培育高雌新品种就成为半滑舌鳎养殖业中急待解决的重大问题。针对这一问题，中国水产科学研究院黄海水产研究所陈松林团队经过多年努力，查明了养殖群体生理雄鱼比例高的原因和调控机制，研究出了高雌苗种制种技术，将生理雌鱼比例从20%左右提高到40%，解决了生理雄鱼比例过高影响产业发展的问题。（2）半滑舌鳎种质退化、抗病力下降、疾病频发，制约了养殖产业的发展。目前半滑舌鳎野生资源急剧减少，较难捕到自然海域的野生个体，主要通过人工养殖群体进行繁殖，出现近亲繁殖，种质退化，进而导致苗种抗病力下降、疾病频发、生长减慢和白化率高等问题，其中以弧菌为主的细菌性（哈维氏弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌等）疾病频繁暴发，导致苗种死亡率高达50%～90%，严重影响了半滑舌鳎养殖业的发展。研发抗病高产分子育种技术，培育出高产抗病新品种就成为半滑舌鳎养殖业亟待攻克的重大课题。但有关半滑舌鳎抗病分子育种技术及抗病高产良种选育研究，国内外均未见报道。

图1 半滑舌鳎雌鱼（上）和雄鱼（下）

为选育半滑舌鳎高产抗病优良品种，中国水产科学研究院黄海水产研究所陈松林团队自2005年起相继主持承担国家“十一五”863课题“海水鱼虾性别控制技术研究与应用”、“十二五”863课题“海水鲆鲽鱼类功能基因开发与利用”和“基于基因组信息的鱼类（半滑舌鳎）良种选育技术”、国家公益性行业（农业）科研专项“鱼类性别控制及单性苗种培育技术”、国家自然科学基金重点项目“半滑舌鳎性别决定基因筛选和功能分析及性别决定机制研究”和“半滑舌鳎抗病性状的遗传解析及抗病分子育种的基础研究”、山东省农业良种工程项目“半滑舌鳎性别控制和抗病高产良种培育”等一批国家级和省部级科研项目，相继开展了半滑舌鳎性别特异分子标记筛选与遗传性别鉴定技术建立、亲鱼人工激素催产与授精、高雌苗种制种、半滑舌鳎抗病相关基因和分子标记筛选、病害发生的病原菌分离与鉴定、半滑舌鳎鱼苗抗病性能评价技术、家系建立和抗病家系筛选、抗病相关QTL定位、抗病和快速生长优良品系培育、抗病参考群体构建、抗病性状全基因组关联分析以及全基因组选择育种技术等研究，经过15年努力，采用家系选育、抗病力评价、分子标记辅助选育、全基因组关联分析（GWAS）及全基因组选择等多项技术，最终选育出半滑舌鳎抗病高产新品种“鳎优1号”。

（二）育种过程

1.亲本来源

选育用亲本来源于渤海捕捞的野生半滑舌鳎和人工繁殖后形成的养殖群体。

2.技术路线

半滑舌鳎新品种“鳎优1号”选育技术路线见图2。

图2 半滑舌鳎“鳎优1号”选育技术路线

3.选育过程

主要以体重和抗病性为选育目标，采用家系选育和全基因组选择技术经过4个世代选育而成。具体选育过程如下。

（1）半滑舌鳎第一代家系的建立与选育

2008年～2010年在莱州明波水产有限公司建立半滑舌鳎第一代家系73个，培育长大40个。当家系鱼苗生长到10cm～12cm时，从每个家系中随机选择200尾个体，进行荧光标记后混养。标记后的鱼苗经过约1年的培养后进行体重、体长测量。计算各家系鱼的体重和全长的平均数以及平均日增重（养殖期间增加的平均重量/实际养殖时间）。估算各家系生长性状的育种值（EBV），并利用育种值评价不同家系的生长性能。从第一代家系中筛选出快速生长家系12个。

当家系鱼苗生长到10cm～12cm时，每个家系随机捞取100尾～200尾鱼苗进行病原菌感染实验和对比养殖获得存活率数据。利用BLUP法估算各家系抗病性状EBV。筛选到抗病（高存活率）家系11个。

（2）半滑舌鳎第二代家系的建立与选育

2012年～2013年在山东省海阳市黄海水产有限公司利用第一代家系中选出的快速生长家系和抗病家系以及部分昌邑群体选育出的快速生长雌鱼群体作为亲本建立了第二代家系和群体，共建成半滑舌鳎第二代家系80个。

按照第一代家系中快速生长家系的选育方法进行第二代快速生长家系的筛选，筛选到快速生长家系12个。按照第一代家系中抗病家系的选育方法进行第二代抗病家系的筛选，筛选到抗病家系10个。将这些抗病力强的家系进行重点培育至性成熟，同时引入一些第二代群体选育的亲鱼用于下一代家系的建立。

（3）半滑舌鳎第三代家系的建立与选育

①第三代家系的建立及快速生长和抗病家系的筛选

2014年～2015年在莱州明波水产有限公司和海阳市黄海水产有限公司，利用第二代家系作为亲鱼建立第三代家系184个，其中2014年在莱州市和海阳市分别建立80个和54个家系，2015年在海阳市黄海水产有限公司建立50个家系。

按照上述快速生长家系选育方法进行第三代快速生长家系的选育，筛选到快速生长家系26个。按照上述抗病家系选育方法，共筛选到抗病家系23个。

②半滑舌鳎第三代家系基因组育种值（GEBV）计算

对2014年选育的54个第三代家系进行了全基因组重测序和基因组育种值（GEBV）计算。结果表明，在基因组育种值GEBV排名前12的家系中，有7个家系的感染后存活率位于前11名，属于抗病家系。表明基因组育种值与家系感染后的存活率有较好的相关性，可以指导抗病家系的选择。因此，结合家系感染后的存活率和基因组育种值，选择感染存活率和基因组育种值都比较高的12个家系进行重点培养。

（4）半滑舌鳎第四代家系的建立与选育

①半滑舌鳎第四代家系的建立与速生抗病家系筛选（共计113个家系）

2016年～2017年在莱州明波水产有限公司和海阳市黄海水产有限公司利用第三代家系作为亲本建立第四代家系113个。

根据第一代速生家系的选育方法，筛选出13个快速生长家系。根据第一代抗病家系的选育方法，筛选到13个抗病家系。

②第四代家系基因组育种值（GEBV）计算

根据第四代家系人工感染哈维氏弧菌实验结果，共选取19个家系的182尾感染个体进行基因组重测序。其中，共有11个家系的感染后存活率高于对照家系，感染后存活率高于60%的家系有5个，这些家系的平均感染后存活率和GEBV分别为71.48%和0.237；而对照组家系的感染存活率和GEBV分别为30.1%和0.029。由此可见，感染存活率高的家系的基因组育种值GEBV（0.217）明显高于对照组的GEBV（0.029）。据此，选育出感染存活率和基因组育种值都较高的第四代家系用作“鳎优1号”的亲本家系。

（5）半滑舌鳎“鳎优1号”的产生

经过4个世代的选育，半滑舌鳎抗哈维氏弧菌感染能力和生长速度比对照组有了明显提高，例如第四代抗病家系16L25、16L26、16L27、16L28和16L31等在哈维氏弧菌感染后的成活率平均为71.48%，比所有家系平均感染存活率（30.25%）提高了41.23%，比对照组家系的感染成活率（30.1%）提高了41.38%。同时，通过基因组选择计算出这些抗病家系的基因组育种值GEBV平均为0.237，明显高于对照组的0.029。因此，将这些抗哈维氏弧菌感染能力强的家系与快速生长家系16L17、16L02、16L34或16L37等交配，其后代具有生长快、抗哈维氏弧菌感染能力强、养殖成活率高等优势，因而将其命名为半滑舌鳎“鳎优1号”新品种（见图3）。

图3 半滑舌鳎“鳎优1号”

（三）品种特性和中试情况

1.品种特征

形态特征：体长舌状，很侧扁，全长与体高之比平均为2.95；前端钝圆，后部渐尖。头稍短，头长小于头高，头长与头高之比为0.83。两眼位于头左侧中部稍前方，上眼后前方约位下眼中央上方。无鳃耙。鳃孔侧下位。生殖突位第一臀鳍条基右侧，游离。头体左侧被小型强栉鳞，鳍无鳞而仅尾鳍基附近有鳞。右侧栉鳞刺很弱少，仅后部有一小群约5个～8个，且刺均位鳞后缘内侧，体中央一纵行为圆鳞，头前部鳞短绒毛状。左侧线3条；右无侧线。

细胞遗传学特性：体细胞染色体数目2n=42，染色体臂数为42，雌鱼有一条巨大的W性染色体。成体肌肉组织中6-磷酸葡萄糖脱氢酶的电泳图谱为单态。

2.优良性状

（1）生长速度快。2018年和2019年在唐山市维卓水产养殖有限公司和海阳市黄海水产有限公司共进行了7次小试试验，2018年和2019年在9个水产养殖公司共进行了11次中试试验，综合小试和中试试验的生长数据（平均体重）来看，半滑舌鳎“鳎优1号”的生长比对照组快12.5%～30.3%，平均快17.65%。

（2）抗病力强和养殖成活率高。于2018年10月和2019年7月分别对“鳎优1号”家系鱼苗的抗哈维氏弧菌感染能力进行了实验评价。2018年的人工感染实验表明，“鳎优1号”家系鱼苗在感染后的平均存活率为88.53%，同批次对照组的感染存活率为50.36%，“鳎优1号”比对照组提高38.17%；2019年的人工感染实验表明“鳎优1号”家系鱼苗在感染后的平均存活率85.71%，对照组的感染存活率为57.05%，“鳎优1号”比对照组提高28.66个百分点。第三方机构进行的现场测试表明，人工感染哈维氏弧菌后“鳎优1号”鱼苗的存活率为85.38%，比对照组成活率（59.29%）高26.1个百分点。综合上述结果，“鳎优1号”鱼苗在哈维氏弧菌感染后的存活率比对照组平均提高30.98个百分点，可见“鳎优1号”鱼苗的抗哈维氏弧菌感染能力明显增强。

2018年和2019年在唐山市维卓水产养殖有限公司和海阳市黄海水产有限公司共进行了7次小试养殖试验，2018年和2019年在9个公司共进行了11次中试养殖试验，综合所有小试和中试的养殖成活率来看，半滑舌鳎“鳎优1号”的养殖成活率比对照组高10.77个百分点～22.77个百分点，平均提高15.73个百分点。

（3）雌鱼比例高。根据研究和测试结果，结合其他有关统计数据可知，“鳎优1号”生理雌鱼比例为40%左右，比普通苗种提高15%～20%。

3.中试情况

2018年～2020年，选取我国半滑舌鳎主要养殖区的河北、天津和山东的部分地市进行中试试验。中试单位包括唐山市维卓水产养殖有限公司、山东海阳市黄海水产有限公司及其他第三方公司等进行“鳎优1号”苗种中试对比养殖试验。中试结果见表1。由第三方中试结果可知，“鳎优1号”的生长速度比对照组平均提高16.3%，养殖成活率比对照组平均提高15.7个百分点。

表1 “鳎优1号”新品种中试养殖结果汇总表

二、人工繁殖技术

（一）亲本选择与培育

1.亲本来源

半滑舌鳎“鳎优1号”亲本主要保存在海阳市黄海水产有限公司和唐山市维卓水产养殖有限公司。雌性亲本应当选择2龄以上个体（体重1kg以上）；雄性亲本应当选择1龄以上个体（150g以上），并利用性别特异分子标记进行遗传性别鉴定，将伪雄鱼淘汰掉，只留ZZ雄鱼用于繁殖生产；所有亲本应当体质健壮、活力好。

2.亲本的促熟培育

所有亲本应当提前3个月以上进行控温和营养强化培育。雌雄比例为1:3，培育期间，水温控制在22℃～24℃，盐度28～30，溶氧6mg/L以上。每天投喂2次～3次鲜活饵料（沙蚕、贝肉等），日投喂量为鱼体重的2%～4%。

（二）人工繁殖

1.人工催产与授精

人工催产方法参照杨景峰等（2010）方法，雌鱼每千克体重注射黄体生成素释放激素类似物A30.5μg～1.0μg，地欧酮5mg～10mg，雄鱼剂量减半。催产36h～40h后，用抚摸的方法检查卵巢情况，若能够感觉到卵子流动，说明已经排卵，应当立即人工挤卵，同时挤精，每500mL卵子与0.2mL～0.5mL精子混合后，干法授精。

2.受精卵孵化

将受精卵放入8 0目的孵化网箱中进行孵化，每立方米水体放卵量为500mL～1000mL，孵化网箱中微充气，孵化水温22℃～24℃，出膜时间40h左右。出膜前6h左右收集上浮卵，称量后放入育苗池中进行培育。

（三）苗种培育

1.仔稚鱼培育（孵化后30d以前）

（1）放卵密度。每立方米水体放卵量10g左右。

（2）水质条件。水温控制在23℃～24℃，盐度28～30，光照强度控制在1000Lx以上，溶氧6mg/L以上。海水水质达到国家一类渔业水质标准，经过二级或三级砂滤，并经过紫外消毒处理。

（3）投喂管理。孵化后第3d开始投喂轮虫，同时添加小球藻浓缩液。每天投喂2次～3次，根据鱼苗摄食情况适当增投或减投，轮虫需要用裂壶藻和鱼油等进行强化。轮虫参考投喂量为100个/mL～200个/mL，小球藻的细胞浓度控制在50万个/mL～100万个/mL。鱼苗孵化后第10d时开始投喂卤虫无节幼体，每天投喂2次～3次，卤虫无节幼体需要用裂壶藻和鱼油等进行强化。卤虫无节幼体投喂量为2个/mL～3个/mL。鱼苗变态完成后，不再添加小球藻。

（4）池底吸污、排污。鱼苗变态前1d～2d，采用虹吸的方法将池底的污物吸出，并用加大换水量的方法将水体中的悬浮物排出。

（5）换水量管理。鱼苗变态前采用微流水进行溢流式换水，每天换水量为全部水体的1/3到1/2，鱼苗变态后，每天换水量增加到全部水体的3倍～4倍。

2.幼鱼培育（出膜30d后）

鱼苗此时生长到1cm以上，需要将鱼苗进行倒池和分池，适当降低养殖密度。水质等条件同前。

（1）投喂管理。每天投喂卤虫成体2次～3次，根据鱼苗摄食情况适当增投或减投，饱食为宜。鱼苗生长至2cm～3cm时，开始投喂适口配合饲料，每天投喂2次～3次，投喂完配合饲料1h后，观察鱼苗摄食情况，并适当补充投喂少量卤虫成体。待鱼苗完全摄食配合饲料后，停止投喂卤虫成体，只投喂配合饲料。

（2）放养密度。随着鱼苗的生长，需要定期调整鱼苗密度，全长1cm左右时，每平方米池底面积1500尾～2000尾；全长2cm～3cm时，每平方米池底面积800尾～1000尾；全长达到5cm～8cm时，每平方米池底面积300尾～500尾。

（3）池底排污。每次投喂完1h～2h后，将育苗池的排水管打开，通过快速排水将水中残饵和粪便等排出。

（4）换水量管理。采用溢流式换水，每天换水量为全部水体的5倍～6倍。

三、健康养殖技术

（一）健康养殖模式和配套技术

1.养殖模式

半滑舌鳎“鳎优1号”适宜进行工厂化流水养殖和循环水养殖等，养殖管理等方法与普通半滑舌鳎基本一致。如果养殖用水来自室外沉淀池塘，要注意保持沉淀池水质清洁、稳定，定期对养殖水源进行消毒，池底氧气充足是养殖成功的前提。

2.鱼苗筛选

由于半滑舌鳎雌雄生长差异大，在养成过程中需要进行分苗，即将生长较慢的雄鱼挑选出来淘汰掉，只保留生长速度快的雌鱼进行养成。鱼苗生长至3月龄～4月龄时，进行第一次淘汰，淘汰比例为5%～10%；鱼苗生长至5月龄～6月龄时，进行第二次淘汰，淘汰比例为10%～20%；鱼苗生长至7月龄～8月龄时进行第三次淘汰，淘汰比例为20%左右。尽量保持同一池中的鱼体大小基本一致，以保证饲料粒径的一致性和适口性，以免造成小规格鱼吃不了相对大粒径饲料而体质下降引起病害发生和蔓延。

3.日常管理

水质条件：水温范围15℃～26℃，最适水温22℃～24℃；盐度28～30为宜；溶氧6mg/L以上；pH7～8。除此之外，定期对水质进行检测，保证各项指标符合养殖用水标准。

放养密度：全长5cm～10cm，放养密度为200尾/m2～500尾/m2，全长10cm～15cm，放养密度200尾/m2～300尾/m2，全长15cm～20cm放养密度80尾/m2～100尾/m2。体重50g～300g，放养密度5kg/m2～10kg/m2，300g以上至成鱼阶段，放养密度10kg/m2～15kg/m2。注意密度不宜过大，不要出现鱼在池底重叠的现象。

饵料投喂：根据生长情况调整适口饵料的粒径，50g以下幼鱼期日投喂量为鱼体重的1%～1.5%，50g以上时，日投喂量为鱼体重的0.7%～1%。每天投喂2次～3次，饱食为宜。

清洁管理：及时清除池中残饵粪便等污物，保持养殖池环境优良。注重清扫养殖池时的水体消毒工作，每次清扫前以高锰酸钾1.5mg/L～2mg/L泼洒池壁及养殖水体10min～15min，然后将池壁刷洗干净，顺水流清扫池底，使鱼种不因脏污泛起糊鳃造成细菌感染。

（二）主要病害防治方法

“鳎优1号”新品种抗病性强，在试验养殖和推广过程中尚未见严重病害发生。常见病害防治方法参考半滑舌鳎。半滑舌鳎养殖过程中常见和危害严重的病害是细菌性疾病，寄生虫病和病毒病也有少量报道，但是没有广泛传播。

1.细菌性疾病

（1）烂鳍烂尾病

主要症状：烂鳍烂尾病是半滑舌鳎养成期的最常见疾病，也是高发疾病之一。发病初期鳍条散开，充血发红；发病后期整个鳍边和尾部溃烂，甚至烂至肌肉组织，溃烂伤口红肿出血，个别的会慢慢愈合，影响鱼苗品质，溃烂严重时可引起死亡。

防治方法：在分池、捕捞和运输时，用10g/m3维生素C泼洒全池以降低应激性，操作过程中应小心、轻柔，防止鱼体出现损伤；按时吸污和清洁池底，适当加大换水量，保证养殖环境优良；发病时，先用过氧化氢溶液（水产用）50mg/L～100mg/L消毒清洗伤口，16h～24h后用抗生素（按照说明书用量泼洒）连续药浴3d可缓解病情，再科学投喂饵料保持正常摄食即可。

（2）溃疡病

主要症状：发病初期，体表鳞片部分脱落，严重时出现溃烂、尾部出血，造成败血症，经常并发肠炎，解剖发现腹腔内有大量腹水，肝脏发白。

防治办法：养殖过程中合理控制苗种密度，保持水质新鲜，科学投喂饵料和定期消毒。发病时，立即隔离病鱼，用聚维酮碘溶液（水产用）浸泡1h消毒，24h后用抗生素（按照说明书用量）药浴3d～5d消炎。

（3）肠炎和腹水症

主要症状：半滑舌鳎肠炎和腹水症的主要症状和其他鱼类相似，表现出活力下降、摄食减少、腹部隆起、内脏器官不同程度的充血、发炎、肿大等症状，尤其是肠壁变薄、充满积水，对腹腔造成压力，引起部分肠道脱垂。发生肠炎的病鱼消化能力受损，有白便。

防治办法：针对此病，在养殖生产中应该以提前预防为主，分拣活力较弱或摄食不佳的病鱼，及时进行消毒。发病时，在执业兽医师的指导下用药治疗。同时辅以降低水温、减少投饵量、降低养殖密度、加大换水量等措施，在夏季多雨季节注意盐度变化。

（4）烂鳃病

主要症状：患病舌鳎体色发黑，鳃丝肿胀、黏液增多、呈黏稠状腐烂，呼吸困难，在底面贴合不稳，游动上浮于水面。

防治办法：彻底清池消毒，保持水质良好。注重清扫养殖池时的水体消毒工作，及时清除池底残饵粪便等污物，保持养殖池环境优良，防止污物上浮。

（5）内脏结节病

主要症状：病鱼体质变弱，体色变浅，食欲减弱，游动无力，脾脏、肾脏和肝脏均有不同程度的肿大，有许多白色结节，严重时肾脏遍布结节，呈贫血状。

防治办法：保证饲料的品质，提高鱼体抗病力；及时清除病鱼，控制放养密度。