川金丝猴肠道淋巴瘤病理学诊断
2022-01-07王运盛戴春阔杨胜记国欣欣李祥翔普天春范晰琳张成林
王运盛,戴春阔,杨胜记,国欣欣,陈 靖,李祥翔,普天春,范晰琳,卢 岩,张成林,
(1.北京动物园,北京 100044;2.圈养野生动物技术北京市重点实验室,北京 100044;3.梵净山国家级自然保护区管理局,贵州江口 5544002)
疾病防治是野生动物饲养管理工作中重要的组成部分,在众多的致病因素中,肿瘤较为少见但不容忽视[1]。近年来,随着国内圈养野生动物数量的增加及野生动物诊疗工作的深入,野生动物肿瘤发病率呈现逐年上升的迹象。而野生动物肿瘤疾病发生后如何快速确诊成为了现阶段需要关注的问题。金丝猴(Golden monkey),又名仰鼻猴(Snub.nosed monkey)、蓝面猴、金线狨等,被列为国家I级重点保护动物,也被誉为我国的第二国宝[2-5]。北京动物园兽医院于2019年收到1例梵净山保护区川金丝猴死亡样本,通过组织病理学方法对其进行了病理学诊断,现报道如下,以期为今后野生动物肿瘤病理学诊疗提供思路和方案。
1 材料与方法
1.1 病例
川金丝猴,雌性,2005年出生于梵净山保护站,临床表现为腹部肿大,触诊疑似有腹水,听诊心律不齐,口色苍白,精神状态差,没有食欲,死前2 d未见排便。
1.2 试验方法
1.2.1 血样化验室诊断 金丝猴发病后进行血样采集,采血前1 d进行隔离观察,禁食16 h,采血后进行外周血生化常规检测。
1.2.2 病理样本采集 金丝猴死后立即解剖,取材后将内脏组织立即投入10%的福尔马林液,进行病理组织切片前处理。
1.2.3 HE染色 石蜡切片分别经二甲苯I、II脱蜡5 min,之后在无水乙醇/二甲苯(1∶1)混合液中浸泡5 min,依次经无水乙醇I、无水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度复水,下行至去离子水中,苏木精染色10 min,1%盐酸酒精分色数秒,水洗返蓝15 min,再依次通过50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脱水后,伊红染色1 min,95%乙醇洗涤3次,再经无水乙醇I、II各5 min,二甲苯I、II各透明5 min,最后用中性树胶封片。切片放置于37℃温箱内过夜烘干后镜检。光学显微镜下观察金丝猴组织病理学变化情况。
2 结果与分析
2.1 金丝猴血液生化指标检测结果与分析
经化验室诊断发现金丝猴碱性磷酸酶(598 U/L)、总蛋白(8 100.00 g/L)、白蛋白(52.00 g/L)、球蛋白(43.20 g/L)指标均显著高于参考范围,其余指标基本在参考范围上下浮动。结合动物临床症状,该金丝猴疑似出现淋巴瘤与慢性肝炎。
2.2 金丝猴临床剖检病理观察
金丝猴尸重11 kg,皮下较湿润,血凝正常。心脏横径较正常,心室塌陷,质地较软,心室内血凝块聚集。肾脏萎缩,色泽灰白,两侧肾大小不一。十二指肠、空肠段肠肉眼无明显病理变化。结肠至盲肠段有大量斑块、结节状肿物(图1A)。其余脏器肉眼无明显病理变化。盲肠至结肠肿物经固定后可见剖面呈深棕色,大小见图1B。
图1 川金丝猴肠道肿物
表1 川金丝猴生化指标检测
2.3 金丝猴肠道肿物病理变化
低倍镜下可观察到肠道肿物内原有组织结构被大量破坏,无正常结构,大量淋巴样细胞聚集使之呈现弥散样蓝染(图2A),高倍镜下可见大量淋巴样细胞层层叠叠,细胞核呈圆形或椭圆形,蓝色深染,细胞质少。肿物内除淋巴样细胞外还充斥大量红细胞(图2B),油镜下可见新生小淋巴样细胞3~5个聚集到一起(图2C、图2D)。
图2 川金丝猴肠道肿物病理学观察
3 诊断
经临床特征观察、化验室分析以及组织病理学诊断,金丝猴肠道肿物为淋巴瘤(Intestinal lymphoma)。
4 小结与讨论
肠道淋巴瘤是一种影响肠道淋巴结的肿瘤,很少与癌、平滑肌瘤共存。其也可以由胃、肝脏、脾脏、淋巴结或淋巴管等器官的肿瘤细胞经淋巴系统蔓延到肠道而引发[7]。患病动物在临床上常表现出食欲减退、呕吐、腹泻、贫血、精神萎顿、嗜睡、体重减轻等症状。此外,还会出现淋巴结肿大、腹部肿大、粪便带血等症状。
该金丝猴病例由于肠道淋巴瘤的持续作用,最终导致死亡。该病例生前的临床表现(腹部肿胀、食欲降低)、化验室诊断结果(碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白指标的显著升高)表明其可能患有肿瘤疾病,经病理学诊断最终诊断为肠道淋巴瘤,除结肠外,其余组织器官未见淋巴瘤,表明该病例的淋巴瘤只发生于结肠,未出现转移。
肿瘤是人类的常发病,但动物领域此项工作起步较晚。而在圈养野生动物中,由于缺乏相应的病理诊断平台,严重制约了肿瘤诊断技术的完善。关于野生动物肿瘤疾病的研究报道极为少见。本研究采用病理学技术,结合临床病理变化及系统病理学观察,对川金丝猴肠道肿物进行病理学诊断,分析得出此肿物为淋巴瘤,本报道为今后野生动物肿瘤的诊断以及治疗工作提供了较为可靠的经验和方案。