妊娠期糖尿病患者血清Klotho 蛋白水平变化及临床意义

吴昌志，汤旭，罗永慧

（江西省妇幼保健院检验科，江西 南昌 330006）

妊娠期糖尿病是一种妊娠期特发的疾病，特点是妊娠后才发生或妊娠后首次发现的糖尿病[1,2]。近年来，不管是全球数据统计，还是我国的流行病学调查，妊娠期糖尿病的发病率逐渐上升[3]。 由于妊娠期糖尿病可引起严重的母婴并发症，导致巨大儿出现、新生儿黄疸、新生儿低血糖发生，增加孕妇剖宫产的发生率，还可增加母儿继发T2DM的风险，因此对妊娠期糖尿病研究一直是临床科研工作者关注的热点[4,5]。目前有关妊娠期糖尿病的病因学研究尚无明确的定论，考虑可能与多方面因素有关，其中包括有遗传因素、环境因素和免疫性因素[6]。 Klotho 蛋白是一种新近发现的抗衰老蛋白，参与机体多种生理病理过程，与衰老、骨质疏松、动脉硬化、硬皮病、肺气肿等疾病密切相关[7,8]。最近的研究发现Klotho 蛋白可参与机体能量代谢过程，妊娠期糖尿病是一组以血糖升高、血糖利用障碍为特征的代谢性疾病，Klotho 蛋白是否在妊娠期糖尿病发挥作用尚无相关研究。 本研究以妊娠期糖尿病为研究对象，观察klotho 蛋白在妊娠期糖尿病患者中的表达情况及临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料 妊娠期糖尿病诊断标准：采用美国糖尿病协会推荐的OGTT 试验，孕妇在24～28 周75g 葡萄糖口服后，分别采集空腹、口服葡萄糖1h、2h 三次标本进行血糖检测，三次血糖值分别达到或 超 过5.1mmol/L、10.0mmol/L、8.5mmol/L 则 判 定为妊娠期糖尿病。 本研究共纳入研究对象共247例，均于2018年10月至2019年11月在江西省妇幼保健院定期门诊孕期检查的妇女，年龄20～45（26±5.2）岁，孕妇于24～28 周行OGTT 试验，测量孕妇空腹Glu、果糖胺、糖化血红蛋白等指标，并详细询问孕妇情况，包含孕妇年龄、孕次、有无吸烟史、有无糖尿病家族史、有无其他疾病史。 所有入组的孕妇均为低危人群、单胎妊娠、无高血压、心血管疾病、肝肾疾病史，近期无外伤手术史，此次怀孕排除急慢性感染史、 无呼吸系统和泌尿生殖系统炎症疾病史，无其他产科并发症和合并症。 正常妊娠对照组与健康对照组为同时期我院门诊就诊人群（其中正常妊娠对照入组261 例,年龄21～46(26±5.3)岁,健康对照入组247 例,年龄20～45(26.4±4.7)岁.经统计学处理,个组患者的年龄 性别等一般资料比较,差异无统计学差异意义(P＞0.05)。

1.2 血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白含量检测 采用的人α-Klotho 和β-klotho 蛋白酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒分别购自钦城生物有限公司和百奥莱博有限公司，操作步骤按照商品试剂盒说明书进行。

1.3 统计学处理 采用SPPS17.0 软件进行统计分析。计量资料以 表示,非正态分布变量以四分位间距表示而后进行分析。 多组间比较采用单因素方差分析,血浆Klotho 蛋白水平与指标参数的关系采用Pearson 相关分析, 其各组分的相对危险度采用多元逐步回归分析。 P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 妊娠期糖尿病组、 正常妊娠组和正常对照组α-Klotho 和β-klotho 蛋白水平 血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白表达水平在妊娠期糖尿病组明显低于正常妊娠组及健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），α-Klotho 和β-klotho 蛋白在各组表达水平是健康对照组＞正常妊娠组＞妊娠期糖尿病组，而α-Klotho 和β-klotho 蛋白在正常妊娠组及健康对照组差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 妊娠期糖尿病组、正常妊娠组和正常对照组α- Klotho 和β- klotho 蛋白水平

2.2 妊娠期糖尿病组α-Klotho 和β-klotho 蛋白与空腹Glu、果糖胺、糖化血红蛋白相关性分析 在妊娠期糖尿病人群中血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白水平与空腹Glu、 果糖胺及糖化血红蛋白呈负相关，且相关程度空腹Glu＜果糖胺＜及糖化血红蛋白。

表2 妊娠期糖尿病组α- Klotho 和β- klotho蛋白与空腹Glu、果糖胺及糖化血红蛋白相关

3 讨论

妊娠期糖尿病这一概念最早由Miller 教授于1946年首次提出，1970年WHO 将其作为一个独立病种单独列出，足见世界各国对该病种的重视程度。 对妊娠期糖尿病进一步研究有助于提高对糖尿病的认识和重视，采取相应的干预措施，减少其对妇女和儿童的损害和减轻远期并发症，减少出生缺陷发生率，提高人口素质[9,10]。

研究证实，妊娠期糖尿病对妊娠妇女的糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢都有着系列的影响，主要表现在葡萄糖摄取和利用减少，蛋白质分解减少而脂肪分解和氧化增加[11]。 在妊娠期肌肉和肝脏的糖利用障碍对维持母体一定的血糖水平以满足胎儿和母体中枢神经系统对血糖水平的依赖起一定的作用，对蛋白质分解减少满足胎儿生长的需求，而对脂肪分解和氧化的增加则为机体提供足够的能量来源，然而这一系列的生理改变也成为妊娠期糖尿病发病的高危因素。 klotho 蛋白是一种新近发现抗衰老蛋白，参与机体多种生理病理过程，与衰老、骨质疏松、动脉硬化、硬皮病、不孕不育、肺气肿等疾病密切相关[7,8]。 最近的研究表明klotho 蛋白参与机体能量代谢过程，尤其是在白色脂肪组织和骨骼肌中对机体保护起着重要作用[12]。 此外有研究显示klotho 蛋白具有抗炎、抗氧化、抗凋亡作用，其表达水平下降与多种病理模型的病理发展相关，而给予外源性klotho 蛋白干预则具有明显的改善作用，提示可溶性klotho 蛋白有可能成为一个重要的临床治疗靶点[13]。 因此研究klotho 蛋白与妊娠期糖尿病关系意义重大。 我们的研究以妊娠期糖尿病人群为研究对象，结果提示血清α-Klotho和β-klotho 蛋白表达水平在妊娠期糖尿病组明显低于正常妊娠组及健康对照组，差异具有统计学意义，α-Klotho 和β-klotho 蛋白在各组表达水平是健康对照组＞正常妊娠组＞妊娠期糖尿病组，而α-Klotho 和β-klotho 蛋白在正常妊娠组及健康对照组并无统计学差异，表明α-Klotho 和β-klotho蛋白可能在妊娠期糖尿病发挥着作用。

妊娠期糖尿病一般无特殊临床症状，大多只有在进行糖尿病筛查时才发现血糖异常升高。 而妊娠期糖尿病的管理旨在严格控制血糖，以减少这种不利的新生儿和妊娠并发症的风险[14-17]。 本研究表明α-Klotho 和β-klotho 蛋白在妊娠期糖尿病表达下降，通过对其与体内的血糖控制指标相关性研究，提示α-Klotho 和β-klotho 蛋白与空腹Glu、果糖胺、糖化血红蛋白呈负相关，且相关程度空腹Glu＜果糖胺＜及糖化血红蛋白。 所以我们推测α-Klotho 和β-klotho 蛋白可能影响着妊娠期糖尿病的糖代谢过程，与糖利用障碍或胰岛素抵抗机制密切相关，从而使得α-Klotho 和β-klotho 蛋白成为妊娠期糖尿病的生物学标志物及治疗靶点的潜在可能。

本研究结果显示α-Klotho 和β-klotho 蛋白在妊娠期糖尿病人群中低水平表达，并与血糖控制指标呈负相关，提示α-Klotho 和β-klotho 蛋白参与该病的进程。 然而由于妊娠期糖尿病是一个多因素复杂的病理过程，对这些因素的识别与分子机制的确定，尚需更多更详细的研究。