小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗对羊只的免疫效果评价

张海霞，张 蓉

（甘肃省瓜州县畜牧兽医技术服务中心，甘肃 瓜州 736100）

小反刍兽疫病毒属副黏病毒科麻疹病毒属，主要感染山羊、绵羊等小反刍动物，俗称“羊瘟”，非人畜共患传染病，病畜的排泄物与分泌物是主要传染源。该病潜伏期一般为4～5 d，最长可达21 d。山羊感染该病后临床症状犹为严重，绵羊偶有严重病例发生。被感染的动物体温急剧上升，口腔黏膜内充血，烦躁不安、食欲减退，背毛粗糙无光泽，鼻液呈脓性，呼出恶臭气体，从而使养殖企业及养殖户遭受巨大的经济损失[1]。

羊痘病毒是一种脱氧核糖核酸病毒，对乙醚敏感，具有极强的感染力与传播力，俗称“羊天花”，是一种人畜共患的急性、热性、高接触性传染病[2]。羊群一旦感染该病，放牧人员应高度重视，立即采取防控措施。该病潜伏期为4～20 d，初期病羊体温升高至40～42℃，呼吸加快，精神极度沉郁，食欲减退，伴以可视黏膜卡他、脓性炎症，经1～2 d后皮肤少毛或无毛处开始发痘，如绿豆或豌豆大的淡红色圆形充血斑点，而后凸出于皮肤表面形成坚实的结节，再经5～7 d变为灰白色扁平、中央凹陷的水泡。此时病羊体温下降，水泡很快化脓，而后渐渐干涸，形成黄黑褐色痂皮，约7 d痂皮脱落，留有苍白瘢痕。该病病期长达3～4周，多以痊愈告终。在发病过程中，最忌并发其他疾病，如在脓泡期有坏死杆菌继发感染，病变部就会泡痘融合，形成坏疽性溃疡，发出恶臭气味，此为恶性病变，容易造成病羊死亡。羔羊、体弱羊易并发眼结膜炎、鼻炎、咽炎，并可继发肺炎、胃肠炎和脓血症等。绵羊中细毛羊比粗毛羊或土种羊更易感染。羊痘对成年羊危害较轻，死亡率为1%～2%，对羊羔危害严重，死亡率达20%～50%，从而使养殖企业及养殖户遭受巨大的经济损失。

对以上2种疫病进行免疫接种是预防和控制疫病发生的最主要手段，但仍存在很多免疫难题，如疫苗种类过多、接种强度大、抗体持续时间短、免疫程序繁琐、经费及人力紧张等。与单独疫苗相比，联合疫苗防疫效果更好。因为联合疫苗可以同时预防多种疾病，可减少动物的接种次数，有效避免漏种情况的发生，提高疫苗接种率，同时可减少接种后的不良反应。因此，为了探讨小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗的免疫效果，同时加强对小反刍兽疫和羊痘的防控，及时掌握这两种病的流行病学动态，在瓜州县锁阳城镇某养殖场开展了小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗对羊只的免疫效果试验，以期为养殖企业及养殖户选择最佳疫苗和制定科学的免疫程序提供依据。

1 试验材料

1.1 试验动物

在瓜州县锁阳城镇某养殖场选择未接种小反刍兽疫和羊痘疫苗的4月龄健康羊60只。按照正常的饲喂方法，由专人负责饲养管理。

1.2 试验疫苗

小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗（Clone9株+AV41株），由华派生物工程集团有限公司生产（批号兽药生字221014035），甘肃省酒泉市动物疫病预防控制中心提供。

1.3 其他

450 nm、630 nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器，加样槽，酶标仪，离心机等。

1.4 主要试剂

酶标板、20X浓缩洗涤液、阴阳性对照血清、抗体工作液、酶标记物、TMB底物液、终止液（试剂全部由深圳芬德生物技术有限公司生产，批号020016）。

GPV抗原包被板、GPV阴性血清、GPV阳性血清、酶标抗原（Ⅶ）、20X浓缩洗涤液、底物液、终止液（试剂全部由青岛立见诊断技术发展公司生产批号20312102）。

2 试验方法

2.1 试验分组及免疫

选择4月龄无小反刍兽疫、羊痘抗体的健康羊只60只，按疫苗说明书规定，皮内注射小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗[3]（Clone9株+AV41株）0.5 ml/只。

2.2 抗体监测

对免疫前及免疫后21 d、42 d、63 d、84 d、105 d羊只颈静脉采血，共60份，分离血清，按照GB/T 27982-2011小反刍兽疫诊断技术和NY/T 576-2015绵羊痘和山羊痘诊断技术要求进行。

3 结果

3.1 不同剂型小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗（Clone9株+AV41株）的免疫效果对比

从表1可以看出，在2组监测的60份样品中，免疫前的抗体均呈阴性，免疫后小反刍兽疫抗体存在，羊痘抗体不存在。

表1 不同剂型疫苗的免疫效果对比 单位：只

3.2 不同剂型小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗免疫后产生抗体保护情况

小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗（Clone9珠+AV41珠）皮内注射后再隔21 d分别进行5次采血检测，每次检测出羊只体内有小反刍兽疫抗体形成，但羊痘抗体没有形成。

4 小结与讨论

小反刍兽疫、山羊痘二联活疫苗（Clone9株+AV41株）免疫效果不理想，两者不能混在一起接种，重组使用会降低两者抗体效价。

免疫反应是一个复杂的生物学过程，免疫效果会受到多种因素的影响，如环境因素、免疫抑制性疾病、营养因素、免疫方法及应激因素等。同时，疫苗使用不当、未按要求使用指定的稀释剂、注射器定量控制失败、针头过短过粗、免疫程序不当、接种时间和次数安排不当等，也会影响免疫效果。需要注意的是，幼龄动物免疫器官尚未成熟，免疫应答能力不完全，免疫过早时，免疫效果也不好。遗传因素和品种不同，个体对疫苗的反应能力也不同。当环境中存在大量病原微生物时，任何一种疫苗注射都不能达到最佳免疫效果，环境卫生不良会降低动物的抵抗力。此外，饲养密度过大、室内湿度高、室内通风不良、噪音严重、突然换料等因素会对畜禽造成不同程度的应激，从而在降低抵抗力的同时影响免疫效果。因此，在免疫过程中应避免应激因素。