血清胱抑素C和尿液肾损伤分子-1检测对妊娠期高血压患者早期肾损伤的诊断价值

王金英

(汝南县人民医院 医学检验科，河南 驻马店 463300)

妊娠期高血压病(HDCP) 是妊娠期一类特有疾病，疾病出现与全身的细小动脉痉挛，引起内皮受损从而导致局部缺血有关。随着我国高龄产妇基数的增长，加之群众对妊娠期间营养干预、作息方式的认知欠科学，导致一些常见产科合并症，如妊娠期高血压疾病近年来的发病趋势显著提升。HDCP 在孕20 周后孕妇中较为多见，主要表现为高血压、水肿以及蛋白尿等，结束分娩之后症状可消失，部分患者出现抽搐、脏器功能衰竭与昏迷等严重情况，对母婴健康产生严重影响。肾损伤属于HDCP 患者一类常见病理生理改变，近年来妊娠有关急性肾损伤患病人数不断增多，常见原因包含大出血、先兆子痫和败血症等。早期肾损伤未及时得到诊断和治疗，患者病情继续加重，产生少尿和肾功能衰竭等症状，甚至引发肾实质受损，若伴随肾皮质坏死，则肾功能受损无法逆转。因此，HDCP 患者的肾损伤需早期得到诊断后及时治疗，以改善其预后。当前，临床诊断HDCP患者的肾损伤主要依靠实验室检查，以往采取血清肌酐、尿酸以及尿素氮灵敏度不高，尿白蛋白检测结果易受到较多因素影响，需积极探索出更为可靠的肾损伤诊断标志物[1]。基于上述背景，本研究对2019年3月至2021年3月汝南县人民医院收治的HDCP 患者及正常孕妇进行对照观察，通过对正常妊娠孕妇和HDCP 孕妇血清SCys C、UKIM-1 水平的检测，分析血清SCys C、UKIM-1 水平与妊娠期高血压早期肾损伤的相关性，具体内容如下：

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2019年3月至2021年3月本院收治的110 例HDCP 伴早期肾损伤患者为肾损伤组，另选取同时间段内收治的100 例无肾损伤HDCP 患者为非肾损伤组、100 例正常妊娠孕妇为对照组。本研究经过本院医学伦理学审批。

纳入标准：①肾损伤组和无肾损伤组患者均与《妇产科学》第7 版[2]中有关HDCP 的诊断标准相符，且肾损伤组24 h 尿蛋白定量在0.3 ～2.0 g；②肾损伤组与无肾损伤组患者均是初次前往医院就诊，既往无HDCP 治疗史；③对照组均为体检无任何异常的孕妇；④具备正常的认知能力，可配合完成研究。

排除标准：①妊娠前已经确定存在肾实质疾病者；②伴糖尿病等能使肾脏出现病变的各类疾病者；③泌尿生殖系统感染或者出血者；④伴心力衰竭者；⑤伴胎膜破裂者；⑥甲状腺功能处在低下状态者；⑦拒绝或者中途退出此次研究者。

1.2 方法

1.2.1 仪器和试剂

双人超净工作台( 苏州净化SW-CJ-2FD 型)；产自德国Eppendorf Centrifuge 5415R 的低温高速离心机； -80℃立式低温冰箱存放实验标本Thermo(美国)；-20℃ 立式冰箱存放实验标本( 中国海尔公司PW-25L262)；日立7600 生化分析仪( 国食药监械( 进) 字2011 第2401157 号)；美国雷杜RT-3100 洗板机；酶标免疫检测仪( 厂商：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；粤械注准：20192220393；型号：MR-96A)；北京九强生物技术公司生产的SCys C、UKIM-1 检测试剂盒；上海跃进生产的恒温水浴箱；GC-1200γ 放射免疫计数器(中国科大创新股份有限公司) 。

1.2.2 标本采集

入院后禁止研究对象剧烈运动及过量饮食，用生化促凝管采集研究对象清晨空腹8 h 状态下肘静脉血3 mL，离心5 min，取上清液备用；另嘱咐受试者留取晨尿及任意中段尿5 mL，于1 500 r/min 离心机中离心5 min 后取上清液，将上清液置于-80℃冰箱中保存备用。排空膀胱后开始计时留24 h 尿液。

1.2.3 检测方法

SCys C 检测：抽取受检者清晨空腹状态下的静脉血液3 ～4 mL，以3 500 r/min 离心10min 分离得到血清，采取免疫比浊法对血清内的SCys C 含量开展检测，将标本加入缓冲液稀释后，针对各个小试管做好标记，将试剂37 ℃保温5 min 后分别加入蒸馏水管、标准品管及样品血清管，混匀后37 ℃保温10 min，利用全自动分析仪在波长340 nm 和700 nm 出测定免疫复合物浊度，根据吸光度增加量得出血清中胱抑素C 的含量。操作者严格依据说明书中有关内容开展操作。

UKIM-1 检测：将试剂盒从4 ℃冰箱中取出，平衡室温30 min，经酶联免疫吸附方法开展检测，操作严格依据试剂盒中说明书进行。将标准品浓度对数值当作横坐标，其相对应的OD 值是纵坐标，采取Excel 进行标准曲线绘制，再结合样本OD 值计算出UKIM-1 水平。

血肌酐(Scr) 及尿素氮(BUN) 均采用全自动生化分析仪检测。

1.3 观察指标

①比较各组孕妇的基线资料，包括年龄、确诊时孕周、体重指数、孕次、产次、分娩经历、文化程度、家庭人均月收入、医疗费用付费方式、职业等；②比较各组孕妇的血清CysC、尿KIM-1 和Scr、BUN 水平；③分析血清CysC、尿KIM-1 及Scr、BUN 之间的相关性。④分析血清CysC、尿β2-MG 和Scr、BUN 关于诊断妊娠期高血压疾病早期肾损伤的敏感度、特异度、准确度及诊断界值，同时将SCys C 及UKIM-1 带入Logistic 回归方程计算，分析早期肾损伤的影响因素。

1.4 统计学方法

经SPSS23.0 统计软件处理数据，计数资料以n(%)表示，行χ2检验；符合正态分布的计量资料以±s表示，行t检验，多组间计量资料对比采取方差分析，采用Pearson 相关性分析法检验两变量间的相关性，采取Logistic 回归方法分析早期肾损伤影响因素，将P＜0.05作为评定存在差异的标准。

2 结 果

2.1 三组基线资料对比

三组年龄、确诊时孕周、体重指数、孕次、产次、分娩经历、文化程度、家庭人均月收入、医疗费用付费方式、职业等基线资料对比，差异无统计学意义(P＞0.05)，详见表1。

表1 三组基线资料对比结果(± s )Table 1 Comparative results of three groups of baseline data(± s )

表1 三组基线资料对比结果(± s )Table 1 Comparative results of three groups of baseline data(± s )

一般资料 肾损伤组(n=110) 非肾损伤组(n=100) 对照组(n=100) χ2/t P年龄/岁 28.14±4.18 28.05±4.26 28.34±4.60 0.050 0.960确诊时孕周/周 35.45±5.12 35.16±5.08 35.24±5.26 0.634 0.528体重指数/(kg/m2) 23.45±0.54 23.50±0.58 23.28±0.67 0.368 0.714孕次/次 2.38±0.45 2.26±0.50 2.30±0.54 1.600 0.400产次/次 1.48±0.32 1.50±0.28 1.46±0.35 0.203 0.674分娩经历/例 0.060 0.806初产妇 66 62 60经产妇 44 38 40文化程度/例 0.026 0.979初中及以下 25 22 20高中及中专 58 53 51大专及以上 27 25 29家庭人均月收入/元 0.575 0.565＜2 500 25 22 25 2 500 ～5 000 48 49 47＞5 000 37 29 28医疗费用付费方式/例 0.059 0.808自费 25 20 19社保 85 80 81职业/例 0.069 0.945自由职业 32 29 28工人 15 18 16农民 10 11 12干部 19 17 16职员 24 16 18其他 10 9 10

2.2 三组SCys C 及UKlM-1 水平对比

三组SCys C 及UKIM-1 水平对比，差异有统计学意义(P＜0.05)；肾损伤组的SCys C 及UKIM-1、BUN 水平均高于非肾损伤组及对照组(P＜0.05)，Scr 水平低于非肾损伤组及对照组(P＜0.05)，非肾损伤组和对照组的SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平对比，差异无统计学意义(P＞0.05)，详见表2。

表2 三组SCys C 及UKIM-1 水平对比(± s )Table 2 Comparative results of SCys C and UKIM-1 levels in three groups(± s )

表2 三组SCys C 及UKIM-1 水平对比(± s )Table 2 Comparative results of SCys C and UKIM-1 levels in three groups(± s )

注：和非肾损伤组及对照组对比，①P ＜0.05；和对照组对比，②P ＞0.05。

组别 例数 SCys C/(mg/L) UKIM-1/(μg/L) BUN/(mmol/L) Scr/(μmol/L)肾损伤组 110 1.50±0.34① 1.55±0.50① 6.28±2.35 63.95±125.36非肾损伤组 100 1.05±0.28② 0.61±0.20② 4.75±3.86② 72.75±130.28②对照组 100 0.98±0.30 0.58±0.14 4.20±2.64 70.95±125.36 F 88.820 299.910 3.449 0.063 P 0.001 0.001 0.001 0.942

2.3 血清SCys C 与KlM-1、BUN、Scr 的相关性分析

经Pearson 相关分析显示，血清SCys C 与KIM-1、BUN、Scr 均呈正相关，相关系数分别0.756、0.537、0.485。UKIM-1 与BUN、Scr 均呈正相关，相关系数分别0.628、0.634，BUN 与Scr 呈正相关，相关系数为0.497(P＜0.05)，详见表3。

表3 血清SCys C 与KIM-1、BUN、Scr 的相关性分析Table 3 Correlation analysis of serum SCys C with KIM-1, BUN, and Scr

2.4 早期肾损伤出现的Logistic 回归分析结果

将SCys C、UKIM-1 带入Logistic 回归方程计算，发现SCys C、UKIM-1 均是判断早期肾损伤出现的预测因子，OR＞1，详见表4。

表4 早期肾损伤出现的Logistic 回归分析结果Table 4 Logistic regression analysis of early renal injury

2.5 血清CysC、尿液KlM-1 预测妊娠期高血压孕妇早期肾损伤的ROC 曲线分析结果

血清CysC 预测妊娠期高血压孕妇早期肾损伤的ROC曲线下面积(AUC) 为0.769 (95%CI 0.528 ～0.804)，以0.79 mg/L 为截断值时，其灵敏度为86.67% ，特异 度 为68.61%; 尿 液KIM-1 的AUC 为0.864 (95%CI 0.713 ～0.925)，以3.24 μg/L 为截断值时，其灵敏度为89.99%，特异度为85.71%。

3 讨 论

HDCP 作为妊娠阶段女性一类常见疾病，是指发生于妊娠期间的高血压疾病。该病的发病与营养、遗传、免疫调节、血管内皮损伤等因素相关。病情恶性进展下，该病会对产妇的肾脏、心脏等器官造成损伤，甚至会诱发脑水肿、抽搐、脑出血等问题，严重威胁孕妇和胎儿生命健康。HDCP 和产科出血以及心脏病是孕妇的三大主要死因[3]。伴孕周增加，子宫动脉血液供应相应增多，血管阻力降低，发生HDCP 的机率上升。一项流行病学调查发现[4]，妊娠期高血压的发病率达6.5%，好发年龄段为25 ～29 岁，其中单胎妊娠的患者占比更是高达82.1%，提示该妊娠期合并症在产科较为常见，HDCP 作为产科一类重要的并发症，已经成为医学研究中的热点问题。HDCP 能引发肾小球扩张和内皮细胞肿胀，血肌酐与尿素氮水平迅速增高，肾小球滤过率降低[5]。早期无法及时有效诊断并采取合理治疗措施，能引起严重不良后果。因此积极寻找到特殊、敏感的早期标志物有着重要意义。

UKIM-1 属于早期肾功能受损一个重要的预警指标，其属于跨膜蛋白，在肾脏出现毒性受损或者缺血期间，去极化近端小管细胞能过度表达出UKIM-1。当前，UKIM-1 已在多项研究中被确定和肾功能受损程度相关，当血清中的UKIM-1 水平≥3.25 μg/L 代表孕妇存在HDCP 风险，同时需重视孕妇的肾功能。据有关研究发现[6]，UKIM-1 于缺血性肾受损中尤为敏感，于其他脏器内表达较少。血清UKIM-1 水平上升，肾小球滤过率迅速降低，为UKIM-1 早期预警HDCP 患者的肾损伤带来可靠依据。SCys C 属于一类半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其分子量较低，可以通过肾小球自由滤过，并且完全被肾小管上皮细胞吸收分解，从而清楚地表达肾小球滤过率的变化，是当前唯一一种代谢途径[7]。BUN 是血浆中除蛋白质外的一种含氮化合物，可直接通过肾小球滤过途径排出体外，并且在患者发生肾功能不全失代偿表现时可直接呈高表达状态，从而反映人体肾小球滤过功能；而Scr 属于一种肌肉代谢产物，可通过尿液排出体外，在肾小球滤过功能降低时，人体Scr 水平会明显上升，进而一直被视为反映肾功能的常见指标[8]。据有关研究显示[9]，SCys C 能被用于肾功能评估，其特异度和敏感度较高，能评定急性肾脏损伤患者的病情及预后，且该项指标水平不会受性别、年龄、体质量以及种族影响。

本次研究发现， 肾损伤组SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平较非肾损伤组及对照组高(P＜0.05)，非肾损伤组和对照组SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平对比，差异无统计学意义(P＞0.05)，提示HDCP 患者的SCys C 及UKIM-1 水平存在异常升高。除BUN、Scr 两项目前已被临床认可的指标外，SCys C 及UKIM-1同样值得应用于HDCP 患者的早期肾损伤筛查中。此外，经Pearson 相关分析显示，血清SCys C 与KIM-1、BUN、Scr 均呈正相关，相关系数分别0.756、0.537、0.485。UKIM-1 与BUN、Scr 均呈正相关，相关系数分别0.628、0.634，BUN 与Scr 呈正相关，相关系数为0.497(P＜0.05)。由本研究结果可以看出血清CysC、尿KIM-1 是检测妊娠期高血压疾病早期肾损伤的理想指标，诊断界值分别为0.79 mg/L、3.24 μg/L，当检测结果高于界值水平时，考虑患有妊娠期高血压伴肾损伤的可能性较大。这和陈素萍[10]研究中提出对照组和HDCP组SCys C 与KIM-1 水平存在正相关(r=0.12，P=0.022;r=0.30，P=0.514)。SCys C 与KIM-1 曲线下面积分别为0.739 和0.551，诊断的灵敏度和特异性较好的结论相一致，佐证本研究并非偶然。但本文与之不同之处在于，我们将根据孕妇是否出现肾损伤进行二次分组，充分展示上述指标在是否合并肾损伤患者中的差异性。值得注意的是，血清CysC 的敏感度及特异度较低，易受某些外在因素影响，在诊断过程中存在一定的假阳性率和假阴性率，因此，我们建议临床诊断中不可单纯依靠某一种指标盲目检测，多项指标联合检测才能明显提高妊娠期高血压疾病及早期肾损伤的诊断效能[11]。此外，本次研究的创新之处在于观察了早期肾损伤的影响因素，最终发现，SCys C、UKIM-1 均是判断HDCP 患者早期肾损伤出现的预测因子，OR值＞1，提示两项指标对HDCP患者的早期肾损伤发生均有着一定预测价值。

综上所述，血清SCys C、 尿液UKIM-1 在诊断HDCP患者的早期肾损伤中有着重要价值，能为临床评定患者病情和制定后续治疗方案提供重要参考依据。但本次研究中仍存在一定不足，如纳入的样本数不多，且研究时间不长，未对HDCP 伴早期肾损伤患者的远期预后开展统计分析等，这些均需在日后研究中加以完善，以得到更为全面、客观的研究结果，更好地指导临床实践。