杂色杜父鱼驯化及规模化繁殖技术

肖志国 王秀兰 康学会 戴良 刘长有 陈婵娟 郎宇奎 李冠颖

摘 要：為研究杂色杜父鱼（Cottus poecilopus）驯化及规模化繁殖技术，2021年开展了人工繁殖试验。选择水泥池、投喂冰冻卤虫培育亲鱼，采用挤腹采卵法采卵、等渗液采精、等渗液载精授精的方法，利用玻璃钢平列槽孵化受精卵，出苗阶段采取降氧孵化措施。试验结果表明，亲鱼驯化成活率93%，采卵率100%，受精率95%;发眼积温105～126 ℃·d，发眼率97%;降氧孵化出苗积温为250～310 ℃·d，孵化率88%，试验共繁殖仔鱼37万尾。

关键词：杂色杜父鱼（Cottus poecilopus）;驯化;规模化繁殖

杂色杜父鱼（Cottus poecilopus）又名花足杜父鱼、大头鱼，隶属鲉形目，杜父鱼科，杜父鱼属，在中国仅分布于黑龙江、松花江、乌苏里江、绥芬河、图们江、鸭绿江、辽河支流浑河、太子河、辽东半岛碧流河等，国外见于朝鲜北部、俄罗斯远东地区及北欧诸国。杂色杜父鱼为喜低温的底层鱼类，以水生昆虫及其幼虫、河虾、东北螯虾、小鱼为食[1]。杂色杜父鱼的突出特点，一是肉质细嫩，呈蒜瓣状，口感好，营养价值高;二是生存在无污染、水质清澈的溪流中，生存环境绿色环保，是典型的绿色食品，符合当前消费者对健康饮食、绿色食品的需求，品质优;三是颇受市场欢迎，且货源奇缺，市场售价高达100～200元/kg，经济价值高，极具开发价值。2002年辽宁省进行了简单的小水面养殖[2]，2015年黑龙江水产研究所进行了杂色杜父鱼生物学初步研究[3]，但其资源利用的专项研究尚属空白，为此，我们于2020年1月1日至6月27日进行了杂色杜父鱼驯化及规模化繁殖技术的研究，旨在为冷水鱼产业提供新的名贵养殖鱼类，提高养殖效益。

1 材料与方法

1.1 试验地点

试验于2021年1月1日至6月27日在临江市金鲨冷水鱼养殖农民专业合作社进行，水源为曝气的涌泉水，水温8.5 ℃，溶解氧9～11 mg/L，pH值8～8.3。

1.2 亲鱼培育

1.2.1 亲鱼来源 2020年1月1日至1月31日，在临江市境内七道沟电捕采集亲鱼4 386尾，平均规格22.8 g/尾，加冰、充气运输。

1.2.2 亲鱼暂养 亲鱼采回后，在室内利用玻璃钢水槽暂养一周，暂养的第二天，将槽内水位降至4～5 cm，用2%的食盐止水消毒40 min;投喂冰冻卤虫，方法是在玻璃钢槽上、进水管下架设饵料筐，将冰冻卤虫放入，随水流冲下投喂，以第二天略有剩饵为宜。

1.2.3 培育要点 培育池选择在近水源处，面积20 m2（长2 m×宽10 m），池深0.8～1 m，进、出水口设置拦鱼网栅，出水口闸板控制水位，放鱼前用10%的聚维酮碘溶液20 mg/L消毒24 h，冲洗干净后，加水至0.3～0.5 m，隔断成4个小池，将暂养的亲鱼按雌、雄（雄鱼第一背鳍上缘具有黄线）和大、小分养;饵料为冰冻卤虫，装在5 cm×5 cm网目的聚乙烯袋中，吊在水体的中上部，每日07：00-08：00、15：00-16：00进行驯化投喂，投饵率3%～5%，繁殖期前后投饵率1%;培育水温7～8.5 ℃，溶解氧不低于6 mg/L，水体每1.5～2 h交换一次;及时清刷进、出水口的拦鱼网栅和培育池。每月用 0.1% 的双氧水止水消毒亲鱼 15～20 min，预防和治疗水霉病。

1.3 人工繁殖

1.3.1 产前室内暂养 经过3个月左右的培育，随着亲鱼性腺接近成熟，食欲显著减退，并于4月23日挑选亲鱼2 300尾，从室外培育池移入室内玻璃钢槽中，并按雌、雄和大、小分养。在进水管下设置饵料筐，放入冰冻卤虫，随水流冲下投喂，投喂量以第二天略有剩饵为宜。每天早晨清理暂养槽，保持水体的清洁卫生。每周用 0.1% 浓度的双氧水止水消毒亲鱼15～20 min，预防和治疗水霉病。

1.3.2 亲鱼性成熟度检查与分养 成熟的雄鱼，轻压泄殖腔，会有白色的精液流出。成熟的雌鱼腹部柔软，挤腹轻揉会有橙色或橘红色卵粒流出。5月30日将雌鱼按腹部柔软程度（软、较软、不软）进行分养，并对腹部达到较软程度的雌鱼每三天检查一次，饵料投喂和鱼病预防同1.3.1。

1.3.3 采卵、采精和授精

1.3.3.1 配制等渗液 采卵和采精前，先配制等渗液，配制方法：取90.4 g 氯化钠（分析纯）、2.4 g氯化钾（分析纯）、2.6 g氯化钙（分析纯），充分溶解于10 L蒸馏水中。

1.3.3.2 注意事项 采卵和采精操作均在避光、防水的条件下进行，操作时须戴医用橡胶手套，并用干毛巾擦去雌、雄鱼体表的水。

1.3.3.3 采卵、采精 用挤腹采卵法将2～3尾雌鱼卵挤入干燥的适当大小的采卵盆中。轻压雄鱼泄殖腔，至精液流出，用烧杯中的等渗液将精液冲入干燥的采精盆中，载精等渗液体积应为待受精卵的体积的5～7倍。

1.3.3.4 授精 雌雄比（2～3）∶1，授精方法为等渗液载精授精，即将载有精液的等渗液倒入采卵盆中，使精、卵充分混合，搅拌5～10 s，静置3～5 min。

1.3.4 受精卵孵化

1.3.4.1 孵化设施 采用规格为长为2.8 m×宽052 m×深0.22 m的玻璃钢平列槽孵化，内设规格为0.4 m×0.5 m×0.2 m的5个串联的小槽。使用前，用10%的聚维酮碘溶液20 mg/L消毒24 h，并冲刷干净。为使孵化用水自上而下流经每个小槽，小槽的阻水板及侧部用长80 cm、宽5 cm、厚2 cm的海绵带密封，出水管设置高度为11～12 cm。

1.3.4.2 布卵与密度 受精卵布卵先从出水口处的小槽开始，贴着水面均匀倾洒，布卵密度约35 000～40 000粒/m2，每小槽7 000～8 000粒。

1.3.4.3 孵化条件 避光、防震，孵化水流量15～2 L/ min，孵化水深11～12 cm，孵化水温7.5～10.5 ℃，水体溶解氧不低于6 mg/L。

1.3.5 孵化管理

1.3.5.1 受精卵消毒 受精卵孵化期用18%的溴硝丙二醇溶液滴定式流水消毒，消毒浓度035～0.4 g/L，消毒时间40～60 min，1次/d，直至出苗。

1.3.5.2 洗槽与移槽 仔鱼孵出达0.3% 时进行洗槽，关闭出水管，将孵化槽水位升至20 cm，再关闭进水管，去除孵化槽的密封海绵，用清水轻轻冲洗孵化槽，将槽中的死卵和仔鱼倒入盆中，经过洗槽的孵化槽移入事先准备好的平列槽主槽中，不密封，继续孵化，每三天洗槽一次。

1.3.5.3 仔鱼暂养 暂养槽为玻璃钢槽，在出水管前设置30目防逃网，将盆中的死卵用清水漂洗干净，将仔鱼倒入玻璃钢槽中，暂养水深10～12 cm，水流量2.5～3 L/min，随着暂养仔鱼数量的增多，水流量调整为4～5 L/min。

1.3.5.4 降氧孵化 出苗达1%时，当天16：00—17：00，先关闭出水管，提高水位至20 cm，再关闭进水管，第二天当溶解氧降至6.5～7 mg/L时，进行洗槽和仔鱼暂养。上述做法，每天连续进行，至出苗结束。

1.3.6 仔鱼开口 仔鱼孵出一周，能够正常游动，具有捕食能力，投喂丰年虫无节幼体开食驯化。1.3.7 亲鱼产后培育 亲鱼产后第二天用01%的双氧水止水消毒15～20 min，投喂适量的冰冻卤虫，以每天略有剩饵为宜。亲鱼在室内暂养一周后，移入室外水泥池中进行产后培育，培育水温5～15 ℃，方法同亲鱼培育。

2 结果

杂色杜父鱼驯化培育成活率93%，试验共采雌鱼1 273尾，采卵率100%，采卵45.6万粒，孵化积温100 ℃·d时测定的受精率为95%;发眼积温105～126 ℃·d，发眼率97%;降氧孵化的出苗积温为250～310 ℃·d，孵化率88%，仔鱼畸形率01%，获得仔鱼37万尾。杂色杜父鱼年龄、怀卵量、性成熟系数（性腺重/空壳重×100%）见表1。

3 讨论

3.1 水源、培育池和药物选择

杂色杜父鱼的养殖水源须充分曝气，因为涌泉水富含气体，如不经曝气，易得气泡病。杂色杜父鱼喜清水，且易感染三代虫和车轮虫，因此，培育池应选择在近水源处。杂色杜父鱼为小型鱼类， 培育池宜小不宜大，便于驯化。杂色杜父鱼为无鳞鱼，对金属制剂药物较为敏感，培育池和暂养槽在消毒时应选择刺激性小的非金属制剂药物。

3.2 杂色杜父鱼驯化培育条件及饵料分析

杂色杜父鱼喜暗，强光线会严重影响其摄食，因此，投喂时间以每天07：00-08：00和15：00-16：00为宜。杂色杜父鱼在水温5～15 ℃、溶解氧不低于6 mg/L條件下，能正常摄食和生长。杂色杜父鱼在自然水域主要以灰纹石蛾和钩虾为食[3]，而本试验的饵料为杂色杜父鱼喜食的卤虫，卤虫富含蛋白质、脂肪和高度不饱和脂肪酸[4]，本试验中驯化培育的成活率为93%，采卵率达100%，说明在杂色杜父鱼培育中选择卤虫是可行的，能够满足其生长发育的需求。

3.3 按雌雄、大小和熟度进行分养，是提高亲鱼成活率的关键措施

杂色杜父鱼具有残食同类的习性，鱼体受伤后易发生水霉病甚至死亡。人工繁殖时，由于雄鱼精液量小，为避免精液的浪费，不进行成熟度检查。因此在亲鱼培育和人工繁殖时，一定要按雌雄、大小进行分养。而按成熟度对雌鱼进行分养，可避免因检查次数过多造成雌鱼的受伤，进而导致水霉病的发生，这是杂色杜父鱼驯化培育和人工繁殖过程中提高亲鱼成活率的关键措施。

3.4 杂色杜父鱼的繁殖生物学

杂色杜父鱼在吉林省的繁殖期为4月下旬至6月上旬，2龄性成熟，繁殖水温7～11 ℃。卵圆形，粒径2～3.5 mm，橙色或橘红色，黏性。从表1可见，杂色杜父鱼的绝对怀卵量为54～1 002粒，随着年龄的增加而增大;相对怀卵量为15.6～32粒/g，性成熟系数为30.9%～54%，均呈不规律性。杂色杜父鱼雄鱼的精液特别少，在进行人工授精时，不能直接将精液挤到卵上，须借助等渗液采精;杂色杜父鱼的卵为黏性，遇水迅速粘结在一起，无法授精，但能游离于等渗液中，因此，在进行杂色杜父鱼人工繁殖时，必须采用等渗液采精及载精授精。性成熟的杂色杜父鱼腹部柔软，应及时采卵，避免流产。

3.5 受精卵适宜的消毒时间节点

在鱼类人工繁殖过程中，对鱼类受精卵进行消毒处理，可以很大程度上预防各种病原对受精卵的危害，防止病原体的垂直传播[5]，消毒剂对受精卵上附着菌具有抑制和清除作用[6-8]，但也会破坏受精卵的渗透压、卵膜、卵质，导致孵化率低，甚至产生畸变等一系列问题[9]，但使用得当，可以获得较高的孵化率[10]。本试验中受精卵消毒持续至出苗期，与2020年笔者所做试验中消毒持续至发眼期相比，孵化率提高10%～15%，而畸形率相当，说明受精卵的适宜消毒节点为持续至出苗期。

3.6 降氧孵化是提高杂色杜父鱼孵化率的有效手段

降氧孵化实为环境胁迫，即在出苗阶段，通过人为降低孵化水体的溶解氧，刺激出苗，显著缩短出苗时间，降低发眼卵感染水霉的风险。本试验出苗阶段采用降氧孵化，与2020年笔者试验中的正常孵化相比，杂色杜父鱼可提前出苗5～7 d，孵化率也相应提高。

3.7 为吉林省冷水鱼产业提供名贵养殖品种，提高养殖效益

吉林省冷水鱼产业养殖鱼类以虹鳟、金鳟、美洲红点鲑和白点鲑为主，养殖品种较为单一，生产旺季产品滞销，养殖效益较低，而杂色杜父鱼售价高，每公斤100～200元，且供不应求。提高杂色杜父鱼人工规模化繁殖水平，可为吉林省冷水鱼产业提供新的养殖品种，并可通过调整养殖结构，改善养殖现状，提高养殖效益。

参考文献：

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（收稿日期：2021-11-18）

基金项目：吉林省科技发展计划项目（20190301035NY）。

作者简介：肖志国（1965-），男，正高级工程师，研究方向：水产养殖技术。E-mail：381996804@qq.com。