参斛汤对前列腺癌患者术后病灶及血清microRNA-301a-3p水平的影响

杨静，李晓天，陈品金

（1.郑州大学药学院，河南郑州 450000；2.郑州大学第一附属医院泌尿外科，河南郑州 450003）

前列腺癌是临床常见的男性泌尿生殖系统恶性肿瘤，多发于中老年男性，其发病率较高，且与年龄呈正相关[1]。目前临床对于前列腺癌的发病机制尚未完全阐明，多数学者认为与遗传、种族、年龄、肥胖、性激素等因素有关[2]。该病早期病情隐匿，多数患者确诊时已至中晚期，临床上治疗此类患者以手术根治为主，并于术后进行化学治疗（以下简称化疗）以提高疗效，降低复发率。但术后化疗对患者免疫功能造成一定损伤，易引发严重不良反应[3]。近年来，随着中医药的兴起，部分学者将中西医结合作为治疗肿瘤疾病的新方向。多项研究指出，参斛汤可有效减少膀胱癌、食管癌等化疗带来的不良反应，并可对肿瘤细胞产生抑制作用，改善预后[4-5]。基于此，本研究通过对95 例接受根治术的前列腺癌患者术后进行分组治疗，探讨参斛汤对前列腺癌术后病灶进展及血清miRNA-301a-3p 水平的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年2月—2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的95 例前列腺癌患者，按随机数表法分为对照组（47 例）和研究组（48 例）。对照组患者年龄48～72 岁，平均（65.36±4.23）岁；鳞癌11 例，腺癌36 例；卡氏评分62～72 分，平均（66.34±2.41）分。研究组患者年龄49～73 岁，平均（66.01±4.16）岁；鳞癌10 例，腺癌38 例；卡氏评分63～72 分，平均（66.15±2.36）分。西医诊断标准：参照2011 版《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》[6]中前列腺癌诊断标准，且经前列腺穿刺活检确诊。中医诊断标准：参照2011 版《中医肿瘤学》[7]，主症：尿流变细，点滴不通或排出无力，头晕眼花，消瘦贫血，倦怠乏力，心悸怔仲，动则气促；次症：腰痛，潮热盗汗，食欲下降；舌脉象：舌红，苔少或无苔。2 项主症+1 项次症+1 项舌脉象可诊断为前列腺癌气阴两虚证。纳入标准：①符合以上西医、中医诊断标准；②年龄≤75 岁；③TNM 分期Ⅲ、Ⅳ期；④预计生存期＞6 个月；⑤卡氏评分＞60 分；⑥自愿签署知情同意书；排除标准：①合并其他重要器官恶性肿瘤者；②合并免疫功能障碍者；③术前已接受放射治疗、化疗者；④术后恢复不佳者；⑤治疗依从性较差者。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），可对比。

1.2 方法

患者均接受经尿道前列腺癌根治术，对照组术后第2 天接受常规化疗，即静脉滴注紫杉醇注射液（四川汇宇制药股份有限公司，国药准字H20203702），剂量75 mg/m2，3 周1 次；醋酸泼尼松片（天津柏海药业有限责任公司，国药准字H12020364）5 mg，口服，2 次/d，21 d 为1 个疗程。研究组在对照组基础上增加参斛汤，即术后第2 天开始服用参斛汤，药方组成：生晒参15 g，黄精、天花粉、鸡血藤、墨旱莲、女贞子各12 g，石斛、黄芪、连翘、猪苓各10 g，马鞭草、生地黄、姜半夏各8 g，甘草、石苇、藕节、半枝莲各6 g，鸡内金9 g，薏苡仁、麦冬各20 g；对于乏力严重患者可增加黄芪至30 g；对于失眠严重患者可加茯神9 g，莲子心12 g，炒酸枣仁15 g；对于呕吐严重患者可加竹茹10 g，生姜3 段；加水煎服，1 剂/d，早晚分服，21 d 为1个疗程。两组患者治疗周期均为5 个疗程。

1.3 评价指标

①术后病灶进展情况：所有患者术后每3 个月至医院复查1 次，比较两组术后局部病灶进展时间、发生远处转移时间，开始时间为术后第2 天，截止时间为局部出现肿瘤或发生远处转移。②血清学指标：于治疗前、治疗后6 个月采集两组患者肘正中静脉血5 ml，离心后取上层血清保存待测。采用发射免疫法对前列腺特异性抗原（PSA）、游离前列腺特异性抗原（f-PSA）水平进行测定，并计算游离前列腺特异抗原百分率（FPSAR），FPSAR=f-PSA/PSA。采用化学发光免疫法测定血清肿瘤相关物质（TAM）。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）对microRNA-301a-3p（miR-301a-3p）相对表达量进行检测。RT-PCR反应体积20 μl，反应条件：95℃预变性3 min，95℃变性15 s，60℃退火15 s，共40 个循环。内参基因为GAPDH，计算Ct值，采用2-△△Ct法检测miR-301a-3p 相对表达量。引物合成自广州伯信生物科技有限公司，miR-301a-3p 正向引物：5’-AGCACCTTCGGAAGTCTCC CG-3’，反向引物：5’-ATGGGAGCACAATACCAC AGCAA-3’，分别为14 bp 和16 bp；GAPDH 正向引物：5'-CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT-3'，反向引物：5'-AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC-3'，分别为15 和16 bp。③免疫功能：血清采集方法同上，采用Attune NxT 流式细胞仪（赛默飞世尔科技中国有限公司）检测T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。④不良反应：比较两组治疗后不良反应发生情况，包括发热、胃肠道反应、口腔黏膜炎、肝功能损伤等。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 23.0 统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用t检验；计数资料以率（%）表示，比较用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者术后病灶进展情况比较

两组患者局部病灶进展时间、远处转移时间比较，差异有统计学意义（P＜0.05），研究组较对照组长。见表1。

表1 两组患者术后病灶进展情况比较 （月，±s）

表1 两组患者术后病灶进展情况比较 （月，±s）

组别对照组研究组t 值P 值n 47 48局部病灶进展时间12.24±1.66 15.48±2.01 8.557 0.000远处转移时间13.11±1.80 15.82±2.14 6.673 0.000

2.2 两组患者治疗前后血清学指标比较

两组患者治疗前血清PSA、FPSAR、TAM、miR-301a-3p表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗后血清PSA、FPSAR、TAM、miR-301a-3p 表达水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），研究组FPSAR 高于对照组，PSA、TAM、miR-301a-3p低于对照组。见表2。

表2 两组患者治疗前后血清学指标比较 （±s）

表2 两组患者治疗前后血清学指标比较 （±s）

组别n PSA/（μg/L）治疗前32.43±8.34 32.89±8.26 0.270 0.788治疗后8.46±2.57 5.19±2.13 6.758 0.000 FPSAR/%治疗前14.24±5.12 14.39±5.06 0.144 0.886治疗后17.31±5.52 20.12±6.48 2.273 0.025 TAM/（u/ml）治疗前110.46±16.97 109.83±16.60 0.183 0.855治疗后82.17±11.23 75.14±10.29 3.182 0.002对照组研究组t 值P 值47 48 miR-301a-3p治疗前5.62±1.24 5.53±1.29 0.347 0.729治疗后2.59±0.91 2.01±0.88 8.158 0.034

2.3 两组患者治疗前后免疫功能比较

两组患者治疗前CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较对照组高，CD8+较对照组低。见表3。

表3 两组患者治疗前后免疫功能比较 （±s）

表3 两组患者治疗前后免疫功能比较 （±s）

组别n CD3+/%治疗前55.16±3.54 55.37±3.46 0.292 0.771治疗后52.35±3.31 60.06±4.03 10.178 0.000 CD4+/%治疗前35.64±2.34 35.27±2.40 0.761 0.449治疗后33.39±2.26 38.72±2.89 9.946 0.000 CD8+/%治疗前28.94±1.86 28.67±1.80 0.719 0.474治疗后30.09±1.97 26.14±1.65 10.603 0.000对照组研究组t 值P 值47 48 CD4+/CD8+治疗前1.22±0.41 1.25±0.39 0.365 0.716治疗后1.17±0.35 1.40±0.63 2.193 0.031

2.4 两组患者不良反应比较

两组患者不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（χ2=1.176，P=0.278）。见表4。

表4 两组患者不良反应比较 例（%）

3 讨论

化疗是临床治疗前列腺癌的重要手段之一，可有效延长患者生存时间并提高生存质量[8]。为降低前列腺癌根治术后复发及转移风险，临床常在中晚期前列腺癌患者术后给予化疗，但化疗必然伴随着一定程度的副作用。以往多项研究已证实，中医在治疗癌症方面具有独特优势，在缓解临床症状、抑制病灶进展、改善患者生存质量等多方面可发挥积极作用[9]。故中西医结合治疗前列腺癌成为目前临床研究热点。

前列腺癌在中医上属“尿血”、“虚劳”、“癃闭”、“积聚”、“血淋”等范畴，本虚标实是其病机，情志抑郁、饮食不节、脏腑亏虚、六淫邪毒等因素可引发正气亏虚，痰凝气阻，长此以往致使癌毒衍生[10]。前列腺癌晚期多采用手术联合化疗，化疗属火热之毒，对人体气阴易造成损伤，故气阴两虚型是晚期前列腺癌最常见证型[11]。气虚主要为脾气虚，脾胃气血生化之源，胃主纳食，脾胃运化乏力，致使正气亏虚，且水湿内停，继而生痰；阴虚主要为肾阴虚，肾阴亏虚致使内生虚火，灼津为痰；痰久则癌毒衍生，阻于前列腺则发为气阴两虚型前列腺癌[12]。对此证型前列腺癌患者的治疗应以扶正驱邪、益气养阴为主。参斛汤是一种传统中医方剂，常用于膀胱癌、食管癌、胃癌等疾病的辅助治疗，可抑制病灶进展，提高生存质量，其疗效已得到广泛证实，但在前列腺癌的辅助治疗中应用较少。本研究结果显示，研究组局部病灶进展时间、远处转移时间较对照组长，治疗后研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较对照组高，CD8+较对照组低，提示参斛汤用于前列腺癌术后可对病灶进展产生抑制，并改善患者免疫功能。究其原因在于，参斛汤方中生晒参可补元气、补脾益肺、生津止渴，常用于治疗气虚、久咳、津亏口渴等气血津液不足之症；且现代药理学研究表明，生晒参中含有大量人参皂苷，口服时均为前药，血液难以直接吸收，经肠道生物催化下可生成次生皂苷Rh2、Rh1、CK 等，进入血液发挥抗肿瘤的药效，对肿瘤细胞可产生抑制，并诱导其凋亡[13]。黄芪有补气固表之功，可治气虚乏力；且现代药理证实，黄芪可对机体代谢能量、蛋白质的合成起到促进作用，提高机体抗病能力，且可加速白细胞介素的合成，激活淋巴因子，提高机体抗肿瘤活性，抑制肿瘤细胞的生长[14]。黄精有健脾、补气、养阴、益肾之功效，可治脾胃气虚、精血不足、内热消渴；且黄精中含有黄精多糖，而其对肿瘤细胞具有抑制作用，可对细胞周期分布产生影响，通过Caspase 系统对肿瘤细胞凋亡起到诱导作用[15]。石斛具有养阴、生津之功效，可治阴虚内亏之证；天花粉具有清热泻火、生津止渴之功效，与滋阴药合用，可标本兼治；半枝莲具有清热、化瘀之功效；薏苡仁则有健脾、泻热、燥湿之效；连翘、石苇可利尿利湿、清热通淋；麦冬有益气养阴之功，可治气阴两虚所致排尿困难、小便涩痛；甘草调和诸药。全方攻补兼备，攻而不损、补而不滞、生津而不助湿，共奏补气养阴、祛痰生津之功效[16]。

微RNA 是非编码RNA，是近年来疾病诊断、预后评估的新型标志物。已有多项研究指出，miR-301a-3p 在胰腺癌、结直肠癌、喉癌、乳腺癌等多种肿瘤中表达异常[17]。ZHANG 等[18]研究提出，miR-301a-3p 可通过抑制PTEN 促进食管鳞状细胞癌细胞增殖。ZHANG 等[19]研究也指出，miR-301a-3p 在SW620、HT29 细胞系及结直肠癌组织中呈异常高表达，且miR-301a-3p 的异常表达与癌细胞的增殖、侵袭密切相关。赵琪等[20]研究指出，TAM 在前列腺癌的诊断中具有较高价值，与PSA 联合检测可提升诊断特异性。本研究结果显示，研究组治疗后血清PSA、TAM、miR-301a-3p 表达水平均低于对照组，FPSAR 高于对照组，提示参斛汤用于前列腺癌辅助治疗可有效抑制肿瘤生长，改善肿瘤标志物水平，抑制miR-301a-3p 表达，但具体作用机制仍需进一步研究。

综上所述，参斛汤用于前列腺癌术后治疗可有效抑制病灶进展，提高免疫功能，抑制miR-301a-3p 表达，但在减少术后化疗不良反应方面未见明显优势。