戊唑醇对向日葵菌核病菌和佛手瓜绵腐病菌室内抑菌情况的研究

杨士杰 黄六仟

摘要 本文以戊唑醇为试剂，设置浓度为0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg /ml，采用菌丝生长速率法，分别将供试向日葵菌核病菌和佛手瓜绵腐病菌单孢菌株在含药平板上进行敏感性测定。结果表明：佛手瓜绵腐病菌对戊唑醇的EC50为0.210 5 μg/ml，小于参考值0.46 μg/ml，对戊唑醇比较敏感;向日葵菌核病菌的EC50为2.704 μg/ml，大于参考值0.91μ g/ml，介于0.91～3.644 μg/ml之间，对戊唑醇表现为中抗。戊唑醇对佛手瓜绵腐病的抑菌效果要优于向日葵菌核病。且随着浓度的增大，抑菌效果也不断增强。而戊唑醇对向日葵菌核病菌抑制效果比较差。以上结果可为农业生产中合理选用药剂防治佛手瓜绵腐病和向日葵菌核病提供参考。

关键词 戊唑醇;敏感性测定;向日葵菌核病菌;佛手瓜绵腐病菌

中图分类号：P437 文献标识码：B 文章编号：2095–3305（2021）08–0005–02

Study on Indoor Bacter-iostasis of Tebuconazole Against Sclerotinia Solani and Cotton Rot of Bergamot Melon

YANG Shi-jie et al（College of life science， resources and environment， Yichun Univ-ersity， Yichun， Jiangxi 336000）

Abstract Tebuconazole was used as reag-ent and the concentration was set as 0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml， using mycelial growth rate method， the sensitivity of the tested single spore strains of Sunflower Sclerotinia and bergamot cotton rot were determined on the drug containing plate. The results showed that the EC50 of citronella sponge rot to tebuconazole was 0.2105 μg/ml is less than the reference value of 0.46 μg/ml， sensitive to tebuconazole; The EC50 of Sclerotinia solani was 2.704 μg/ml is greater than the reference value of 0.91 μg/ml， between 0.91～3.644 μg/ml， showed moderate resistance to tebuconazole. The antibacterial effect of Tebuconazole on cotton rot of bergamot melon was better than that of Sunflower Sclerotinia. And with the increase of concentration， the antibacterial effect is also increasing. The inhibitory effect of Tebuconazole on Sunflower Sclerotinia is relatively poor. The above results can provide a reference for the rational selection of chemicals to control Bergamot cotton rot and Sunflower Sclerotinia in agricultural production.

Key words Tebuconazole; Sensitivity determination; Sclerotinia solani; Cotton rot of bergamot melon

向日葵又被稱为向阳花、朝阳花等，属于一年生草本植物，它用途广泛，具有工业价值、药用价值和食用价值[1-2]。佛手瓜也被称为合手瓜、千金瓜、丰收瓜等，属于多年生宿根草质藤本植物，营养价值丰富，深受人们喜爱。随着种植结构的改变，向日葵和佛手瓜这两种作物的种植面积也在不断扩大。但对种植户来说，向日葵菌核病和佛手瓜绵腐病的防护与治理仍是较为棘手的问题。向日葵菌核病和佛手瓜绵腐病会导致产量和质量大幅度下降，给种植户造成较大的损失。随着多年来对药剂的使用，向日葵菌核病和佛手瓜绵腐病已对不少药剂产生了不同程度的抗药性，导致防效逐年下降。为了找到更有效的替代药剂，本文选择新型广谱性药剂戊唑醇对向日葵菌核病菌和佛手瓜绵腐病菌进行室内抑菌试验，为种植户合理选用药剂防治向日葵菌核病和佛手瓜绵腐病提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试药剂和培养基 98%戊唑醇原药由湖北玖丰隆化工有限公司生产，原药用丙酮溶解配制成1×104 μg/ml的母液，放置于4℃冰箱中保存备用。

戊唑醇对佛手瓜绵腐病菌以及向日葵菌核病抑菌效果测定中使用。

1.1.2 试验材料 从宜春市城北郊区种植的佛手瓜和向日葵病株上取得佛手瓜绵腐病菌和向日葵菌核病菌样品，在室内进行单孢分离纯化，得到向日葵菌核病菌单孢菌株和佛手瓜绵腐病菌单孢菌株。以上菌株通过斜面（4℃）和滤纸片法低温（-20℃）保存在江西省宜春学院植物保护实验室。

1.1.3 实验器材 BBS-SDC超净工作台（济南卓隆生物技术有限公司生产）、LX-C50L灭菌器（成都宜恒实验仪器有限公司生产）、SHP-250生化培养箱（江苏新春兰科学仪器有限公司生产）、220V/1 kW电子万用炉（浙江省上虞市通州实验仪器厂生产）、菌饼打孔器（6 mm，北京普博斯生物科技有限公司生产）、BCD-539WT冰箱（青岛海尔股份有限公司生产）、DHG-9023A电热恒温干燥箱（上海印溪仪器仪表有限公司生产）、ME204G电子天平（梅特勒—托利多仪器—上海有限公司生产）、培养皿（直径90 mm，成都典锐实验仪器有限公司生产）、接种环、漏斗、试管、试管架、烧杯、纱布、玻璃棒等为常用实验用品。

1.2 试验方法

1.2.1 含药培养基的制备 将戊唑醇母液稀释成0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml 5个浓度置于45℃的PDA培养基中，制成含药平板。

1.2.2 佛手瓜绵腐病菌和向日葵菌核病菌对戊唑醇敏感性测定 采用菌丝生长速率法，在含药平板上分别对供试佛手瓜绵腐病菌和向日葵菌核病菌进行戊唑醇抗药性测定。供试药剂均设置0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml 5个浓度，以不加药剂平板为空白对照，共6个处理，重复3次，在新鲜向日葵菌核病菌和佛手瓜绵腐病菌菌落边缘分别打取6 mm菌饼，分别接种于含药培养基平板中央，在22℃黑暗环境中培养72 h，测量菌落直径，计算菌丝生长抑制百分率平均值，作抑菌率变化趋势图，并求出毒力回归方程、相关系数以及有效抑制中浓度（EC50值）。

抑制率/%= ×100%

抗性水平依据纪明山等的敏感基线值进行判别，菌株EC50值<0.455 μg/ml为敏感菌株;菌株EC50值处于0.455～0.911 μg/ml为低抗菌株;菌株EC50值处于0.911～3.644μg/ml为中抗菌株;菌株EC50值>3.644 μg/ml为高抗菌株。

2 结果与分析

2.1 戊唑醇对向日葵菌核病和佛手瓜绵腐病抑菌率及抑菌趋势

戊唑醇无论是对向日葵菌核病菌还是佛手瓜绵腐病菌的抑菌效果均随着浓度的增加而增加，浓度越大，抑菌效果越好，在浓度为100 μg/ml时，二者抑菌率达到最高（表1）。从横向来看，不同浓度的戊唑醇对佛手瓜绵腐病菌抑菌效果比对向日葵菌核病菌抑菌效果分别高出23.1%、46.6%、54.02%、50.2%、100.8%。

戊唑醇对佛手绵腐菌具有显著的敏感性，随着浓度升高，抑菌率也不断升高，在浓度还是1 μg/ml时，抑菌率就已达63.87%。戊唑醇对向日葵菌核病菌敏感性则较弱，浓度为10 μg/ml时，抑菌率只有60.22%。随着浓度增长抑菌效果在不断加强，在100 μg/ml浓度时抑菌效果最好。戊唑醇对佛手瓜绵腐菌病菌抑菌效果要优于对向日葵菌核病菌的抑菌效果（图1）。

2.2 不同菌种、不同浓度间抑菌差异性的分析以及比较

为了更好地说明戊唑醇对二种菌的抑菌效果，用方差分析进一步比较（表2）。

对浓度间和菌种间进行F测验方差分析，可知，浓度间F=43.843>F0.05=6.39，F=43.843>F0.01=15.98，即浓度间表现出了极显著的差异，随着浓度增大，抑菌率明显增加;菌种间F=9.149>F0.05=7.71，F=9.149

浓度间多重比较结果如下（表3）：100 μg/ml与1 μg/ml、0.1 μg/ml、0.01 μg/ml之间都存在极显著的差异，与10 μg/ml之间存在显著的差异。10 μg/ml与100 μg/ml、1 μg/ml、0.1 μg/ml、0.01 μg/ml之间也存在极显著的差异。1 μg/ml与100 μg/ml、10 μg/ml、0.01 μg/ml之间存在极显著的差异，与0.1 μg/ml存在显著的差异。0.1 μg/ml和100 μg/ml、10 μg/ml之間存在极显著的差异，与0.01 μg/ml、0.01 μg/ml之间存在显著的差异。0.01 μg/ml和100 μg/ml、10 μg/ml、1 μg/ml之间存在极显著的差异，和0.1 μg/ml之间存在显著的差异。

从结果可以得出，不同浓度之间存在显著的差异，甚至是极显著的差异，浓度越高，抑菌效果越好。说明戊唑醇在抑制这两种病菌生长时会因为浓度改变而使抑菌效果也产生很大的变化。

2.3 向日葵菌核病菌和佛手瓜绵腐病菌对戊唑醇的敏感性分析

使用SPSS软件求出向日葵菌核病菌和佛手瓜绵腐病菌对戊唑醇敏感的相关回归方程、相关系数和EC50（表4）。

向日葵菌核病菌对戊唑醇的敏感性EC50值为2.704 μg/ml，该数值在0.911～3.644 μg/ml之间，因此向日葵菌核病菌对戊唑醇为中抗;佛手瓜绵腐病菌对戊唑醇的敏感性EC50为0.2105 μg/ml，该数值<0.455 μg/ml，因此佛手瓜绵腐病菌对戊唑醇为敏感，可以得知用戊唑醇处理佛手瓜绵腐病菌效果较好。

3 结束语

从对佛手瓜绵腐病菌和向日葵菌核病菌抑菌率数据敏感性分析和方差分析可以看出，戊唑醇对佛手瓜绵腐病菌抑菌效果比向日葵菌核病菌抑菌效果好。并且在5个浓度中，无论是戊唑醇对佛手瓜绵腐病菌还是对向日葵菌核病菌抑菌效果都会随着浓度的增大而增加。因此，在农业生产中，防治佛手瓜绵腐病危害，选用戊唑醇防治效果更好，且要选用适宜的浓度。而对防治向日葵菌核病来说，向日葵菌核病已经对戊唑醇产生了中抗，防治效果不佳，不提倡使用，需要更换药剂。

参考文献

[1] 贺峰.防风的化学成分和药理作用[J].内蒙古中医药，2011，30（10）：43.

[2] Sun Xialin， Zhang Tingwen，Zhao Yan， et al. The protective effect of 5-O-methylvisammioside on LPS-induced depression in mice by inhibiting the over activation of BV-2 microglia through Nf-κB/IκB-α pathway[J].Phytomedicine， 2020（79）： 153348.

责任编辑：黄艳飞