重庆市果桑采摘园桑椹和桑叶的农药残留抽样检测试验

胡文龙 余华献 王万华 郑 琳 赖春艳 李 伟 傅宇航

(重庆市蚕业总站，重庆 400020)

桑椹酸甜爽口，营养丰富，药食同源，具有生津止渴、滋阴补血、明目安神等功效，被医学界誉为“21世纪的最佳保健果品”[1]。在重庆地区，种植果用桑树需施用农药防治桑椹菌核病和果桑椹瘿蚊，同时桑叶是果桑园重要的副产物资源，为提高果桑园综合效益，生产经营者常在桑椹采摘后将桑叶用于养蚕。一直以来，供人们食用的桑椹和用于养蚕的桑叶是否受到残留农药污染，是否具有安全性，受到业界的高度重视[2]。

2019年下半年，重庆市蚕业总站在培训、制定和宣传贯彻《重庆市果桑安全生产技术规范》的基础上，于2020年春季在重庆市32个果桑采摘园中，选择规模较大且分布在不同区(县)的5个果桑园进行桑椹和桑叶的农药残留抽样检测，并用桑叶进行养蚕试验，以了解重庆市果桑生产的安全性，本文报道相关的检测与试验结果。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试桑椹及桑叶样品

选择有较大规模的、分布在重庆市不同区县的5个果桑采摘园作为抽样单位，果桑园种植的果桑品种有红果2号、无核大十、嘉陵30号等。果桑的栽植年限均在3年以上，中干树型养成；果桑园病虫害防治施用农药按照《重庆市果桑安全生产技术规程》执行。每个果桑采摘园随机选取3个点采摘成熟的桑椹和桑叶各500 g，袋装当日送检；同时每一个果桑采摘园再随机采摘桑叶500 g用于养蚕试验。

采样具体情况如表1所示。

1.1.2 供试家蚕品种

供试家蚕品种为两广二号，由重庆市蚕业科学技术研究院提供，以3龄起蚕用于桑叶养蚕毒性试验。

1.1.3 主要试剂

用于检测的试剂包括乙腈(坛墨质检科技股份有限公司，HPLC)，丙酮、氯化钠、石油醚、无水硫酸钠、氢氧化钠[重庆川东化工(集团)有限公司，AR]，甲苯(成都市科隆化学品有限公司，AR)，正己烷(成都市科隆化学品有限公司，HPLC)，甲醇(国药集团化学试剂有限公司，HPLC)，三乙胺(上海安谱实验科技股份有限公司，HPLC,99.5%)，磷酸[重庆川东化工(集团)有限公司，AR]，PSA色谱填料(40～60 μm，NanoChrom)，1-葵烷磺酸钠(上海麦克林生化科技有限公司,离子对试剂，98.0%)，二氯甲烷(成都市科隆化学品有限公司，HPLC)，盐酸[重庆川东化工(集团)有限公司，AR]，磷酸二氢钾(上海麦克林生化科技有限公司，99.95%)，四硼酸钠[重庆川东化工(集团)有限公司，AR]，甲酸[重庆川东化工(集团)有限公司，HPLC]，乙酸铵(上海麦克林生化科技有限公司,98.0%)，异辛烷(成都市科隆化学品有限公司，AR)。

1.1.4 主要仪器设备

气相色谱仪(FPD)PANNA A91(常州磐诺仪器有限公司)，LC 20A液相色谱仪(紫外检测器)LC 20A(日本岛津制作所)，GCMS-QP2020NX气相色谱-质谱联用仪(日本岛津制作所), LCMS-8045液相色谱-串联质谱仪(ESI)(日本岛津制作所),LCMS-8045液相色谱-串联质谱仪(ESI)(日本岛津制作所)。

1.2 检测方法

1.2.1 桑椹样品的农药残留检测

重庆万标检测技术有限公司负责桑椹和桑叶样品农药残留的检测。检测残留农药种类为：吡虫啉、多菌灵、草甘鳞、啶酰菌胺、苯醚甲环唑、腐霉利、甲基硫菌灵。桑椹农药残留检测中，吡虫啉、苯醚甲环唑、草甘鳞、啶酰菌胺的残留指标参照GB2763—2019《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中浆果和其他小型水果标准要求，多菌灵、腐霉利、甲基硫菌灵的残留指标参照GB2763—2019中葡萄的标准要求，详见表2。

表2 桑椹农药残留检测参照标准

1.2.2 桑叶样品的农药残留检测

检测残留农药种类为：敌敌畏、辛硫磷、敌百虫、乐果、吡虫啉、氯氰菊酯。检测标准采用农业行业标准《NY/T 761-2008 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》《 GB/T 5009.102-2003 植物性食品中辛硫磷农药残留量的测定》《GB/T 23379-2009 水果、蔬菜及茶叶中吡虫啉残留的测定 高效液相色谱法》，详见表3。

表3 桑叶样品农药残留检测参照标准

1.3 果桑桑叶毒性试验

在5个有代表性的果桑园采摘桑叶，桑叶样品用冰箱冷藏保存，用于桑叶毒性的养蚕试验。2020年4月16日起开始用桑叶样品饲喂3龄起蚕，每个园区的每一份桑叶样品饲喂10头蚕，直至上蔟结茧。

2 结果与分析

2.1 桑叶中的农药残留检测结果

对5个果桑采摘园的桑叶样本(每个果桑园的桑叶样本数均为3份)进行了敌百虫、敌敌畏、乐果、氯氰菊酯、辛硫磷、吡虫啉6种农药残留的检测，结果均未检出上述农药的残留或含量在检测限值以下。

2.2 桑椹中的农药残检测结果

对5个果桑采摘园的桑椹样本进行了苯醚甲环唑、腐霉利、吡虫啉、多菌灵、甲基硫菌灵、草甘鳞、啶酰菌胺7种农药残留的检测。由于目前没有桑椹中农药残留限量的标准，故参考GB2763—2019《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中浆果类水果的要求，该标准规定了吡虫啉、草甘鳞、啶酰菌胺、多菌灵在浆果和其他小型水果中的最大残留量分别为5.0 mg/kg、0.1 mg/kg、10.0 mg/kg、1.0 mg/kg，苯醚甲环唑、腐霉利、甲基硫菌灵在与桑椹同属浆果类的葡萄中最大残留量分别为0.5 mg/kg、5.0 mg/kg、3.0 mg/kg。送检桑椹样品在受检的7种农药残留指标中，对吡虫啉、草甘鳞、啶酰菌胺3种农药做了单项判定，全部低于参照的标准要求；其余4种农药苯醚甲环唑、腐霉利、多菌灵、甲基硫菌灵的残留量实测数据均低于参照的标准要求(表4)。

2.3 桑叶样品养蚕的毒性测试结果

2020年4月16日，从重庆市蚕业科学研究院取3龄起蚕供试。5个果桑采摘园的每份桑叶样品分别饲喂10头蚕。饲养2 d后，有1个采摘园桑叶饲养的家蚕出现轻微吐水现象，疑是农药中毒。饲养3～4 d后，10头蚕死亡。6 d后用同样的一份桑叶样品饲喂另外3头蚕，还是出现农药中毒现象。

其余4个果桑园区的桑叶样品一直饲喂家蚕到5龄第4天，均未出现农药中毒现象。由于后期桑叶不够，在重庆市蚕业科学研究院采叶继续喂养，直至上蔟为止。用4个果桑园区的桑叶样品饲喂家蚕都能正常上蔟结茧，且蚕茧茧型正常、茧层适中，后期均能正常化蛹。

表4 送检桑椹样本中4种农药的残留量实测值

3 小 结

防治果桑园区为害桑果的桑椹菌核病和桑椹瘿蚊，需要从桑椹食用和桑叶养蚕的安全性出发，严格选择低毒性、残毒期短的农药，有效避免中毒事件发生。果桑生产中用农药防治病虫害的操作也要严格按照不同农药使用的技术规程执行,这样才既能保证供食用的桑果产品完全符合国家食品安全标准，也能充分利用果用桑的桑叶安全养蚕。

本次养蚕试验有个别园区的桑叶导致家蚕中毒，初步判定因抽取桑椹样时一同抽取桑叶样,离果桑最后一次用药时间仅1个月,未达到农药安全间隔期，出现养蚕中毒现象。后期还有待进一步做调查验证，找出真实的原因。