ET患者外周血NLR与促炎症细胞因子水平的相关性分析*

李娅南，高丽丽，张迎红，左荣霞，闻 艳，宋建新，撒亚莲△

(云南省第一人民医院/昆明理工大学附属医院：1.临床医学研究中心；2.国家临床重点专科血液科；3.病理科；4.检验科,昆明 650032)

原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)属于经典Ph染色体阴性(BCR-ABL-)的骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm，MPN)，其主要特点是外周血中血小板计数明显升高，骨髓中巨核细胞体积增大，数量增多，集簇存在。ET起病隐匿，进展缓慢，病因和发病机制尚不明了。慢性炎症和免疫系统失调被认为是MPN发生、发展的关键要素[1]。血常规参数中性粒细胞-淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)是全身性的炎症-免疫指标，NLR升高提示参与炎症的中性粒细胞较多，炎性反应明显增强，淋巴细胞减少则提示免疫防御和免疫清除作用减弱[2]。NLR在判断初诊、初治ET患者发生血栓事件、冠心病严重程度和心血管并发症中有一定的预测价值[3]，是判断乳腺癌、结肠癌与弥漫性大B细胞淋巴瘤等恶性肿瘤病情进展与预后的指标之一[4-5]。然而，NLR与ET患者促炎症细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-8表达量的关系尚不十分清楚。

细胞因子是一类重要的炎症介质，其常用检测方法耗时、费用高、干扰因素多。本文探讨ET患者外周血NLR与促炎症细胞因子水平的相关性，为NLR能否用于评价ET患者体内炎性微环境提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2017年6月至2020年6月于云南省第一人民医院确诊的Ph染色体阴性(BCR-ABL-)的56例ET患者为试验组，诊断依据为2016年WHO制定的ET诊断标准；同期56例健康体检人员为对照组。本研究获得本院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

收集研究对象的一般资料包括性别、年龄。采集研究对象空腹静脉血各5 mL分别置于EDTA-K2抗凝管及干燥管(武汉致远医疗科技有限公司)，采用Sysmex 1000型全自动血液分析仪(希森美康医用电子上海股份有限公司)及配套试剂对研究对象的EDTA-K2抗凝外周血样本进行全血细胞参数的测定；将已采集研究对象外周血的干燥管置于L500离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)，室温，1 700× g离心15 min，收集上层血清待检；依照IL-1β、IL-6和IL-8细胞因子检测试剂盒(北京旷博生物技术有限公司)说明书使用Agilent NovoCyte 流式细胞仪(安捷伦科技中国有限公司)检测血清中IL-1β、IL-6和IL-8水平。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 临床基本特征

56例ET患者平均年龄(52.50±16.10)岁，男20例，平均年龄(56.20±14.40)岁；女36例，平均年龄(51.30±19.40)岁。 56例健康体检者平均年龄(53.00±15.70)岁，男20例，平均年龄(56.20±14.20)岁；女36例，平均年龄(51.30±16.30)岁。两组年龄、性别比较差异无统计学意义(χ2=3.022,P>0.05)。ET组患者血小板计数987(483～4 076)×109/L，白细胞计数10.35(1.82～40.88)×109/L，血红蛋白计数144.00(78～197)g/L。56例ET患者病程2(1～96)个月；其中有54例ET患者进行JAK2 V617F基因位点检测，28例携带突变位点，阳性率为51.85%；52例患者进行基因CALR 检测，12例为阳性；病情危险度分级：低危7例，中危14例，高危35例。

2.2 两组NLR、IL-1β、IL-6和IL-8水平比较

ET组NLR[4.37(0.33～13.66)]明显高于对照组[1.79(0.92～3.13)]，差异有统计学意义(P<0.05)。ET组IL-1β、IL-6和IL-8水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组外周血NLR、IL-1β、IL-6和IL-8水平比较

2.3 相关性分析

ET组NLR与 IL-1β、IL-6和IL-8水平呈正相关(r=0.280 5、0.372 7、0.257 3，P<0.05)，IL-6与IL-1β、IL-8水平呈正相关(r=0.236 8、0.338 5，P<0.05)，IL-1β与IL-8无相关性(P>0.05)。

3 讨 论

ET常在中年后发病，起病隐匿，病程长，并发血栓或出血、骨髓纤维化及转化为急性白血病是患者致死、致残的主要原因。本研究纳入56例ET患者平均年龄为(52.50±16.10)岁，其中女性占64.29%，年龄(51.30±19.40)岁；男性占35.71%，年龄为(56.20±14.40)岁，与文献报道的ET好发于中老年人，以女性发病率高于男性，且发病年龄早于男性的结果相一致。ET患者JAK2 V617F基因携带率为51.85%，CALR基因阳性率为23.08%，与文献报道基本一致[6-7]。

ET的病因和发病机制尚未完全阐明，有研究认为细胞因子网络失衡在ET发生、发展过程中扮演着重要角色[8]。HASSELBALCH等[9]提出MPN是一个经典的慢性炎症促进肿瘤发生、发展的疾病模型。通过检测炎症指标有助于疾病诊疗，协助评估病情变化与预后。而作为炎症指标之一的细胞因子在各种疾病中也扮演着不同角色。蔡晓盛等[10]报道不同级别的COPD患者的IL-6水平明显高于对照组(P<0.05)。陈晓露等[11]观察到50例胃癌患者血清IL-1β、IL-6水平高于对照组。有研究显示，MPN患者外周血IL-1β、IL-6、IL-8等多种细胞因子表达失调，ET组中IL-6、IL-8等细胞因子均升高较为明显[12-14]。

血常规检查参数NLR是判断机体系统性炎症的指标之一，已有研究表明，NLR与恶性肿瘤的复发、转移、疗效与预后密切相关。MUSHTAQ等[15]报道复发/难治性急性髓系白血病患者NLR≥3中位总生存期为3.4个月，而NLR<3的患者中位总生存期为9.2个月。BELTRAN等[16]报道NLR≥4为T细胞淋巴瘤不良预后因素。周典等[3]报道，NLR与ET患者初诊时血栓形成无相关性，但是与诊断明确后未来血栓事件进展密切相关。NLR越高，患者形成新发血栓或者原有血栓进一步发展可能性越大，预后不佳。本研究显示，ET患者外周血NLR、IL-1β、IL-6和IL-8水平升高，NLR与IL-1β、IL-6、IL-8水平呈正相关，提示NLR有助于判断ET患者体内的促炎症细胞因子表达水平，可用于评估系统性炎性内环境。

本研究存在一定的局限性：(1)纳入研究的样本量较少，代表性不够强，需要进一步加大样本量开展回顾性和(或)前瞻性研究予以验证；(2)有待分析NLR与ET病程、转归、预后的相关性，明确NLR在ET中的临床意义，评估其能否转化应用到临床，指导ET的诊疗实践。

综上所述，ET患者外周血NLR、IL-1β、IL-6和IL-8水平上调，而且NLR与IL-1β、IL-6、IL-8有一定的相关性，NLR可能作为评估ET患者体内炎性微环境的一个简易指标。