重庆市某区区级核酸检测实验室生物安全现状调查研究

刘梦颖，姚 婧，李廷荣

(重庆市沙坪坝区疾病预防控制中心，重庆 400038)

目前，我国新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疫情防控工作常态化，为落实国家和重庆市关于加快二级及以上医疗机构实验室新型冠状病毒核酸检测能力建设相关文件精神，重庆市沙坪坝区新建、改建了4家区级二级医疗机构核酸检测实验室。面对重庆市沙坪坝区新增的核酸检测实验室，根据近年来卫生监督部门对辖区病原微生物实验室的生物安全监督检查结果，以及新冠肺炎疫情初期对辖区已开展新型冠状病毒核酸检测实验室的检查结果，意识到可能存在一定的生物安全隐患，对其开展生物安全现状调查研究是非常有必要的。

1 资料与方法

1.1调查对象 选取重庆市沙坪坝区4个区级二级医疗机构和1家区疾病预防控制中心核酸检测实验室作为研究对象。

1.2调查方法 通过问卷调查和现场检查相结合的方式全面分析重庆市沙坪坝区4家区级二级医疗机构和1家区疾病预防控制中心核酸检测实验室生物安全管理情况。参考《病原微生物实验室生物安全管理条例》[1]、《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》[2]、《实验室生物安全通用要求》(GB 19489-2008)[3]、《病原微生物实验室生物安全通用准则》(WS 233-2017)[4]、《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》[5]及相关文献资料，自行设计调查问卷和现场检查表，经专家审核、预调查验证后定稿，并组织调查员进行集中培训学习，统一判定标准、检查手段、结果记录、数据录入等。调查问卷内容包括人员基本情况、实验室生物安全相关法律法规、操作技术规范、个人防护、样本管理及运输、消毒灭菌与废弃物处置、意外事故处置等，共25道题。现场检查表内容包括实验室资质、实验室组织管理、实验室布局及工作流程、实验室生物安全设施设备配置、实验室人员管理、实验室样本管理及运输、实验室消毒灭菌与废弃物处置7个方面。调查员将调查问卷二维码通过手机端发放给辖区5家区级核酸检测实验室负责人，由实验室负责人组织人员填写问卷。在区卫生监督部门的协助下调查员到核酸检测实验室现场开展现场检查，填写现场检查表最后由实验室负责人签字确认。

1.3统计学处理 由一名调查员录入数据，另一名调查员对录入的数据进行复核。采用Excel2007软件进行数据处理及分析，计数资料以例数或百分率进行描述性统计分析。

2 结 果

2.1问卷调查结果 在规定时间内收到67份有效的调查问卷。调查对象中检测人员和采样人员占85.1%(57/67)，管理人员占14.9%(10/67)。正确率最高为回答对23道题，正确率最低为回答对11道题。人员对个人防护、样本管理及运输、废弃物处置等知识掌握较好，对实验室生物安全相关法律法规、操作技术规范、消毒灭菌、意外事故处置等知识熟悉不够。调查问卷完成情况见表1。

表1 调查问卷完成情况(n=67)

2.2现场检查结果

2.2.1实验室资质 所调查的5家实验室均已取得二级生物安全实验室备案凭证，其中3家实验室只开展新型冠状病毒核酸检测，另外2家实验室除了开展新型冠状病毒核酸检测外，还开展了其他病原菌的核酸检测工作。

2.2.2实验室组织管理 5家实验室均建立了生物安全相关管理制度,制定了生物安全意外事件应急预案。1家实验室无生物安全意外事件处置记录，1家实验室未定期开展生物安全意外事件应急演练，其余4家实验室虽然开展了生物安全应急演练，但演练以桌面演练为主，实战演练较少。5家实验室有专、兼职工作人员定期开展实验室生物安全检查，并对发现的问题进行了记录和整改情况的跟踪验证。3家实验室未开展新型冠状病毒核酸检测实验活动风险评估，1家实验室虽开展了风险评估，但内容不完整。

2.2.3实验室布局及工作流程 3家实验室分为3区，2家实验室分为4区，均符合基因扩增检验实验室布局要求。其中2家实验室为负压实验室。5家实验室核酸检测工作流程均符合要求，穿脱防护服的地点均合理。

2.2.4实验室生物安全设施设备配置 5家实验室均设置门禁系统，在实验区域内安装有洗眼器、生物安全柜、高压灭菌器、紫外灯等设备，2家实验室样本处理区有样本病毒灭活的恒温水浴箱，4家实验室样本处理区有空气消毒设备及器材。除了2家实验室无洗眼器使用维护记录、1家实验室洗眼器使用维护记录不完整外，5家实验室对以上其他设施设备的使用维护均建立了记录，内容均较完整。5家实验室的高压灭菌器、生物安全柜均完成定期检定或校准并合格，同时均对高压灭菌器定期进行了灭菌效果监测，对紫外灯紫外强度进行了定期监测。5家实验室生物安全设施设备配置情况见表2。

表2 5家实验室生物安全设施设备配置情况[n(%)，n=5]

2.2.5实验室人员管理 5家实验室人员均经过生物安全培训，专门针对穿脱防护服进行了培训、考核、演练。实验室为人员提供了较充足的个人防护用品。对非实验室人员进入实验室区域进行了控制，但有1家实验室无进出登记记录，1家实验室登记记录不完整。

2.2.6实验室样本管理及运输 5家实验室新型冠状病毒样本的管理均符合《新型冠状病毒生物安全指南(第二版)》相关要求，新型冠状病毒样本的医院外运输符合要求，均办理了转运证。

2.2.7实验室消毒灭菌及废弃物处理 5家实验室消毒剂及喷洒器材等均满足核酸实验室工作需要，均编制了消毒记录，但有2家实验室消毒记录不完整。5家实验室新型冠状病毒相关废弃物处理符合《新型冠状病毒生物安全指南(第二版)》相关要求。

3 讨 论

截至2020年底，重庆市沙坪坝区共有5家区级核酸检测实验室，其中4家为区级二级医疗机构实验室，1家为疾病预防控制中心实验室。4家区级二级医疗机构核酸检测实验室均为新建或改建的实验室。本研究对5家核酸检测实验室通过问卷调查和现场检查相结合的方式，从意识层面和实施层面全面分析核酸检测实验室的生物安全管理情况。

通过调查发现，各医疗卫生机构和疾控机构均按照上级要求加强了对实验室核酸检测能力建设，新建或改建的实验室进一步优化实验室布局和流程，2家实验室还具备负压条件。实验室加强了硬件设施的投入，配备了生物安全柜、高压蒸汽灭菌器、消毒设备等，配备了充足的个人防护用品和消毒用品及器材。但在实验室软件方面存在一些问题：(1)实验室专业技术人员和管理人员对生物安全相关法律法规、操作技术规范、消毒灭菌和意外事件的处置等方面的知识较欠缺，尤其是对新型冠状病毒检测相关的生物安全知识掌握得不够牢固。在现场检查人员培训相关资料时也发现，各实验室组织的培训多以理论培训为主，操作演练涉及很少，有部分实验室未开展培训效果的评价。(2)部分实验室未定期开展生物安全意外事件应急演练或无生物安全意外事件处置记录；而且人员对意外事件处置的相关知识错误率较高。(3)部分实验室风险评估工作落实不到位，人员的风险评估意识薄弱。(4)部分实验室工作记录不完善。

为进一步提高辖区核酸检测实验室的生物安全管理水平，确保顺利开展新冠肺炎疫情常态化防控工作，提出以下改进对策：(1)加强学习培训，提高人员生物安全意识。新冠肺炎疫情期间，国家为指导各地做好新冠肺炎疫情防控工作，不断修订新型冠状病毒实验室相关的技术规范和要求，作为实验室工作人员和管理人员应及时收集最新的政策文件，加强自我学习；另外，各实验室应加强人员培训，培训内容必须包括法律法规，做到知法、懂法、守法。培训形式应多样化，一定要做好培训效果评价，要根据培训效果不断优化培训方式，仅依靠理论培训可能无法达到良好的效果，尤其是在仪器设备的正确操作、防护用品的正确选择及使用、意外事件的处置等方面，只有反复、多次的操作演练才能牢固掌握知识要点并正确运用到实际工作中[6]。(2)动态管理生物安全意外事件应急预案，加强应急演练。应急预案不是一成不变的，各实验室应根据人员、实验活动范围、检测对象等变化及时修订应急预案。开展应急演练的目的在于进一步加深实验室工作人员对意外事件处置的认识，进一步改进完善应急预案，使其更加符合实际情况，在真正遇到意外事件时能做到临危不乱、处变不惊。(3)重视风险评估，形成常态化工作内容。对新型冠状病毒核酸检测开展实验室生物安全风险评估是新冠肺炎疫情防控环节中不可或缺的重要部分[7]。在开展新型冠状病毒相关检测前必须依据新型冠状病毒特征、实验活动范围和内容、设施设备、人员能力、废弃物处置、安全管理措施等方面进行综合分析评估，识别生物安全危险因素，并采取相应的风险控制措施，以确保实验室人员和环境的安全。(4)加强实验室生物安全自查和监督检查。检查只是手段，其目的是督促实验室生物安全管理工作落实到位。医疗机构和疾控机构应有独立于实验室的专门部门和人员定期组织开展实验室生物安全检查；同时，卫生监督管理部门应加强日常监督检查，尤其在新冠肺炎疫情防控阶段，要加大检查频率、处罚力度，确保无实验室生物安全事故发生。

当前，《中华人民共和国生物安全法》[8]已正式实施，标志着我国将生物安全的重要性提高到了前所未有的新高度。作为实验室管理者要充分意识到实验室安全工作的重要性，加强实验室生物安全管理，严守法律责任底线；作为实验室工作人员要增强生物安全意识，再好的个人防护也替代不了良好的个人工作行为习惯；作为卫生监督管理部门要依法开展执法检查和专项检查，使生物安全监管工作常态化、制度化、标准化。