免疫抗体检测技术在预防重大畜禽疫病中的问题和建议

王 磊，刘海霞，王艳晓

(1.天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心，天津 300402；2.天津瑞普生物技术股份有限公司，天津 300402)

0 引言

畜禽疫病是制约我国养殖业健康发展的因素之一。近年来，在我国流行的禽流感、新城疫、口蹄疫等疫病屡见报道，给畜牧业和养殖户带来了很大的损失。因此预防重大畜禽疫病的大规模暴发成为我国动物防疫工作的重中之重。

免疫抗体检测技术是依据畜禽疫病病原体为抗原的特异性免疫识别的抗体反应为基础的检测技术。目前，在国内重大畜禽疫病预防中，AIAD提供了较好的技术支撑，发挥了不可替代的作用。本文总结AIAD在预防重大畜禽疫病中的重要作用，以期为更好地应用该项技术，促进畜牧业持续健康发展提供有益建议。

1 动物免疫抗体检测技术对预防重大畜禽疫病的作用

1.1 对畜禽疫病的诊断确认

由于流行疫病的突变性和不可控性，需要采用科学的手段进行检测，才能对疫病进行确诊。利用动物免疫抗体检测技术可以对畜禽是否患有疫病进行生物学检测，对采集的畜禽血清、分泌物等样本，采用血清学检测法、酶联免疫吸附(ELISA)检测法、免疫层析检测法等进行测定分析，可以检测出采集样本中是否含有疫病病原体，而且可以定量分析出样本中所含有的抗体数量，从而确定患病畜禽感染的严重程度。如对某养鸡场死亡的50日龄肉鸡解剖后，排除细菌感染，取鸡胚囊素液进行鸡新城疫病毒(NDV)抗体检测。结果显示，30只鸡抗体水平异常偏高，结合临床表现，即可诊断为鸡新城疫强毒感染。

1.2 对畜禽接种疫苗效果评估

对于高风险、高致病性的畜禽疫病，可采用接种疫苗进行预防。我国畜牧业监管部门对于常见多发疫病都有免疫密度和免疫抗体合格率的具体要求。免疫抗体检测技术可用于检验畜禽接种疫苗的免疫程度，通过多克隆抗体检测技术、单克隆抗体检测技术等研究免疫效果，为疫苗接种效果提供评价依据。通过免疫抗体检测技术对某一地区的禽流感和家畜口蹄疫抗体水平进行检测，可以准确直观地反映该地区的畜禽重大疫病疫苗的免疫情况，对接种疫苗的效果进行评价[2]。运用免疫抗体检测技术对动物免疫抗体进行监测，可为免疫质量的评估提供重要依据，从而推动重大动物疫病防疫工作的防控效果。在大面积集中免疫后，通过对动物免疫抗体的监测，可以评估该群体的免疫合格率。在监测过程中，加强对动物群体抗体动态变化的监控，同时还可以评估抗体的持续时间，为疫苗的接种周期提供科学依据。在监测过程中，可采用随机抽样和重点抽样相结合的方式进行检测，以保证检测结果的代表性。

1.3 疫苗生产和疫苗质量检测的基础

在重大畜禽动物疫病防控中，最重要的方法是通过接种动物疫苗进行预防，做好动物疫病的预防工作比做好动物疫病的诊治工作具有更重要的意义。做好畜禽重大疫病预防工作与畜禽疫苗的质量有着直接的关系。畜禽疫苗的研究和生产主要通过免疫抗体检测技术实现。有研究报道，猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)中应用了血清抗体ELISA检测和各种类型的RT-PCR检测方法，以及由此开发出的活疫苗、灭活苗、亚单位疫苗、DNA疫苗以及载体疫苗等不同类型的单苗以及联苗。在实际接种过程中，接种疫苗的质量受很多因素的影响，主要包括接种时间、接种剂量及接种程序等，对于不同动物机体的免疫应答能力不一样，接种效果也不一样。所以，当接种疫苗后，还应对疫苗的接种质量进行监测，这同样离不开抗体检测技术的应用。

1.4 为重大畜禽疫病的流行提供预警监测

预警机制是指事件发生前预先发出警示的机制。建立重大畜禽疫病流行预警机制对于预防疫病的流行十分重要。科学合理地建立预警机制离不开对疫病检测技术的成熟运用。应当完善重大畜禽疫病监测体系，充分掌握动物免疫抗体检测技术，使其在监测疫病过程中发挥准确高效的警示作用，从而为建立重大畜禽疫病预警系统提供科学依据。

动物疫病一般在春季和秋季容易集中发生，因此应在春季和秋季进行集中监测，并对养殖场、屠宰场及交易市场等，做好采样监测工作，对免疫效果进行准确评估。集中监测就是做好重大动物疫病的集中免疫工作。定点监测就是根据当地的动物疫病流行特点，在区域内设立固定的监测点，并进行持续监测。应急监测则是针对突发的动物疫病及时组织监测，并评估动物的免疫保护水平和疫病范围，从而组织疫病的防治工作[6]。

2 存在的主要问题

2.1 动物免疫抗体检测技术需要进一步完善

目前免疫抗体检测技术，如胶体金免疫层析法、单克隆抗体技术等由于敏感性好、特异性强、可重复使用、结果便于长期保存等优点，已经被广泛应用于动物疫病的预防、疫苗的研究和疫情的诊断等实际工作中[7]。但是免疫抗体检测方法中用到的抗原或抗体制备、筛选过程比较复杂，要求纯度比较高，疫病的病原体变异快，特异性位点不易确定，同时存在单克隆抗体细胞株不稳定，酶结合物的特异性、阳性结果判定标准的确定等一系列问题。因此，在应用过程中还需要进一步探索其发展规律，扬长避短。

2.2 动物免疫抗体检测技术研究力量需提升

近年来，伴随经济不断发展，科学技术水平逐渐提升，我国兽医检验用动物免疫抗体检测技术一直在不断进步与发展。但是，上述免疫检测技术力量多集中在较发达的城市，对于畜禽养殖一线及其附近边远城市，兽医实验室设备落后，诊断疫情不及时，对重大动物疫病防控工作影响较大。

2.3 研究人员专业水平不高

动物免疫抗体检测技术对兽医实验室人员的专业要求很高。而兽医研究人员的培养一直以来都是一件非常困难的事情，在进行日常免疫预防、免疫监测等工作的技术人员往往不具备高精尖的技术水平，导致疫病确诊率及监测数据采集可能不准确。目前，兽医实验室人员专业素养不高的问题，短时间内还没有办法得到根治，这不仅是兽医专业技术研究发展的瓶颈，更给重大动物疫病的防控带来很大的难度。

3 建议及对策

3.1 积极运用新的AIAD解决现有问题

目前，面对现有AIAD存在的问题，研究人员已利用其规律发现了新的AIAD，如免疫传感器、蛋白质芯片技术等，随着新技术的不断涌现，可以逐步突破原有技术的瓶颈。在分子生物学技术高速发展下，还可以应用RT-PCR、基因芯片、RNA指纹图谱等技术，对突变病原基因或突变位点进行精准定位，从而解决抗原单一且易突变等一系列问题，可极大提高我国畜禽疫病预防工作的成效。

3.2 建立完善的动物疫病监测网络

动物免疫抗体监测是预防重大动物疫病的重要工作，要提升免疫抗体监测的质量和效果，就要建立完善的动物疫病监测网络。动物疫病监测网络布局要根据监测目标制订明确的管理规范应以区域监控为主，覆盖全部监测区域。。在动物疫病监测过程中，要做好集中监测、常规监测、定点监测和应急监测。

3.3 加强检测实验室建设，提高人才队伍专业技术水平

加强动物抗体监测就要进一步完善养殖一线地区实验室的建设，重视专业人才队伍的建设，不断提升免疫监测水平。在一些一线地区及边远城市，须扩大经济投入，因地制宜建立兽医实验室，配备相关仪器设备，建设专业人才队伍，建立完善的检测程序和数据录入系统，满足养殖业一线的检测需求。应更新老旧实验室及老旧设备，以提高检测的精准性，同时注重相关人员的培训，不断提升实验室检验人员的业务水平和检验水平。

4 结语

动物免疫抗体技术在预防和控制畜禽动物疫病发生过程中发挥着十分重要的作用，也是预防动物疫情发生最关键的工作。在应用动物免疫抗体技术预防畜禽重大疫病过程中，必须将动物免疫接种抗体监测工作落到实处，保证免疫时间和免疫程序科学、有效，并选择高质量的疫苗，按照标准进行免疫接种，提高免疫质量，最大程度控制和减少畜禽重大动物疫病的发生。