全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值

朱国胜，邱丽影，林立鹏，方小龙

（深圳市福田区妇幼保健院，广东 深圳 518048）

0 引言

临床中，贫血主要指血液红细胞总量显著低于正常水平，属于一种常见病症。由于诱发贫血的原因较多且发病机制较为复杂，所以贫血类型往往存在较大的差异[1]。对贫血患者实施治疗时，多需要结合患者的临床症状和体征，并与贫血的类型特点相结合，继而拟定针对性的治疗方案。与此同时，不同类型的贫血在实施血常规检查时，尤其是地中海贫血和缺铁性贫血在进行检查时，往往采用血常规检测的难度较大，所以积极探寻贫血患者的诊断和鉴别措施具有重要意义[2]。地中海贫血在婴儿中较为常见，亦被叫做海洋性贫血，属于溶血性贫血、遗传性贫血疾病，对患者生命健康有极大威胁[3]。临床治疗地中海贫血患者中，并无特效药治疗，为降低疾病发病率，主要通过筛查育龄夫妇方式，判断其有无携带情况[4]。而在诊断方面，血红蛋白疾病的筛查可选择全自动血红蛋白电泳方式，这种诊断筛查近年来被广泛应用，可为临床诊疗工作提供有效参考[5]。本次研究将采用回顾性分析方法，对医院血液检查者8950 例利用全自动血红蛋白电泳诊断结果进行总结。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年1 月至2019 年12 月深圳市福田区妇幼保健院就诊的产前检查夫妇8950 例，其中男4096 例，女4854 例。所有研究对象同时进行血常规检测与Hb 电泳检测，如血常规检查结果红细胞容积降低，血红蛋白成分检测有异常，则进行地中海贫血基因检测。

1.2 方法

用EDTA-K2 抗凝管采集静脉血2 管，每管2mL，用于血常规及血红蛋白电泳检测。

血常规检测：采用迈瑞BC-6800 全自动血液细胞分析仪测定。

血红蛋白电泳：采用全自动血红蛋白电泳仪（生产厂家为Sebia 公司）及配套试剂。将标本离心，去血浆，上电泳仪，分析血红蛋白组分。正常成人男女参考值为2.5%≤HbA2 ≤3.5%，HbF ≤2.0%，且无异常血红蛋白条带。如HbA2<2.5%，则怀疑为α-地中海贫血；如HbA2>3.5%或HbF>2.0%且出现异常条带，则为疑似β-地中海贫血[6]。对于血红蛋白电泳筛查疑似地中海贫血样本则进行地贫基因检测，测试主要通过α-地中海贫血基因检测试剂盒（缺失型）以及β-地中海贫血检测试剂盒实现。

2 结果

2.1 全自动血红蛋白电泳筛查结果

8950 例样本中，血红蛋白电泳检验呈阳性结果的共942 例，占10.53%，疑似α-地中海贫血767 例（8.57%），疑似β-地中海贫血175 例（1.96%）。

2.2 基因诊断结果

对767例疑似α-地中海贫血患者和175例疑似β-地中海贫血患者进行基因诊断，确诊α-地中海贫血患者388 例（4.34%），Hb 电泳与基因检测的符合率为50.59%；确诊β-地中海贫血175 例（1.96%），Hb电泳与基因检测的符合率为100%。见表1。

3 讨论

地中海贫血是一组遗传性血液病，由一个或多个血红蛋白链合成缺陷引起。α-地贫是由α 珠蛋白链合成减少或缺乏引起的，β-地贫是由β 珠蛋白链合成减少或缺乏引起的[7]。球蛋白链的不平衡引起溶血，损害红细胞生成。地中海贫血的沉默携带者和具有地中海贫血特征的人是无症状的，不需要治疗。中间型-地中海贫血，或血红蛋白H 病，会引起溶血性贫血；伴有巴特血红蛋白的大地中海贫血通常会导致致命的胎儿水肿[8]。主要的地中海贫血在婴儿期会引起溶血性贫血、生长不良和骨骼异常，受影响的儿童需要终身定期输血。中间型地中海贫血病比重度地中海贫血病轻，可能需要间歇输血[9]。输血依赖的患者会出现铁超载，需要进行螯合治疗以清除多余的铁。骨髓移植可以治愈一些患有严重地中海贫血的儿童。地中海贫血患者应接受孕前遗传咨询，具有α-地中海贫血特征的人应考虑进行绒毛膜绒毛取样，以诊断婴儿是否患有血红蛋白巴特氏综合征，这增加了毒血症和产后出血的风险。具有地中海贫血特征的人有正常的预期寿命[10]，但重度地中海贫血患者通常在30 岁前死于铁超载引起的心脏并发症。为此，为了减少地中海贫血的影响，提高患者生存率，需要采用一种有效的方式进行疾病筛查，及时、准确地发现地中海贫血疾病病例，并进行准确的病情预测，制定有效治疗方案。

临床中，血液珠蛋白产生出现障碍而导致的贫血性疾病被称之为地中海贫血，其中多为遗传学贫血。换言之，地中海贫血是由于基因缺陷而导致的贫血性疾病，具有复杂性和多样性等特点，所以导致合成血红蛋白过程中珠蛋白肽链也存在着一定的差异性，且患者发病时均无显著临床症状[11]。具体而言，地中海贫血是临床常见的常染色体隐性遗传病，发病原因归结于珠蛋白基因突变、基因缺失等，造成珠蛋白肽链一种或几种合成减少或不能合成，使形成血红蛋白的α 链和非α 链比例失衡，从而引发溶血性贫血，危及患者身心健康，且严重影响生活质量[12]。我国广西、广东、海南等省区为高发地区，广东省户籍人群地贫基因平均携带率为16.8%，其中13.31%为α-地贫突变，4.53%为β-地贫突变[4]。由于地贫的高发生率及治疗困难，故把握婚检、孕检、产检的地贫筛查与诊断三道关是控制地贫的有效措施。目前，地中海贫血基因检测是诊断该病的金标准，由于基因检测的成本明显高于其他检测方法，不适用于常规检查，也无法对人群进行普查，因此，常用方便、耗时短、成本低的血常规与血红蛋白电泳检测进行地中海贫血筛查[13]。全自动血清蛋白电泳(automatic serum albumen electrophoresis),蛋白因分子大小和表面电荷的差别而以不同速度在直流电场泳动分离称蛋白电泳,而结果主要是根据其各类蛋白组分的高低变化，提示内容主要包括：低γGlb 血症的可能、低蛋白血症的可能、肝功能障碍、肝脏疾病、高γGlb血症的可能、急性炎症、慢性炎症、营养不良和M 蛋白等项[14-15]。使用全自动血清蛋白电泳定量分析并检测地中海贫血可以从蛋白质的方面进行检测和分型，因为蛋白质属于良性电解质，具有等电点，因此，蛋白质在ph 值高于等电点时会带上负电，ph 值低于等电点时则会带上正电，具有差异的蛋白质存在不一样的等电点，在电泳作用下会在等电点处聚集，使得蛋白质被分离出不同的种类。如此可在电泳作用后出现具有差异性的条带，在进行完条带脱色后就可从颜色深浅上去进行蛋白质含量的判断。

通过血红蛋白电泳能够定量分析血红蛋白成分包括HbF、HbA 与Hb A2,还可筛查出异常血红蛋白，根据Hb A2 含量与是否出现异常血红蛋白，可对地中海贫血进行初步分类，为地中海贫血的基因诊断与遗传咨询提供基础[16]。

本文通过回顾8950 例样本血红蛋白电泳筛查结果显示,在我院育龄人群中地中海贫血初筛阳性率为10.53%，血红蛋白电泳检验呈阳性结果的共942例，疑似α-地中海贫血767 例（8.57%），疑似β-地中海贫血175 例（1.96%），与陈忠领[17]关于深圳育龄人群地中海贫血初筛阳性率相近。本研究的基因诊断结果显示，α-地贫的初筛符合率只有50.6%，β-地贫的初筛符合率达到100%。这是由于β-地中海贫血患者中，β 珠蛋白基因缺陷，β 链合成减少，而δ 珠蛋白基因表达产物相对增多，与α 珠蛋白链结合形成Hb A2(α2δ2)，Hb A2 含量增高明显。α-地贫的初筛符合率低，可能是因为缺铁使Hb A2 含量降低，或本研究只检测缺失型α-地贫，未检测突变型α-地贫。值得注意的是，在研究过程中，发现有部分样本血常规MCV、MCH 指标下降，但血红蛋白电泳筛查中Hb A2 正常，这说明血红蛋白电泳对α-地贫的筛查存在漏诊的可能，王玉霞[18]的研究探讨血红蛋白A2 在静止型和标准型α-地中海贫血筛查中的价值，也表明MCV 和MCH 两项指标筛查阳性的可疑地贫患者中静止型和标准型α-地贫阳性率为39.96%，其中Hb A2 正常者达83.05%。血红蛋白电泳对α-地贫，尤其是静止型和标准型α-地贫的筛查存在假阴性或假阳性。

综上所述，地中海贫血筛查中，全自动血红蛋白电泳结合血常规检测成本低、操作简单，可对地中海贫血进行初步分类，为地中海贫血的诊断提供了重要依据，同时也可为婚前、产前优生优育指导的开展奠定基础；但其对α-地贫存在一定漏诊，必要时应进行基因检测。