毛皮动物疫苗研发现状及重要性分析

廉士珍 胡博 张海玲 白雪

（中国农业科学院特产研究所 130112）

基于目前我国动物疫病防控工作经验显示，免疫是做好动物疫病防控工作的关键。近几年，毛皮动物引起的疫病主要有犬瘟热及病毒性肠炎等。但在我国部分地区观察发现，毛皮动物养殖业中，免疫失败会导致疫病防控力度下降，使养殖者寻求上门帮助。因此，分析毛皮动物尤其是水貂、狐、貉的新疫苗的研发现状，对主要流行疾病预防有积极作用。新疫苗的研究对毛皮动物养殖不可或缺。

1 水貂新疫苗的研发现状

水貂又称美洲水鼬（Neovison vison)是一种中型的半水生鼬，喜夜间活动。山东省是中国最大的毛皮产业，每年在中国生产超过50%的毛皮动物[1]。2011年，山东省饲养水貂数超过3000万只，年增长率为20%～40%[2]。

1.1 水貂新病毒PRV及疫苗的研发

伪狂犬病也称为Aujeszky病，是由伪狂犬病病毒（PRV)引起的，伪狂犬病病毒是疱疹病毒科中的水痘病毒属疱疹病毒。PRV在家养和野生动物中引起疾病。除高阶灵长类外，PRV可以感染广泛的家畜和野生动物。非猪动物中PRV感染的标志是感染区域瘙痒，通常致命的PRV感染的水貂，表现出神经系统症状，并在几天内死亡且无瘙痒。

1.2 轮状病毒疫苗及疫苗的研发

轮状病毒疫苗生物研究已取得了突破性的进展。4价恒河猴-人类重组配轮状病毒疫苗提供了与人类轮状病毒相对应的4种共同的血清型，在一定程度上能预防48%～68%的轮状病毒腹泻，与此同时，还可以预防61%～100%严重并发症的发生。在相对比较发达的国家，此类疫苗已被有效用于减少腹泻性疾病，另外在发展中国家，儿童轮状病毒腹泻的死亡率极高，由此，采用4价恒河猴-人类重组配轮状病毒疫苗意义较大，但依旧存在以下几个问题，首先在发展中国家，受到感染的患儿年龄偏小，病毒量比较大，若营养不良，一定程度上会影响轮状病毒疫苗的效果，另外4价疫苗临床试验中，对4～6周龄儿童主要采用3组剂量，因为中和抗体反应和疾病预防效果之间的关系不明，一般较难判断少量的疫苗是否可能达到同样的效果，对于低剂量的疫苗需要进一步系统化。

1.3 细菌疫苗及研发

细菌感染性疾病属于一类严重危害人类健康的疾病，临床用于治疗细菌感染性疾病的药物主要为抗菌药物，但由于抗菌药物的滥用，引起细菌耐药性，尤其是多重耐药菌迅速增加，使其不能有效控制感染。细菌疫苗能提高易感人群对病原菌的抵抗力。20世纪后期，分子生物学、免疫学及微生物学等相关科学发展迅猛。近几年，细菌疫苗有了较大的进展，出现多种现代新型细菌疫苗。如肺炎链球菌，肺炎链球菌能够引起支气管炎、肺炎及中耳炎等。在7价多糖蛋白结合疫苗的基础上，惠氏公司研发的13价结合疫苗可以抵御1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F13种血清型的肺炎链球菌感染，但其费用较高。如结核分枝杆菌，结核分枝杆菌属于一种顽固的病原体，耐药菌株的出现在一定程度上增加了结核病的控制难度。卡介苗属于目前唯一的结核病疫苗，但此类疫苗仅预防原发性结核病，研发新型的疫苗势在必行。目前，细菌疫苗的广泛使用有利于人类的身体健康。目前，多种新型细菌疫苗即将上市，在一定程度上为控制多种病原菌引起的感染性疾病提供保障。

1.4 疫苗重要性分析

尽管PRV感染了几种动物，但据报道，水貂自然感染PRV的情况很少。2014年9月，中国山东省的一个农场在一周内有3522只貉皮死亡，其中100%（3522/3522)病死率和87.2%（3522/4028)死亡率。水貂的临床症状是肺炎突然发作，如综合征、腹泻和嗜睡。近年来，水貂PRV感染已成为中国养水貂的难题。Bartha-K61疫苗已在世界范围内用于根除PRV，Bartha-K61疫苗接种提供了针对经典PRVSC株感染的完全保护。但自2011年下半年以来，在中国各地已分离出包括HeN1，JS-2012和TJ株在内的几种高毒力PRV株，这些PRV株引起的疾病以神经系统症状和猪的高死亡率为特征。在保护性检测中，Bartha-K61疫苗仅对HeN1，JS-2012和TJ菌株的感染提供了部分保护，这表明Bartha-K61疫苗在中国并未针对新的PRV菌株感染提供有效的保护。从水貂中分离出的PRV株与Bartha-K61疫苗耐药PRV株在系统发育上密切相关，这表明疫苗耐药PRV已在中国广泛传播，并可能引起多种动物感染。

据报道，狂犬病病毒疫苗比FeLV疫苗或联合FRCPV疫苗引起更强的淋巴细胞反应。在以往研究中，到第7天，淋巴细胞在大多数佐剂狂犬病疫苗位点都很突出。到第14天，RabdomunⓇ和Imrab3Ⓡ疫苗位点的淋巴细胞数量适中，与猫中的Purevax疫苗位点相似（水貂或3只水貂中没有淋巴结样结构的疫苗)，反之则低在FeLV疫苗接种量。接种疫苗后14d，在Imrab3Ⓡ，Fel-O-VaxLv-KⓇ及合并的病毒性鼻气管炎-杯状病毒，全白细胞减少症疫苗接种的位点，吸入的嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的相对数量没有差异。但从Fel-O-VaxⓇ和Imrab3Ⓡ疫苗接种位点吸取的淋巴细胞比从联合疫苗位点吸取的淋巴细胞要多。狂犬病疫苗接种点的吸出物中巨噬细胞的相对数量也更大，有人提出。淋巴细胞的表型（T辅助细胞1和T辅助细胞2)可能在某些猫的肿瘤形成易感性中起作用。淋巴细胞可能已被佐剂激活的巨噬细胞刺激。狂犬病抗原也可能在激活淋巴细胞中发挥作用。狂犬病疫苗产生的淋巴细胞比白血病疫苗产生的淋巴细胞更多。但这一发现与以下建议不符，即狂犬病疫苗的致癌作用比白血病疫苗的致癌可能性低。

2 狐新疫苗的研发现状

狐狸是民间对这一类动物的通称，种类繁多，分北极狐、赤狐、银黑狐、沙狐等，狐狸是哺乳纲食肉目犬科狐属下的动物。

我国狐狸养殖技术已经比较成熟，目前狐数目到达500万只，成为一个新兴产业[3]。由于我国狐狸养殖技术起步较晚，发展速度快，在发展道路上会遇到一些始料未及的问题。其中频繁引种导致流行病的扩大问题是主要需要着手解决的问题之一。这其中就关于狐新疫苗的研发。犬瘟热、细小病毒性肠炎、脑炎是最主要的流行疾病，疫苗的研发也在为杜绝这3大疾病而努力。

3 貉新疫苗的研发现状

10多年来，猫的疫苗相关肉瘤（VAS)被认为是疫苗接种的潜在结果。估计≥0.01%的猫接种疫苗在一种被杀死的佐剂疫苗部位发展出了肿瘤。一些研究集中在成熟肿瘤的组织学和行为上，这种肿瘤在接种疫苗后3个月到3年就发展了。VAS通常被诊断为纤维肉瘤，恶性纤维组织细胞瘤或其他间充质肿瘤[4]。迄今为止，只有一项研究对组织部位的早期病变进行了组织学检查。疫苗后病变的早期检查对了解其早期病情可能很有价值。

目前尚不知道貉的疫苗接种后即刻反应的强度如何与易感动物的肿瘤发生相关。局部组织反应增强可能表明继发于细胞因子和生长因子过度加工的恶性转化即将发生。在一只貉中，在带有神经氨酸酶的金丝雀狂犬病附近和非铝佐剂的白血病病毒疫苗位点附近观察到具有纤维组织囊和脉管系统的淋巴生发中心。

过敏性异物肉芽肿具有许多上皮样细胞，有或没有巨细胞或干酪样坏死。轻度吞噬作用或无吞噬作用明显。到第14天，接受检查的含有铝基佐剂的疫苗，这3个物种具有大量的上皮样巨噬细胞和其他带有大量吞噬性无定形物质的佐剂[5]。罕见的巨细胞在几个区域内可见，但不一致。铝显然在这些小食肉动物中引起混合反应，具有过敏性和非过敏性异物反应。在这3个物种中观察到对铝佐剂的局部反应类似于Lever和Schaumberg-Lever对铝肉瘤的描述：“淋巴滤泡，胞质充足的巨噬细胞，一些巨细胞及大面积的嗜酸性坏死。”嗜酸性坏死在这项研究中不一致；仅在少数情况下可以观察到。在较早研究中，在狂犬病疫苗接种后2周至2个月检查的猫科动物病变中始终可见嗜酸性粒细胞坏死。嗜酸性粒细胞坏死的发展可能需要超过21d的时间。更强的反应可能意味着可降解疫苗成分的快速清除和疫苗诱导的局部刺激，该研究表明，新疫苗对该病毒有良好的抑制作用。

目前我国主要采用貂细小病毒性肠炎灭活疫苗，虽然此疫苗存在一定免疫交叉保护作用，但也存在一些缺点，如交叉保护抗体不高，免疫原性比较差等[6]。有研究筛选出貂细小病毒LN10-1，并对其免疫原性进行研究，结果观察发现，LN10-1可能属于一种新病毒，可以作为针对貂细小病毒性肠炎灭活疫苗的候选株，对于有效控制貂细小病毒性肠炎的发生具有极其重要的意义。

4 总结

毛皮动物主要是水貂、狐、貉3种动物，在养殖过程中可能有多种疾病，如水貂和貉能受狂犬病毒和肉瘤病毒等病毒的威胁，狐容易感染犬瘟热、细小病毒性肠炎、脑炎3大流行疾病。预防这些疾病的办法是新疫苗的研究。水貂对狂犬病毒的预防已有新的相关疫苗，貉对肉瘤病毒的感染来源是猫，在猫感染的基础上已通过组织切片技术研究出新的疫苗，狐的3大流行疾病的预防也已经有相应的措施。

随着环境改变，新发病不断出现，同时老病不断变异，严重影响毛皮动物养殖业，另外，每年多种疑难病症所引起的死亡率最高可达20%，这是目前毛皮动物养殖的一大障碍。为了积极预防相关新病的出现，积极研发新型疫苗迫在眉睫。虽然研究的疫苗很多，但要上市销售还需要很长的时间，应加快疫苗申报步伐。