自动化及免疫学技术在微生物检测中的应用进展

吴柳萍

（罗城仫佬族自治县中医医院，广西 罗城，546400）

感染性疾病是指由真菌、细菌、病毒等致病微生物引起的相关疾病，该类疾病多为炎症性疾病，对呼吸、消化等多系统均产生影响。常有肺炎、泌尿系统、肠炎等，患者多伴有体温升高、局部炎症等全身症状，面对该类疾病需提高警惕，及时给予合理有效的诊断及治疗，谨防疾病恶化给患者生命健康造成严重伤害[1-2]、降低疾病传播风险。传统微生物检验技术被广泛应用于该类疾病的诊疗中，但有研究[3-4]表明该技术存在检测效率低、准确率不足等弊端。随着现代医学技术不断进步，微生物快速检验技术得到更多应用，该技术可有效针对人体各个系统的感染性疾病，弥补传统检验技术的不足。本文通过分析几种常见的微生物快速检测技术应用进展，现报道如下：

1.微生物自动化鉴定技术

传统微生物鉴定技术需经过漫长细菌培养阶段，这样的方式会显著降低检测效率，且该操作易出现失误[5]。苏章庭，周露的研究[6]对比了传统技术与微生物自动化鉴定技术，结果发现微生物自动化鉴定技术检测时间低于前者，且在节省人力资源、提升检测精准度方面均有优势。全自动微生物专家检测系统：这一专家系统是美国微生物学会1999年首次提出，该系统是指根据临床微生物种类等，同时结合临床发表、出版的数据信息，为检测结果提供解释说明[7-8]。该技术大幅度提升了检测速度，在几小时内即可输出检测结果。该技术为临床传染性疾病提供诊断依据与治疗建议。全自动微生物培养检测系统：该系统采用不可逆CO2颜色改变技术，可快速检测出培养皿内是否有微生物生长[9]。其优势在于技术人员不需要做复杂操作，仅需要将培养皿置于检测仪器中，检测结束后，仪器会自动分开阳性与阴性结果[10]，显著提升了检测效率及精准度。

2.免疫学试验技术

临床对于抗原及抗体检测时均要对患者行静脉抽血提取血清，故存在于体外的抗原及抗体反应亦被称为血清学试验。该试验极大简化了微生物病原检测的步骤，提高了检测效率，是临床微生物检测的主要方法之一[11]。

2.1 凝集反应在温度、酸碱度、电解质合适的条件细菌等抗原与抗体可发生特异性结合，并能出现肉眼可观察到的凝集反应，即反应后出现的凝集块[12]。该反应较适用于肺炎链球菌、志贺菌、沙门菌等菌落的分型与鉴定。有研究[13]指出该检测手段具有操作便捷、检测效率高、准确度高、特异性强等优势。

2.2 沉淀反应该反应是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下，按适当比例所形成的可见沉淀物现象。主要包括环状、琼脂扩散法、絮状三种类型。其中环状类型常用于炭疽、肺炎链球菌的诊断、鉴定。絮状常用于定量测定毒素、类毒素等[14]。

2.3 酶联免疫技术该技术于1974 法国研究者首次提出，近些年数据[15]发现，免疫酶技术在临床使用频率正不断提高，使用范围极广，该技术主要通过酶的特殊作用将所检物质转化，其主要利用了抗原抗体的特殊反应。同时提取微生物代谢出来的酶，并将其置于特殊的显色底板上并观察显色反应，最后对培养微生物进行着色。该技术主要应用于传染性流感及肺炎等，其具有灵敏度较高、特异性强等优势，同时其可从定性及定量两个方向展开检测。

2.4 荧光免疫技术荧光免疫技术是指将抗原抗体特异与荧光技术结合，检测过程中将荧光素作为特殊标记物，检测主要通过显微镜下对荧光素的观察来确定。这种技术具有灵敏度高、操作简便等特点。另外有研究[16]提出在该技术上改造出来的快速检验纸片法在特殊微生物检测方面效果良好，灵敏度较高。例如，金黄色葡萄菌，大肠菌等。

2.5 补体结合反应该反应原理是补体能被任何抗原抗体复合物激活，并且其能将红细胞和溶血素的复合物结合。多用于检测立克次体、螺旋体患者体内抗体及病毒分型中。

3.微生物快速检测注意事项

近些年研究[17-19]表明微生物快速检查过程中有诸多注意事项，其是影响最终检测结果的重要因素，故在检测过程中需提高重视程度。根据研究得出以下几个结论，培养基的灭菌及使用：配制是需仔细查看是否在有效期内并保证其是密封保存，培养基在使用前需经过严格消毒处理，严格管理培养基保存温度；检测环境的维持：大环境方面需保证检测室门窗关闭，避免空气流动对检测结果产生影响。小环境方面及时对检查设备进行清理及灭菌，并在检测前提前开启紫外灯；样本采集及检测：保证采样器的无菌性，采集人员在采集样本前要充分做到手部及身体暴露部位灭菌处理。

微生物培养环节需严格按照《微生物检验规范》进行，定时观察培养基情况，若出现异常应及时处理，防止其对后期检测结果产生影响。

4.小结

随着近些年传染病的爆发，微生物检验技术越来越受到人们重视，同时在传染病大规模传播的情况下，各种微生物快速检测的效率及精准度成了临床需面对的巨大挑战。临床微生物检验技术需充分结合数字化、自动化等高新技术，综合考虑疾病因素及患者情况，为患者选用最有效率的检测方法。临床目前的微生物快速检验技术已基本成熟，但尚未形成统一规范化、统一性检测方案，同时随着医疗技术进步，各种新型微生物检验技术开始应用于临床，故后续研究仍需在提升检测效率、增强检测精准度等方面作出深入探讨。