肉类中瘦肉精快速检测方法研究

果布次仁，卓 玛

（1.贡觉县哈加乡农牧综合服务中心，西藏 昌都 854200；2.贡觉县农贸市场快检室，西藏 昌都 854200）

瘦肉精是一类动物用药的统称，能够促进瘦肉生长［1］，抑制动物脂肪生长的物质。瘦肉精是一种人工合成的兴奋剂，添加于饲料中饲喂牲畜能显著提高瘦肉率，促进肌肉生长，人食用含有瘦肉精残留的肉，可引起血压升高、血管扩张、心跳加快，呼吸加重、产生恶心、呕吐、头晕、乏力和肌肉颤抖甚至不能站立等症状［2］，给人类的精神、健康及正常生活造成严重危害。笔者采用胶体金免疫层析技术和固相萃取技术对西藏贡觉县阿旺绵羊肉、牛肉、猪肉是否存在瘦肉精情况进行试验检测并对结果判定方法进行研究［3］，整个过程分为样品前处理、萃取和检测3 个部分，一次样品前处理可以用于克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇共3 种药物的检测［4］。本技术适用于猪肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉、牛肉等组织的现场或实验室快速检测。单个项目检测时间约为20～25 min［5-6］。

1 材料与方法

1.1 试验材料

牛肉、羊肉、猪肉（采集点：贡觉县农贸市场）

1.2 仪器及主要试剂

1.2.1 仪器设备

食品安全快速检测仪YR600plus（深圳市易瑞生物技术股份有限公司、中国）、废液收集缸、测试液收集架、2 mL离心管、离心机（4000 r/min）、50 mL离心管、30 mL 注射器、检测试纸条、电子秤、水果刀。

1.2.2 主要试剂

T-AG 试剂A、乙酸乙酯试剂、T-AG 试剂C、红色微孔试剂。

1.3 样品分析

1.3.1 样品前处理

组织样品去皮、均质，称取（8±0.2）g 均质好的组织样品至50 mL 离心管中；加入5 mLT-AG 试剂A，将离心管上下大力摇晃60 s 至组织分散；加入10 mL 乙酸乙酯，涡动或摇晃约60 s ，室温，4000 r/min 离心2 min；从包装内取出所需的固相萃取柱和30 mL 的注射器，去掉螺口注射器内塞并将注射器下端插入固相萃取柱；将50 mL 离心管内的上清液倒入注射器内，注射器内塞插入注射器内，注射器内的液体通过固相萃取柱推入废液收集缸，直至注射器和固相萃取注中无液体；液体全部流出后，拔出注射器，将固相萃取柱放到2 mL 的离心管上；往固相萃取柱中加入800 μL 的试剂C；用新的注射器将固相萃取柱中的液体推入2 mL 的离心管中，离心管中的液体为待测液。

1.3.2 样品检测

取出相应数量的红色微孔试剂，吸取150 μL上述待测液于红色试剂微孔中，上下抽取6～10 次直至微孔试剂混合均匀；40 ℃开始第一步温育反应，并计时3 min；取出试纸筒中的试纸条，将试纸条插入上述红色微孔中，40 ℃开始第二步反应，并计时3 min；取出试纸条，轻轻刮去试纸条下端的样品垫，并于5 min 内进行结果判读，超过5 min 后无效。用试剂盒检测肉类中克伦特罗、莱克多巴胺等瘦肉精试纸条灰度限值见表1。

表1 肉类中试纸条检测瘦肉精灰度值限值

1.4 结果判定

1.4.1 目测

产品检测结果在阴性情况下T 线灰度≥C 线灰度，即未检出瘦肉精；在阳性的情况下T 线灰度

1.4.2 系统读数

轻轻刮去试纸条下端的样品垫后，将试纸条放入检测孔，通过系统自动对T线和C线的灰度进行读数后，得出T线和C线的灰度值，按照最终T/C值≥1.0判定为阴性，最终T/C 值<1.0 判定为阳性，C 线不显色或T线和C线均不显色时检测结果判定为无效。

2 结果与分析

根据表2 系统读数结果，阿旺绵羊肉中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的试纸条灰度值中T>C且最终T/C 值>1.0，很容易判定快速检测结果为阴性。

表2 阿旺绵羊肉检测系统读数结果

根据表3、表4 系统读数结果，克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺的T 线灰度值大于C 线灰度值，判定结果为阴性。

表3 贡觉县本地牛肉检测结果

表4 猪肉检测结果

根据表2、表3、表4检测结果可知，对肉类样品检测瘦肉精时，为确保检测结果判定的准确率，试纸条应放入食品快速检测系统检测孔，对试纸条的灰度自动读数。

3 讨论

采用试纸条检测肉类样品中的瘦肉精时，可以根据目测试纸条中的T 线和C 线判断结果，但是检测结果中T 线和C 线的灰度值大体相同时，目测无法准确判断结果，所以在检测牛肉、羊肉、猪肉等禽畜肉中盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等瘦肉精时，第二步温育结束后试纸条应放入食品安全检测仪中对T 线和C 线灰度进行读数，确保检测结果判断准确。