江西部分地区种鸭坦布苏病毒病及鸭瘟免疫状况调查与分析

李海琴，方绍培，谭美芳，曾艳兵，黄江南，季华员，张帆帆，谭 佳，陈小连，康昭风，杨 群，韦启鹏

（江西省农业科学院 畜牧兽医研究所，江西 南昌 330200）

【研究意义】鸭坦布苏病毒病（Duck Tembusu virus disease，DTMUVD）是由新型黄病毒——鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus，DTMUV）引起的一种以蛋鸭产蛋骤降、雏鸭出现头颈震颤、四肢麻痹等神经症状为主要特征的急性传染病[1-2]。该病自2010年在我国东南地区陆续发生，并迅速蔓延至我国各个主要养鸭省市，给养鸭业造成了严重的经济损失[3-6]。疫苗免疫接种是预防和控制该病的主要措施之一，目前市场上已有预防鸭坦布苏病毒病的商品化疫苗。鸭瘟（Duck plague，DP）又称鸭病毒性肠炎（Duck viral enteritis，DVE），是由疱疹病毒科的鸭瘟病毒（Duck plague virus，DPV）引起的雁形目水禽类的一种急性、热性、败血性传染病[7]。目前我国采用的鸭瘟鸡胚化弱毒活疫苗保护雏鸭免受强毒攻击[8]。随着养殖业的发展，鸭病尤其是病毒性疾病的流行日趋严重，特别是鸭坦布苏病毒病和鸭瘟对养鸭业的打击是毁灭性的[9-12]，迫切需要对江西地区规模化种鸭场鸭坦布苏病毒病和鸭瘟进行免疫状况调查。【前人研究基础】酶联免疫吸附试验（ELISA）是血清学中最常用的检测方法之一，已有研究应用ELISA 方法进行鸭坦布苏病毒和鸭瘟血清流行病学调查和疫苗免疫效果评价[13-17]。【本研究切入点】江西地区的种鸭养殖发展迅速，但江西地区种鸭场鸭坦布苏病毒病和鸭瘟免疫状况尚不清楚，应用ELISA 方法对江西规模化种鸭场鸭坦布苏病毒病和鸭瘟免疫状况调查是有效途径。【拟解决的关键问题】本研究选定江西省部分规模化种鸭场，调查了鸭坦布苏病毒病和鸭瘟的抗体阳性率，并对不同季度的鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体阳性率进行了分析，旨在掌握江西地区种鸭场鸭坦布苏病毒病和鸭瘟的免疫状况，为种鸭场有效防控鸭坦布苏病毒病和鸭瘟提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 鸭血清 2020年4月—2021年3月，在江西省南昌、吉安、赣州、九江等地的规模化种鸭场，选取日龄为130～160日龄表观健康种鸭，共抽取1 233份血清样品。

1.1.2 试验试剂 鸭坦布苏病毒抗体（DTMUV-Ab）酶联免疫吸附测定试剂盒和鸭瘟抗体（DPV-Ab）酶联免疫吸附测定试剂盒，购自上海臻科生物科技有限公司；配液所用双蒸水，江西省农业科学院畜牧兽医研究所兽医实验室制备。

1.1.3 仪器 全自动酶标仪（Thermo Multiskan Mk3），洗板机（Thermo Wellwash 4 MK2）；微量移液器（Eppendorf）。

1.2 试验方法

1.2.1 ELISA 检测 将待检血清样品编号。检测步骤分别按照鸭坦布苏酶联免疫吸附测定试剂盒和鸭瘟酶联免疫吸附测定试剂盒方法操作。

1.2.2 ELISA 检测结果判定标准 当阳性对照孔OD450值≥1.00；阴性对照孔OD450值平均值≤0.15时，试验结果成立。当样品孔OD450值>阴性对照孔平均值+0.15，样品判为阳性，否则判为阴性。

1.2.3 群体免疫合格率 群体免疫抗体合格率达到70%判定为群体合格[15]。

2 结果

2.1 流行病学调查

对所采集样本的种鸭场开展流行病学调查，饲养品种主要为花边鸭及大麻鸭，雏鸭多引自四川、广西等地。被调查种鸭场主要免疫鸭病毒性肝炎弱毒疫苗、重组禽流感灭活疫苗（H5+H7）、鸭坦布苏病毒病灭活疫苗、鸭瘟活疫苗、禽霍乱-大肠杆菌二联蜂胶灭活苗。场内防疫设施设备较为落后，鸭场内药品保存及使用存在隐患。

2.2 不同场区鸭坦布苏病毒病抗体水平调查

本次调查了江西地区11 个种鸭场，检测样品1 233 份。由表1 可知，调查的鸭场中鸭坦布苏病毒病抗体水平普遍不高，总阳性率仅为61.1%，低于70%的国家合格率标准。只有E、H、I 3 个场的抗体阳性率超过70%，其中E 场最高，为80.4%；其次为I 场和H 场，合格率分别为73.4%和71.2%。其余场区均低于国家合格率标准。

表1 不同场区鸭坦布苏病毒病抗体检测结果Tab.1 The detection results of DTMUVD antibody in different fields

2.3 不同场区鸭瘟抗体水平调查

由表2 可知，本研究调查的11 个种鸭场的鸭瘟抗体水平总阳性率为80.5%，达到了国家的合格率标准。其中I 场最高，为90.8%。11 个场中9 个场鸭瘟抗体阳性率达到了国家合格率标准，场阳性率为81.8%，B场和F场仅为65.2%和63.6%，未达到国家合格率标准。

表2 不同场区鸭瘟抗体检测结果Tab.2 The detection results of DP antibody in different fields

2.4 不同季度鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体水平调查

不同季度规模化种鸭场鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体阳性率结果（表3）显示，4 个季度的鸭坦布苏病毒病抗体水平全年均较低，只有第四季度（70.6%）超过70%的国家合格率标准，第一季度鸭坦布苏病毒病抗体阳性率最低为54.0%。第二、三、四季度的鸭瘟抗体阳性率超过70%国家合格率标准，第四季度的鸭瘟抗体阳性率最高为89.3%；第一季度的鸭瘟抗体阳性率低于国家合格率标准。

表3 不同季度鸭坦布苏病毒病与鸭瘟抗体检测结果Tab.3 The detection results of DTMUVD、DP antibody in different quarters

3 结论与讨论

本研究通过对江西省不同地区的11 个规模化种鸭场的1 233 份血清样品进行鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体检测，鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体总阳性率分别为61.1%和80.5%。因为被调查鸭场均免疫鸭坦布苏病毒病疫苗和鸭瘟疫苗，使用鸭坦布苏病毒和鸭瘟酶联免疫吸附测定试剂盒能够检测鸭场的鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体水平，从而评价其免疫水平状态。

鸭坦布苏病毒病是危害我国种蛋鸭养殖业的主要疫病之一，黄瑜等[19]对蛋鸭主要病毒性感染检测与分析结果显示江西未开产蛋鸭坦布苏病毒感染阳性率51.1%，该病给江西省养鸭业造成了严重的经济损失。张英[20-21]等在感染坦布苏病毒种鸭的种蛋、鸭胚、雏鸭中检测到坦布苏病毒，证实鸭坦布苏病毒可在种鸭中经种蛋垂直传播。鸭坦布苏病毒既可以通过感染的母鸭发生垂直传播，也可感染公鸭，导致公鸭睾丸出血、萎缩，精液质量下降，通过感染坦布苏病毒的公鸭发生垂直传播[20,22]。本研究对江西不同地区的11个免疫种鸭场进行鸭坦布苏病毒病的血清抗体检测结果显示，鸭坦布苏病毒病抗体阳性率较低；11个鸭场仅有3个场达到国家合格率标准，其中两个达到合格率场的阳性率仅为71.2%和73.4%。鸭坦布苏病毒病抗体水平的季度性调查结果显示，4个季度的鸭坦布苏病毒病抗体阳性率只有第四季度达到国家合格率标准，其他3个季度均低于70%。

鸭瘟自1957年在我国被发现以来已有60多年，尽管各地陆续出现报道，但各分离毒株的抗原性高度保守，疫苗的使用对该病的控制取得了显著效果[18]。然而，近年来，临床上病例报道日渐增多[12]，2019 年11月，江西免疫过鸭瘟疫苗的某大型种鸭场出现160日龄麻鸭疑似鸭瘟感染病例，每天死亡200多羽，病死率20%，损失惨重。研究还发现鸭瘟病毒感染鸭后，可侵害鸭的多种组织器官，为全身各组织感染和广泛的组织嗜性创造条件[23]。鸭瘟的地方性流行已不容忽视，迫切需要对鸭瘟抗体定期监测。本研究调查的11 个种鸭场的鸭瘟总阳性率为80.5%，场阳性率为81.8%；不同场区之间的阳性率差异较大。不同场区间的阳性率差异可能与饲养管理、疫苗使用、生物安全措施等多种因素有关。鸭瘟抗体水平的季度性调查结果显示，鸭瘟抗体阳性率在第二、三、四季度达到国家合格率标准，第四季度鸭瘟抗体阳性率最高为89.3%；不同季度抗体合格率的差异结果表明气候是影响种鸭疫苗免疫的重要因素之一，气温等环境因素造成应激可能影响疫苗免疫效果。

江西部分地区种鸭坦布苏病毒病及鸭瘟免疫状况调查结果表明，种鸭疫苗防疫状况不容乐观。鸭坦布苏病毒病和鸭瘟等对种鸭场危害极大，一旦发病，会给养殖场带来巨大的经济损失。种鸭场必须加强种鸭坦布苏病毒病和鸭瘟防疫，定期监测疫苗免疫抗体水平，根据监测情况和疫病流行情况制定科学的免疫程序，加强对防疫人员的专业培训，严格规范疫苗接种操作程序，确保免疫剂量和效果。