江西九岭山保护区毒蘑菇一新记录种——日本红菇

穆新华，涂 磊，吴小冬，赵 宽*

（1．江西科技师范大学生命科学学院，江西南昌 330013；2．江西九岭山国家级自然保护区管理局，江西宜春 330600； 3．靖安县中医院，江西宜春 330600）

红菇属是常见的外生菌根菌[1-4]，全球已知约有800个物种[5]，我国已报道160余种[6-7]，江西省已报道35种[8]。菌根菌在森林生态系统中，对于水分、碳素以及其他养分转化和能量循环起着重要作用[9]。另外，红菇属真菌多数可食用，如正红菇（R.vinosa）、美味红菇（R.delica）在全国各地被广泛食用，味道鲜美，富含蛋白质、脂肪酸、维生素等营养成分[10]。该属也不乏毒菇，如亚稀褶红菇（R.subnigricans）,中毒事件时有发生[11]。同时，部分红菇属真菌，如血红菇（R.sanguinea）、毒红菇（R.emetica）则具有一定的药用价值，具有抗肿瘤、抗病毒和促进免疫等功效[12]。

本文发现并描述了江西九岭山国家级自然保护区（下称九岭山保护区）红菇属真菌一新记录种——日本红菇（Russula japonica），该物种为毒蘑菇，2020年被当地群众误食导致胃肠炎型中毒，患者在靖安县中医院就诊后，因病情轻微自愈。

1 材料与方法

1.1 供试标本

标本于2020年10月采集于九岭山保护区，拍摄新鲜标本生境照片，采样时尽量保证其完整性。详细记录标本形态特征及生境后，将其放置于烘箱中，60 ℃烘干，经干燥后保存于中国科学院昆明植物研究所隐花植物标本馆，同时保存与之配套的硅胶干燥材料，用于分子实验。

1.2 研究方法

1.2.1 形态学鉴定

标本的外部形态特征根据野外发现的子实体观察记录，包括采集地点、生境特点、采集时间以及子实体各部位结构的特征等。

标本的内部显微特征依据对烘干标本的徒手切片观察，使用5%的氢氧化钾溶液为载浮剂，在显微镜下放大100倍（油镜）下观察得到。分别随机选取30个孢子和担子进行测量，记录其形状、大小和颜色等。

1.2.2 分子系统学研究

采用生工生物工程（上海）股份有限公司生产的Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒对硅胶干燥的分子材料进行DNA提取。在查阅相关的文献资料和进行预实验的基础上[13-15]，本研究选用ITS4/ITS5引物对内转录间隔区（ITS）序列进行扩增。扩增产物经凝胶电泳检测后送往生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序。将测得的ITS序列采用BioEdit v7.0.9打开检查序列峰形图，核对碱基是否读取正确，同时采用NCBI的在线软件BLAST对所得序列与GenBank数据库中的序列进行比对，以确保所得序列与研究对象相互对应，并按照BLAST比对结果选取重建系统发育树的基因序列。采用MEGA v7.0以最大似然法（Maximum Likelihood）和邻接法（Neighbor joining）进行系统发育分析，经1 000次重复获得统计学支持[16-18]。

2 结果与分析

2.1 形态特征

日本红菇（Russula japonica），子实体中到大型，菌盖6～14 cm，初半球形，后呈漏斗状，边缘无条纹；乳白色，表面光滑，潮湿时略黏，常伴有淡黄色至褐色的污渍。菌褶近离生，密集，幼嫩时乳白色，成熟后淡赭色，有小菌褶。菌柄圆柱形，中生，长4～6 cm，粗1.5～2 cm，由上至下渐细，基部不膨大，内部白色，海绵质。孢子长5.5～7.5 μm， 宽5.0～7.0 μm，淡黄色，近球状，表面具刺，淀粉质。担子长30～45 μm，宽7.0～11 μm，长棒状，具4小梗。模式产地为日本，夏秋季散生或群生于阔叶林地上，分布于日本[19]、中国[20]。研究标本于2020年10月10日采于江西宜春、九岭山保护区海拔300 m处。

图1 日本红菇子实体生境照片

2.2 分子系统发育分析

采自江西的标本ITS序列通过GenBank数据库中BLAST序列比对，与Russula japonica序列同源性达97%。运用MEGA 7.0软件，以最大似然法（Maximum Likelihood）和邻接法（Neighbor Joining）构建系统发育树，结果表明，两种方法建立的系统发育树型非常接近，图2为采用最大似然法建立的系统发育树。系统发育分析结果显示，采自江西的标本与Russula japonica聚在同一分枝上，支持率为99%。

图2 基于ITS序列构建的红菇属系统发育树

3 结论

结合形态特征比对和分子系统发育分析的结果，最终确定本研究采集的标本（HKAS 105290）为日本红菇(Russula japonica)，可导致肠胃型中毒。其与可食用的白乳菇(Lactarius piperatus)形态特征十分相似而容易被误食，但后者伤后泌出白色乳液、味辣[21-25]。建议在当地开展较广泛的科普宣传教育，提升群众食品安全认知，同时避免蘑菇中毒事件的发生。