铁皮石斛含片制备工艺研究

张小琴，吴中宝，杜小琴，夏 炎

(重庆市药物种植研究所，重庆 408435)

铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛的干燥茎[1]，具有滋阴润肺、益胃生津、健脑明目、补脏之虚劳等功效[2-3]，含有多种活性物质，包括多糖、石斛碱、倍半萜类化合物和挥发性成分。现代药理研究表明，铁皮石斛具有广泛的药理作用，主要集中在增加免疫力、抗衰老、防治癌症、治疗糖尿病和萎缩性肺炎等方面，对烟酒过度、劳累过度、夜生活过度、用眼用脑过度、声带嘶哑等也有促进恢复的作用[4-5]，其中多糖类成分是铁皮石斛的主要活性成分，药理作用与其所含多糖有着密切关联。目前铁皮石斛多以鲜食为主，关于以石斛超微粉为原料制成含片的研究鲜有报道。随着人工铁皮石斛产量的不断增加，其深加工资源转化途径显得非常有限。鉴于此，以具有低能量、抗龋齿、改善肠胃功能的甜味剂木糖醇为载体，加入铁皮石斛超微粉，制作一款具有营养保健作用的新型含片，可丰富铁皮石斛产品系列，并为铁皮石斛的深加工提供一种新的方法。

1 仪器与材料

DXFT-12型精研混炼机(山东鼎信超微粉碎技术有限公司)；HD-018鼓风循环烘箱(东莞市海达仪器有限公司)；20目筛子(浙江上虞市肖金筛具厂)；AB145S型电子天平(上海海康电子仪器厂)；TDP-6T型单冲压片机(清远丰浩机械设备有限公司)；J6紫外-可见分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司)。

铁皮石斛超微粉购于云南人体鑫能源有限公司，经鉴定均符合《中国药典》(2015年版)一部各药材项下有关规定，将药材于65℃烘干至恒重后超微粉碎，保存于干燥器皿中；木糖醇、β-环状糊精(山东福田药业有限公司)；乙醇、滑石粉、硬脂酸镁、薄荷脑均为市售食品级(重庆市科达实验设备成套有限公司)。

2 方法与结果

2.1 含片的制备工艺

称取处方量的铁皮石斛超微粉、木糖醇和β-环状糊精，混合均匀加适宜浓度的酒精，以20目筛作为造粒工具，将软材紧握成团，压过 20 目筛，使软材变成颗粒状，于65 ℃烘箱里烘干，烘至半干后经20目筛，整粒，再烘干直至形成干颗粒，使其水分含量在5%以下。最后加入处方量薄荷清凉剂、硬脂酸镁和滑石粉，混合均匀后送入压片机压片。

2.2 正交实验优化原辅料配比

根据前期实验结果，石斛超微粉、木糖醇以及β-环状糊精是影响含片的主要因素，因此对此三因素进行考察，选用L9(33)正交实验表进行实验，以石斛多糖含量、含片干燥失重含量、感官评价作为指标，对含片工艺进行评价。因素水平见表1。

表1 正交因素水平

2.3 考察指标

2.3.1 石斛多糖含量测定 标准曲线的绘制：精密量取质量浓度为91 mg-1的葡萄糖对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，分别置于10 mL具塞试管中，各加水补至1.0 mL，精密加入5%苯酚溶液(临时配制)1 mL，加入5 mL硫酸，摇匀，置沸水浴中加热20 min，取出，然后置于冰浴中冷却5 min，以纯净水为空白，按照紫外-可见分光光度法，在488 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线[6]，得回归方程：Y=0.050 2X+0.029 2(r2=0.992 3)。

供试样品溶液的制备：按照文献方法[6]，分别取铁皮石斛含片研细，取粉末(过三号筛)约0.3 g，加水200 mL，加热回流2 h，冷却至室温后转移至250 mL容量瓶中，用少量的水分别洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，定容至刻度，摇匀，滤过。精密量取滤液2 mL，置于15 mL离心管中，精密加入无水乙醇10 mL，涡旋混匀，冷藏1 h，取出，离心(转速为4 000 r/min)20 min，弃去上清液，沉淀加入80%乙醇，洗涤2次，每次8 mL，离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解，转移至25 mL容量瓶中，定容即得。

样品测定：精密量取“2.3.1”项下的多糖供试溶液1 mL，置于10 mL具塞试管中，按标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5%苯酚溶液1 mL”起，依法测定吸光度，通过回归方程计算供试样品的溶液中多糖的含量。

2.3.2 含片干燥失重含量检测 样品处理：将含片研磨成粉末，采用四分法对角取样，约取25 g，置于广口瓶内，混匀待用[7]。

样品测定：量取“2.3.2”项下的样品约3～5 g，置于干燥至恒重的称量瓶中，放入真空干燥箱内，使真空度达到0.09 MPa，温度控制在(80±2)℃，干燥至少4 h，取出称量瓶，加盖后放入干燥器内，冷却至室温后，取出称重，精确至0.000 1 g。记录重量并按照下列公式计算干燥失重的含量：

式中：

X-糖果中干燥失重的含量，%；

m1-样品干燥前和称量瓶的总质量，单位为克(g)；

m2-样品干燥后和称量瓶的总质量，单位为克(g)；

m-称量瓶的质量，单位为克(g)。

2.3.3 感官指标 从色泽、滋味、组织状态这3个方面进行感官评价，每项5分，总分15分，取15个人分数的平均值作为最终评价分数[8]。评价标准，如表2所示。

表2 含片感官质量评分标准

综合评分法：运用综合评分法来评价配方工艺[9-10]，本实验以石斛多糖含量、含片干燥失重含量、感官评价作为指标，对片剂的配方进行评价，综合本片剂的特点和相关文献，权衡各指标对该处方的影响大小分配权重系数，即指标1(石斛多糖含量)的权重系数为30%，指标2(含片干燥失重含量)的权重系数为30%，指标3(感官评价)的权重系数为40%。按此进行加权求和，综合评分：OD=Ai/Amax×30 +Bi/Bmax×30 +Ci/Cmax×40，以OD值进行直观分析，综合评价结果见表3。

2.3.5 数据处理 采用SPSS22.0软件对测得的数据进行分析。

2.4 铁皮石斛含片填充剂筛选

为了考察石斛超微粉、木糖醇、β-环状糊精含量对石斛含片的影响，设计石斛超微粉(A)、木糖醇(B)和β-环状糊精(C)3个因子，每个因子选取3个水平，采用L9(33)正交表进行实验设计。以综合评分法为考察指标，测定结果见表3。

由表3和表4可知，基于对极差R分析，以上因子对铁皮石斛含片综合评分的影响程度，从大到小依次为：石斛超微粉(A)>β-环状糊精(C)>木糖醇超微粉(B)。通过均值K分析，A因素中A2最大，B因素中B2最大，C因素中C2最大，从综合评分来看，石斛含片的最佳配方为A2B2C2，即石斛超微粉为20%，木糖醇超微粉为78%、β-环状糊精为2%。

表3 L9(33)正交设计及石斛含片质量测试结果

表4 主体间效应的检验

但是通过进一步绘制水平与指标关系图(图1)，发现A2B2C2没有在正交表中出现，但为获得最佳方案，通过进一步验证，对A2B2C2，A2B2C3再进行一次实验，综合评分分别为93.12分和92.70分，故可以看出A2B2C2仍优于A2B2C3，故选择A2B2C2，即20%石斛超微粉，78%木糖醇以及2%β-环状糊精。

图1 铁皮石斛含片工艺正交实验水平与指标关系

2.5 铁皮石斛含片润湿剂选择

湿润剂能使粉粒润湿，呈现黏性，以利于制备颗粒，压成片剂。本试验选取乙醇作为润湿剂。由表5结果可知，以75%乙醇制粒，所制颗粒较多，较沉实，干燥易整理，而且压片效果非常好，同时也达到消毒灭菌的效果，故选择75%乙醇作为润湿剂。

2.6 铁皮石斛含片清凉剂选择

加入薄荷脑可使含片口感清凉，但添加过多，会影响铁皮石斛的口感，并且也会产生苦味，带来不良的异味。由表6可以看出，薄荷脑的最佳用量为：每100 g干颗粒喷入2%薄荷脑乙醇溶液4 mL。

表5 铁皮石斛含片润湿剂选择结果

表6 铁皮石斛含片清凉剂的选择结果

3 讨论

本研究通过正交设计试验，确定石斛含片的最佳工艺。以石斛多糖含量、含片干燥失重含量以及感官评价为考察指标，通过多指标综合评分法进行配方比例确定，得出含片的最佳工艺为：铁皮石斛超微粉20%、木糖醇78%、β-环状糊精2%、滑石粉1%、硬脂酸镁0.5%、75%乙醇制粒，每100 g干颗粒喷入2%薄荷脑乙醇溶液4 mL。该工艺下的石斛含片色泽均匀，口感较好，表面光滑。本含片采用了木糖醇代替其他甜味剂，其甜度为蔗糖的1.2倍，既可以防治龋齿，又是适合糖尿病患者的安全甜味剂、营养补充剂和辅助治疗剂。