人参黄精等中药提取物与牛磺酸配伍的抗疲劳功效研究
2021-10-22卢森威王言之李世芬郑晓杰张静姝
卢森威,王言之,李世芬,3,郑晓杰,张静姝,3*
(1.南京医科大学公共卫生学院,南京211166;2.南京医科大学第一临床医学院,南京211166;3.江苏省医药农药兽药安全性评价与研究中心,南京211166;4.石家庄以岭药业股份有限公司,石家庄050035)
体力疲劳是亚健康状态在运动能力[1]方面的一种表现,是影响职业人群生命质量的风险因素之一,长期或过量运动可造成机体内分泌失调、免疫力降低,乃至患肿瘤、心脑血管等疾病风险增高[2]。 基于对生命质量的考量,疲劳相关病症已逐步得到高度重视[3,4]。
抗疲劳处方由人参、黄精、枸杞子和牛磺酸组成,人参为五加科植物人参的干燥根和根茎,是治疗“虚劳内伤”[5]的首选,可补气益肺;黄精为百合科植物黄精、滇黄精或多花黄精的干燥根茎,作为大宗药材[6]其健脾益肾的药食两用价值得到广泛认可[7];枸杞子为茄科植物枸杞的干燥成熟果实,常泡茶、泡酒以清毒明目[8]。牛磺酸是动物体内分布广泛、 含量丰富的一种非蛋白游离氨基酸[9],在人体内主要起到调节渗透压、保护细胞膜稳定的作用[10],可帮助细胞抵抗氧化应激反应[11]。
现拟定8 种由人参、黄精、枸杞子、牛磺酸组成,但配比不同的抗疲劳组方, 设计实验对抗疲劳效果进行检验及比较。
1 材料与方法
1.1 样品
人参黄精等中药提取物及牛磺酸, 由石家庄以岭药业股份有限公司提供,其中提取物的制备方法为:取人参、黄精、枸杞子加水煎煮2 次,提取液滤过,浓缩,干燥,粉碎,即得,每克提取物含生药为2.13g。
1.2 实验动物
选用SPF 级CI/F1 代健康雄性小鼠360 只, 生产许可证号SCXK ( 沪)2018 -0006, 合格证编号:20180006015005。
1.3 组方、剂量设定和样品配制如表1 所示。
表1 组方、剂量设定和样品配制
1.4 试验方法
将小鼠按体重随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个大组,其中每大组90 只小鼠,再分为抗疲劳1 至8 组和溶剂对照组,共9 个小组,每小组10 只小鼠。 I 组进行负重游泳实验;II 组进行血浆尿素测定; Ⅲ组进行肝糖原测定;Ⅳ组进行血乳酸测定。连续灌胃一个月后测定各项缓解体力疲劳指标。
2 结果
2.1 小鼠负重游泳时间
由表2 可见, 抗疲劳1、2、3、4、5 组小鼠负重游泳时间显著长于0g/kg·bw/d 组,差异有统计学意义(P<0.05)。
表2 小鼠负重游泳时间()
表2 小鼠负重游泳时间()
注:“*” 表示与0g/kg·bw/d 比较,P<0.05, 以下同。
组别剂量 动物数 负重游泳时间(g/kg·bw/d) (只) (秒)抗疲劳1 1.00 10 652±165*抗疲劳2 0.57 10 633±153*抗疲劳3 0.97 10 636±140*抗疲劳4 0.53 10 621±119*抗疲劳5 0.93 10 622±266*抗疲劳6 0.50 10 590±281抗疲劳7 0.87 10 546±166抗疲劳8 0.43 10 495±134对照组 0 10 387±106
2.2 小鼠游泳后血浆尿素水平
由表3 可见, 抗疲劳1、2、3、4 组小鼠血浆尿素水平显著低于0g/kg·bw/d 组, 差异有统计学意义 (P<0.05)。
表3 小鼠游泳后血浆尿素水平()
表3 小鼠游泳后血浆尿素水平()
组别剂量 动物数 血浆尿素(g/kg·bw/d) (只) (mmol/L)抗疲劳1 1.00 10 6.02±0.57*抗疲劳2 0.57 10 6.16±0.52*抗疲劳3 0.97 10 6.11±0.61*抗疲劳4 0.53 10 6.34±0.86*抗疲劳5 0.93 10 6.43±0.44抗疲劳6 0.50 10 6.67±0.46抗疲劳7 0.87 10 6.74±0.55抗疲劳8 0.43 10 6.89±0.52对照组 0 10 7.15±0.78
2.3 抗疲劳配方对小鼠肝糖原储备量的影响
由表4 可见, 抗疲劳1、2 组小鼠肝糖原储备量显著高于0g/kg·bw/d 组,差异有统计学意义(P <0.05)。
表4 小鼠肝糖原储备量()
表4 小鼠肝糖原储备量()
组别剂量 动物数 肝糖原(g/kg·bw/d) (只) (mg/g 肝)抗疲劳1 1.00 10 23.0±1.7*抗疲劳2 0.57 10 22.9±3.8*抗疲劳3 0.97 10 22.8±6.8抗疲劳4 0.53 10 20.4±3.1抗疲劳5 0.93 10 20.8±3.3抗疲劳6 0.50 10 20.8±2.0抗疲劳7 0.87 10 19.9±2.5抗疲劳8 0.43 10 19.4±2.0对照组 0 10 18.9±4.3
2.4 小鼠游泳后血乳酸值及其曲线下面积
由表5 可见, 抗疲劳1、2 组小鼠游泳后血乳酸曲线下面积值显著低于0g/kg·bw/d 组, 差异有统计学意义(P <0.05)。
表5 小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲线下面积()
表5 小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲线下面积()
组别剂量 动物数 安静 运动后0 分 运动后休息20 血乳酸曲线(g/kg·bw/d) (只) 血乳酸值 钟血乳酸值 分钟血乳酸值 下面积值抗疲劳1 1.00 10 1.59±0.31 3.96±0.82 2.49±0.45 92±14*抗疲劳2 0.57 10 1.57±0.26 4.12±0.66 2.53±0.73 95±16*抗疲劳3 0.97 10 1.60±0.30 4.15±0.86 2.91±0.89 99±16抗疲劳4 0.53 10 1.16±0.26 4.79±0.76 2.30±0.68 101±12抗疲劳5 0.93 10 1.33±0.32 5.20±0.94 1.65±0.30 101±16抗疲劳6 0.50 10 1.41±0.41 5.41±0.62 1.71±0.40 105±7抗疲劳7 0.87 10 1.49±0.28 5.26±0.83 2.35±0.30 110±10抗疲劳8 0.43 10 1.63±0.30 5.05±0.61 2.82±1.21 112±14对照组 0 10 1.50±0.31 5.54±0.63 2.53±1.38 116±18
3 结论与讨论
参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003 版)有关条例,在本试验条件下,抗疲劳组方研究中抗疲劳1、2具有缓解体力疲劳作用。通过1、3、5、7 组的比较以及2、4、6、8 组的比较,可以发现,当三种中药提取物含量一定时,抗疲劳效果随着牛磺酸配比的增加而增强,或与牛磺酸对自由基的清除效果有关。牛磺酸可显著提高体内SOD 活性,有效降低体内MDA 浓度,通过增强抗氧化防御功能而在一定程度上缓解疲劳产生[12]。
从活性成分功效分析角度出发, 人参可调节多个核心基因进而调节TNF 及IL-17 等一系列信号通路, 从而发挥抗疲劳作用[13]。 黄精的提取成分黄精多糖(PCP1)通过调节糖和脂质的摄取及代谢, 增加小鼠体内能量物质(肝糖原、肌糖原、ATP)的储备,降低代谢物(乳酸、尿素氮)堆积,减少代谢物对细胞及器官的损伤,同时可降低MDA 的含量,提高SOD、GSH-Px 的酶活力,抑制氧化过程,减轻氧化应激所导致的疲劳[14]。 枸杞多糖是枸杞子的一种主要的提取物, 可增加肌糖原储备并改善吞噬细胞的吞噬功能, 从而提升小鼠抗缺氧能力[15,16]。 鉴于复方制剂的不同成分间可能存在协同或拮抗关系, 如何寻求不同药物间的最佳配比以增强药效仍是目前应探索的重要课题。