痰TB-DNA、分枝杆菌核酸、涂片找抗酸杆菌检验对肺结核的诊断分析

杨慧敏，程祥

（喀什地区第一人民医院 检验科，新疆 喀什 844000）

0 引言

在临床中，对于结核病来说，其是因为结核分枝杆菌复合群所引发的慢性感染性疾病，在各类感染性疾病中，其总的病死率处于第一位[1]。对于肺结核而言，其是出现在肺组织、支气管等有关位置中的结核，共包括了肺实质方面的结核、结核性胸膜炎等。而想要控制好结核病，其最为核心的环节就是控制好各类传染源，所以，尽早发现并对结核病患者进行相对应的诊治是十分关键的[2]。现阶段，在我国，结核病的总发现率较低，为此，找到更为精准、更为科学、更为高效的检测方式，对于尽早防控结核病是十分有必要的[3]。本研究特选取喀什地区第一人民医院300例肺结核患者，分析并研究检测痰结核分枝杆菌脱氧核糖核酸（TB-DNA）、分枝杆菌核酸、涂片找抗酸杆菌的应用效果与价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选取2020年1月至2021年3月于喀什地区第一人民医院接收并对其进行检测的300例肺结核患者，把痰结核菌培养当作对照，对全部患者均进行痰TBDNA、分枝杆菌核酸、涂片找抗酸杆菌检测。男182例、118例；年龄19～64岁，平均（41.50±13.56）岁。对全部患者都进行痰结核菌培养，阳性193例、阴性107例，而其中，一同进行痰TB-DNA检测、分枝杆菌核酸检测、涂片找抗酸杆菌检测的患者依次是282例、242例、296例。

1.2 方式。采集标本：对全部患者都进行痰TB-DNA、分枝杆菌核酸、涂片找抗酸杆菌检测。对于血液标本来说，需要在患者住院的当天或是第2 d进行采集，并把其放进肝素抗凝管，在采集结束的2 h中，进行分枝杆菌核酸检测；选出10 mL的胸腔穿刺液标本，把其放进灭菌试管，马上进行痰TB-DNA检测；对于涂片找抗酸杆菌检测来说，在早晨，把深咳脓性痰液当作标本，并把其放进无菌容器，进行送检。检测方式：全部患者的痰标本都已经达标，对于痰TB-DNA、分枝杆菌核酸而言，需要应用聚合酶链式反应方式对其进行检测，借助氢氧化钠溶液对痰液进行稀释，把2 mL放进离心管，设定好12000 r/min，进行5 min的离心，弃去上清液，进行沉淀并加好50μL的DNA提取液，进行混匀，处于100℃的恒温水浴锅，放10 min，在逐步得到冷却直到室温后，应用相一致的转速，进行5 min的离心，把上清液放进聚合酶链式反应管，设定好8000 r/min，进行几秒的离心，放进聚合酶链式反应仪器，进行加热、裂解，提出DNA，借助实时定量聚合酶链式反应技术明确TBDNA，检测最终的结果在送检的第二天能够得到；对于涂片找抗酸杆菌而言，需要借助直接涂片进行抗酸染色而得到，处于显微镜下，观察并检测抗酸杆菌染色载玻片，并对其最终的结果进行记录，检测最终的结果在送检的第二天能够得到；对于痰结核菌培养而言，需要应用改良罗氏培养方式，对菌种进行鉴别，对体现出阳性的标本来说，需要明确分枝杆菌的类型，最终的结果需要2～8周能够得到。

1.3 数据分析处理。研究获取的所有数据均统一采用SPSS 22.0统计进行分析与处理；计数数据统一采用[%（n）]代表，采用χ2检验组间差异，计量数据统一采用（±s）代表，组间差异行t检验；P＜0.05表示差异有意义。

2 结果

2.1 检测结果。经分析表1、表2、表3中的数据可知：痰TB-DNA检测结果、分枝杆菌核酸检测结果、涂片找抗酸杆菌检测结果。

表1 痰TB-DNA检测结果[n（%）]

表2 分枝杆菌核酸检测结果[n（%）]

表3 涂片找抗酸杆菌检测结果[n（%）]

2.2 总阳性率。经分析表4中的数据可知：把痰结核菌培养当作对照，在进行痰TB-DNA、分枝杆菌核酸、涂片找抗酸杆菌检测后，痰分子生物学、痰结核菌培养间具有较为良好的一致性，P＜0.05。

表4 总阳性率[n（%）]

3 讨论

在我国，肺结核总的发生率较高，这类患者的各项监管、诊治为社会甚至是国家均给予了许多负担，所以，肺结核患者的各项早期诊治是临床中急需进行处理的核心性问题[4]。以往临床中在对肺结核患者进行诊断期间，所应用的金标准共包括了痰涂片找到抗酸杆菌、改良罗氏结核菌培养，但是，前者的总阳性率不够理想、标本较易被污染、无法辨别出结核及肺结核杆菌等，而后者所需的培养周期范围于4～8周，所需的时间较久，且因为部分患者仅会出现干咳，不具有痰液，所以，其痰液标本无法达标，较难立即对肺结核进行诊断，也较难尽早对这类患者的病情进行评估[5]。现阶段，在各项新兴的分子生物学技术得到极大地发展后，使得聚合酶链式反应变成了临床中应用十分普遍的检测方式，对于痰TB-DNA而言，其能够对痰液中所具有的结核杆菌核酸进行定量性检测，对于分枝杆菌核酸而言，其能够对痰结核分枝杆菌进行定性性检测，由于核酸处于痰液标本中是十分稳定的，所以，以上各类检测方式均可以更为准确、更为迅速地检出结核杆菌，降低由于标本被污染而引发的各类误差。

在我国，对分子生物学检测方式较少进行具有较大样本量的分析与研究，在本次研究中，在肺结核患者中，痰TB-DNA的总阳性率、分枝杆菌核酸的总阳性率较痰涂片找抗酸杆菌的总阳性率显著更高，P＜0.05；由此证明，痰TB-DNA、分枝杆菌核酸对于总阳性率均具有十分理想的改善效果、价值，且较痰涂片找抗酸杆菌、痰结核菌培养显著更优，最为关键的是可以更为迅速地检出结核分枝杆菌，且可以辨别出结核分枝杆菌、分枝杆菌，对肺结核患者的各项早期诊断是十分关键的。对于聚合酶链式反应来说，其是处于基因水平上，对结核分枝杆菌进行检测，而TB-DNA定量性检测还可以检出痰液中核酸的总浓度，以对各项抗结核治疗给予更多的参照，现阶段，在我国已经把这两类分子生物学检测方式归至相应的诊断标准中，特别是对痰涂片找抗酸杆菌体现出阴性的肺结核患者来说更是十分关键的。

综上所述，肺结核检测工作中应用痰TB-DNA、分枝杆菌核酸较之于痰结核菌培养、涂片找抗酸杆菌能够改善患者总检出率，可以检出患者是否被肺结核所感染，促进其疾病康复。