生产高品质蜂王浆关键要素的探讨

闫 华 ，付 丽，朱锡璇，张国军，朱 黎

(1.国家蜂产业技术体系武汉综合试验站，湖北 武汉 430345；2.武汉市葆春蜂王浆有限责任公司，湖北 武汉 430345；3.湖北神农架林区农业执法支队，湖北神农架442400；4.吉首大学，湖南 吉首 416000)

蜂王浆是由工蜂咽下腺和上颚腺分泌，用于哺育蜂王幼虫和1～3 日龄的工蜂幼虫的白色或淡黄色乳状液体[1]。作为一种较高级的营养保健品，蜂王浆的成分复杂，水分为60%～70%，碳水化合物为10%～16%，蛋白质含量为12%～15%，脂类物质为3%～6.0%，小分子物质包括维生素、矿物质、游离氨基酸等为2%～3%[2]。

蜂王浆对人体有着很高的营养保健价值，能够提高人体免疫力，对心血管疾病也有一定的作用，能够预防衰老和阿尔茨海默症，还有一定的美容功效等[3]。10- 羟基-ɑ- 癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆中的标志性物质，约占蜂王浆总质量的1.4%～2.3%。由于10-HDA （王浆酸） 具有增强免疫力、降血脂、抗辐射等多重功效，近年来，它已成为衡量蜂王浆食用价值的重要指标[4]。长期的科学研究及实践经验证明，蜂王浆的品质与保健功效受王浆的储存条件和储存时间的影响[5-6]。因此本公司的蜂王浆对10-HDA 和蜂王浆储存新鲜度有着很高的要求。 文章主要针对蜂王浆中的10-HDA 含量的变化进行检测和跟踪。

1 材料和方法

1.1 材料

本实验以武汉市葆春蜂王浆有限责任公司2016～2019 年蜂农送来的蜂王浆样本为实验材料。

1.2 仪器和试剂

液相色谱仪SeriesⅢ、吹风机RCY9212型、减压干燥箱DZF-6020、超声波清洗机SK3300H、电子天平AG135。实验所用的主要实验试剂见表1。

表1 本实验所用的主要试剂

1.3 试液制备

将蜂王浆样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀，取约0.5 g，置于已称定的50 mL容量瓶中，加入0.03 moL/L 盐酸1 mL 和水2 mL，搅拌均匀后加入无水乙醇30 mL，边加入边轻轻摇动，再精密加入内标液10 mL(每毫升含内标物约0.65 mg)，用无水乙醇稀释至刻度，立即置超声波浴中超声15 min，在3 000 r/min 下离心10 min 后，放入4℃冰箱冷藏备用。

1.4 蜂王浆中10-HDA 测定

用4.6 mm×250 mm 的不锈钢柱，填充无定形硅胶C18 键合相做色谱柱，检测波长为210 nm，柱温35℃，流速为1 mL/min。精密吸取浓度为0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的10-HDA 标准溶液2 滋L 注入色谱仪，用峰面积比值计算应呈线性，求出校正因子F。吸取试样溶液4 滋L注入色谱仪，按“内标法” 定量。

蜂王浆中10-HDA 计算公式如下：

式中：X2—— 蜂王浆中10-HDA 的含量，%；

F —— 校正因子；

Ai—— 试样中被测组分峰面积；

As—— 试样中内标物峰面积；

ms—— 内标物质量，单位为(g)；

mi—— 试样质量，单位为(g)。

2 结果与分析

葆春蜂王浆公司每年收购的蜂王浆有多批次，所以在计算蜂王浆中10-HDA 的含量时，取每月所有批次蜂王浆中10-HDA 含量的平均值进行分析。

2.1 不同年份检测蜂王浆10-HDA 含量变化

4 年来葆春公司收购的蜂王浆原料中10-HDA 含量的平均值呈增长的趋势，2019年的10-HDA 含量平均值由2016 的1.76%上升到了1.83%。详见图1。2019 年送到公司的蜂王浆样品的10-HDA 含量普遍比往年高。

图1 每年10- HDA平均含量图

2.2 不同地区10-HDA 含量变化

对与葆春公司合作的湖北不同地区生产蜂王浆检测结果进行分析。由图2 可以看出2016-2019 年不同地区蜂王浆的10-HDA 含量存在着较大的差异。湖北省钟祥市2019 年10-HDA 含量最高，京山县2016～2019 年的10-HDA 含量呈上升的趋势，鄂州市的蜂王浆中，2016 年至2018 年10-HDA 含量呈下降趋势，2019 年恢复到了较高水平。黄梅县的10-HDA 含量基本持平，2019 年10-HDA 含量明显下降。2019 年蜂王浆中含有10-HDA含量普遍偏高的情况下，黄梅县的蜂王浆中10-HDA 的含量在2019 年不升反降，黄梅县蜂农今年的王浆生产量是去年的两倍，充分证明是因黄梅县该年生产蜂王浆增加浆条和王台基的数量造成。

图2 不同地区每年10- HDA平均含量

2.3 不同地区10-HDA 平均含量变化

从图3 可以看出鄂州市提供的王浆样本的10-HDA 含量最高，近几年平均达到1.86%，其次是钟祥市达到1.78%，最后是京山县，有1.76%。鄂州市一直是优质王浆的生产地，他们生产高10-HDA 含量的蜂王浆，在市场上也获得了较高的价格。

图3 2016- 2019 年不同地区10- HDA平均含量

3 结论

(1) 蜂种是决定生产蜂王浆品质的最主要因素，高产种王生产不出10-HDA 含量高的蜂王浆，即使其他条件再好也无法达到优质品；蜜王生产的蜂王浆中10-HDA 含量最高，其次是蜜浆王，浆王生产蜂王浆10-HDA 含量最低[7]， 年群产最高达到15 kg 以上，10-HDA 的含量仅为0.6%～0.9%。蜂农们生产蜂王浆使用的王种一般为蜜浆王和浆王。鄂州市蜂农使用的王种正是蜜浆王且为定地饲养。

(2) 蜜粉源充足是生产蜂王浆的重要条件，10-HDA 的含量与特定的蜜源条件有极大的关系[8]。如果蜜粉源不足靠饲喂糖和天然花粉替代品，不能生产优质蜂王浆。不同地区不同年份由于蜜粉源条件不同，生产的蜂王浆中10-HDA 含量略有差别。

(3) 蜂王浆中10-HDA 含量的多少与生产蜂王浆时浆条的数量成正比，浆条越多蜂王浆的产量越高，但10-HDA 的含量必定下降。这就是葆春公司对蜂王浆生产蜂场及示范蜂场一再要求控制好浆条数量的原因。

(4) 种王、蜜源、浆条数量相同时，蜂群强弱是影响蜂王浆10-HDA 含量的因素。

笔者4 年来通过对国家蜂产业技术体系武汉综合试验站和葆春公司示范试验蜂场生产的蜂王浆的10-HDA 含量进行了长期的跟踪检测，认为要想生产优质蜂王浆，以上四个条件缺一不可，因此武汉综合试验站及葆春公司对蜂王浆生产蜂农及示范蜂场主每年都从以上四点进行高质量王浆生产培训。

蜂王浆除了10-HDA 含量高之外，新鲜度也是保证蜂王浆高品质的重要因素。低温保鲜能够很好的保护蜂王浆中的维生素C 及蛋白质不被氧化[6]，储藏温度升高也会导致蜂王浆中糠醛类物质含量增加[9]，低温环境储藏且降低解冻次数能够保证蜂王浆的抑菌效果[10]。保证蜂王浆新鲜度的基本方法就是控制温度，而控制好温度就能确保蜂王浆的维生素C、蛋白质不被氧化，糠醛类物质含量不会升高，抑菌效果不会下降，因此蜂王浆的新鲜度是保证蜂王浆品质的重要因素。这正是葆春公司每年对蜂农的蜂王浆进行严格的新鲜度检测的原因。