绝经后2型糖尿病女性Wnt3a基因多态性与骨代谢的相关性

向清淋 李军 丁瑞 高群 伍雅敏 侯泽鑫

石河子大 医学院第一附属医院内分泌代谢科，新疆 石河子 832000

糖尿病是一种由多种基因及多种环境因素共同作用的慢性代谢性疾病[1]，大部分糖尿病患者是2型糖尿病。骨质疏松是糖尿病常见的并发症。骨质疏松及2型糖尿病已经越来越成为影响中老年健康的慢性流行性疾病。Wnt信号通路被认为是骨质疏松症和糖尿病共同发病机制之一。作为Wnt家族重要成员之一，Wnt3a可以通过多种途径参与细胞生理过程，如通过Wnt/β-catenin调控细胞的更新和分化。目前已有研究表明Wnt3a基因多态性与2型糖尿病、骨质疏松症有明显相关性[2]。Wnt3a 蛋白升高时，抑制成骨细胞增殖，进而导致骨量丢失。但不同种族人群基因的作用机制可能不同，目前Wnt3a基因与我国人群骨密度和骨代谢情况的关联尚缺乏相关研究；其基因多态性与绝经后T2DM女性骨密度、骨代谢情况的相关性尚不明确。

本研究通过测定绝经后女性外周血Wnt3a基因多态性并分析与骨密度、骨代谢和血脂代谢的相关性。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取石河子社区绝经后T2DM女性81例，检测rs708114位点基因多态性，根据rs708114位点基因多态性分为TT组(n=19)和CC/TC组(n=62)。同时检测rs752107基因多态性，根据s752107基因多态性分为CC组(n=44)和CT/TT组(n=37)。T2DM的诊断标准符合1999年WHO推荐的糖尿病诊断标准，BMD的判断标准符合2017年WHO推荐的诊断标准。本研究通过医院伦理委员会批准，研究对象均签署知情同意书。

1.2 纳入标准

①绝经后，意识清楚，语言表达能力正常；②同意参与本研究。

1.3 排除标准

①1型糖尿病；②妊娠糖尿病；③急慢性的心、肝、肾脏疾病；④恶性肿瘤；⑤先天性骨质疏松症；⑥消化道疾病；⑦长期口服激素或对骨有作用的药品者；⑧甲状腺功能亢进、等内分泌代谢疾病；⑨其他疾病引起的绝经。

1.4 研究方法

1.4.1一般资料及生化指标测定：年龄、绝经年限、身高、体重、腰围、臀围、计算腰臀比(WHR)、体质指数(BMI)；使用全自动生化分析仪测定空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血钙(Ca)、血磷(P)。高压液相法测糖化血红蛋白(HbAlc)，双能X线骨密度仪测股骨颈骨密度(F-BMD)等指标。

1.4.2基因多态性检测：运用飞行时间质谱分析技术对Wnt3a基因rs752107、 rs708114位点多态性进行检测，结果用Sequenom 软件进行分型。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 TT组、CC/TC组一般临床资料比较

两组患者年龄、绝经年限、体质指数、腰臀比等一般资料比较，差异无统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 组间一般基线资料比较Table 1 Comparison of general baseline data between the

2.2 TT组、CC/TC组患者生化指标和股骨颈骨密度比较

与CC/TC组比较，TT组患者FPG显著升高[(8.84±3.65) mmol/L vs (7.10±1.68) mmol/L,P=0.005]；HbA1c显著升高[(8.11±1.78)% vs (7.15±0.87)%，P=0.002]；血清Ca显著升高[(2.34±0.20) mmol/L vs (2.24±0.15) mmol/L,P=0.032]。两组患者TG、HDL-C、LDL-C、血清P差异无统计学意义(P>0.05)。TT组ALP、F-BMD有增高趋势，但差异未见统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 组间生化指标和股骨颈骨密度比较Table 2 Comparison of biochemical indexes and bone mineral density of the femoral neck between the

2.3 CC、TC/TT组一般临床资料比较

两组患者年龄、绝经年限、体质指数、腰臀比等一般资料比较，差异无统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 组间一般基线资料比较Table 3 Comparison of general baseline data between CC and TC/TT groups

2.4 CC、TC/TT组生化指标比较

CC组和TC/TT组患者HbA1c、TG、HDL-C、LDL-C、血清Ca、血清P、ALP和F-BMD等指标差异均无统计学意义(P>0.05)。CC组FPG有增高趋势，但差异未见统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 CC、TC/TT组生化指标比较Table 4 Comparison of biochemical indexes between CC and TC/TT group

3 讨论

糖尿病是骨密度降低和骨代谢异常的危险因素[3]，因为高血糖会导致成骨细胞、破骨细胞活性降低，严重者可导致成骨细胞凋亡、损伤骨细胞外基质[4-6]。绝经后，卵巢功能逐渐衰退，女性体内雌激素逐渐降低，抑制成骨作用而促进破骨活动，因此容易出现骨质疏松。Wnt 家族调控了骨组织的生长发育[7]，Wnt3a是其激活经典通路。相关研究[8-9]发现，Wnt3a 蛋白升高时，抑制成骨细胞增殖，进而导致骨量丢失。

本研究探讨了Wnt3a基因rs752107位点、rs708114 位点与绝经后T2DM女性骨代谢的相关性，结果发现rs708114 位点与骨密度和骨代谢指标无明显相关性。提示本人群rs752107位点不是T2DM女性骨代谢异常的易感基因。但国外Rafael等[2]研究显示rs752107位点与骨代谢有关，与本研究不一致。这一差异可能是由于rs752107位点多态性对骨量的作用本身也受环境、地域、种族的影响，不同人种间具有不同的遗传背景，同时2型糖尿病及骨质疏松也是多基因、多位点、多环境危险因素共同影响的疾病[10-12]。本研究发现rs708114 位点基因多态性分布与血清Ca水平有关，与骨密度、血清P等无明显相关性，血清Ca水平是骨代谢的重要指标[13]。研究显示rs708114位点基因多态性与先天性脊柱侧凸遗传易感性有关[14]。rs708114位点基因多态性与2 型糖尿病、骨密度是否相关尚缺乏相关研究。但由于本研究仅观察到rs708114位点与血清Ca水平有关，因此需要进一步研究证实二者相关性。且P1NP、CTX及OCN也是骨代谢的重要指标，但本研究未检测，为其中一个不足之处。

本研究探讨了Wnt3a基因rs752107位点、rs708114 位点与绝经后T2DM女性血糖代谢的相关性，显示Wnt3a基因rs752107位点与血糖代谢无关。而rs708114 位点与FPG、HbA1c明显相关。FPG、HbA1c是绝经后T2DM患者血糖代谢的重要指标，FPG反映当前血糖控制情况，而HbA1c则反映一段时间内患者血糖控制情况[15-19]。FPG、HbA1c水平升高，说明患者血糖控制不理想，病情严重，更容易发生心脑血管不良事件，是T2DM患者预后不良的独立预测指标。说明Wnt3a基因rs708114 位点突变与T2DM的易感性有关，且与患者病情严重度有一定关联。本研究还探讨了Wnt3a基因rs752107位点、rs708114 位点与绝经后T2DM女性血脂代谢的相关性，结果发现Wnt3a基因rs752107位点、rs708114 位点与血脂代谢无明显相关性。

综上所述，新疆石河子地区绝经后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs708114位点基因突变与血糖代谢有关。新疆石河子地区绝经后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs708114位点基因突变可能与骨代谢有关，但尚需要进一步临床研究证实。新疆石河子地区绝经后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs752107位点与骨代谢、糖代谢均无明显相关性。新疆石河子地区绝经后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs752107位点、rs708114 位点与血脂代谢均无明显相关性。