人参果中4种有机磷类农药残留检测方法的改进

马占清(青海省农产品质量安全检测中心，青海 西宁 810000)

人参果是青海省有名的地方特产，人参果的外形与人类的心脏很相似，是一种果汁量很丰富的特色水果，有很高的营养价值[1-2]。由于青海气候[3]冬寒夏凉、日温差大，人参果多数种植在蔬菜大棚之中，同其他温室作物类似，容易滋生病虫害，农药使用量也较大。因此，人参果中农药残留的检测也非常重要。农产品中农药残留检测和畜产品及饲料中兽药残留检测，主要采用气相色谱仪、气相色谱质谱联用仪、液相色谱仪、液相色谱质谱联用仪等仪器进行检测[4-9]。近几年来青海省人参果的种植和市场需求都有了很大的提升，本文就人参果中4种有机磷类农药(特丁硫磷、乐果、甲基对硫磷、对硫磷)残留的检测，适当改进了农业农村部NY/T761标准检测方法中样品的前处理步骤，通过前处理方法的改进提高了样品检测效率和农药残留提取的回收率。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1试验样品：样品为采摘自青海省民和县金星村某蔬菜大棚中的人参果，已经碎样处理。

1.1.2仪器与设备：AH-30全自动匀浆机(睿科仪器有限公司生产)，G16高速离心机(长沙英泰仪器有限公司生产)，N-1200B旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司生产)，MS 3basis旋涡混合器(IKA仪器有限公司生产)，Agilent Technologies 7890A气相色谱仪(美国安捷伦公司生产)，配备火焰光度检测器(FPD)，色谱柱：DB-1701(30m×0.25mm×0.25um毛细色谱柱)。

1.1.3试剂与材料：乙腈(色谱纯)、丙酮(色谱纯)、氯化钠(分析纯)。特丁硫磷(Terbufos)、乐果(Dimethoate)、甲基对硫磷(Parathion-methyl)、对硫磷(Parathion)4支农药标准品购于农业农村部环境保护科研监测所(天津)，浓度为100ug/ml。

1.2 试验方法

本试验采用《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》(NY/T761-2008)[10]中第1部分，蔬菜和水果中有机磷类农药多残留的测定进行检测，其中对前处理部分进行了适当的改进。

1.3 试验原理

本试验采用乙腈提取人参果样品中的农药残留，经匀浆提取，提取溶液经过盐析、液-液萃取、离心静置分层、旋转蒸发浓缩、用丙酮定容至5ml后过0.2um滤膜，用气相色谱仪的火焰光度检测器(FPD)进行检测。用外标法进行定性和定量分析。

1.4 标准工作溶液的配制

本试验选取5个浓度梯度，吸取4种农药的标准溶液各100ul于10ml容量瓶中，用丙酮稀释定容配制成浓度为1ug/ml的混合标准工作溶液，保存在-7℃冰箱中。检测时通过稀释混合标准工作溶液得到100、200、400、500、800ng/l共5个浓度的混合标准工作溶液，上机进行气相色谱分析，绘制4种农药的标准曲线。

1.5 前处理

分别称取人参果样品6份各25.0g于100ml聚乙烯离心管中，取其中3份为检测样品，其中2份做为加标，1份做为基质，配基质标准溶液。各加入50ml乙腈，匀浆2min，然后再将5～7g氯化钠加入离心管中，盖上离心管的盖子，剧烈震荡1min后放入离心机中以5000r/min离心5min，使乙腈和水相分层。吸取10.0ml上清液，放入平底烧瓶中，在旋转蒸发仪上旋转蒸发至净干，用丙酮溶解定容至5.0ml，过0.2um滤膜，装瓶待测。

1.6 上机检测

用气相色谱仪上机检测，色谱柱：DB-1701(30m×0.25mm×0.25um)。设置色谱柱升温程序：开始温度设定为50℃，以10℃/min升至120℃保持1min；再以20℃/min升至230℃保持15min。进样口温度为250℃，检测器(FPD)温度为240℃，载气(高纯氮≥99.999%)流速为30ml/min，燃烧气(高纯氢≥99.999%)流速为75ml/min，助燃气(空气)流速为100ml/min。采用不分流进样，进样量为1ul。

2 结果分析

2.1 四种农药人参果基质标准曲线

用气相色谱仪检测4种农药的标准溶液，特丁硫磷、乐果、甲基对硫磷、对硫磷的保留时间分别为15.235min、16.936min、18.604min、20.172min。由表1表2可以看出，在100～800ng/l范围内，标准溶液浓度与峰面积之间线性关系良好。

表1 4种农药标准溶液浓度对应的峰面积

表2 4种农药人参果基质标准溶液线性方程

2.2 人参果样品检测结果

通过上机检测，此次检测的3份人参果样品中均未检出上述4种农药。2份加了4种农药的加标样品，检测得出加标样品的含量及回收率如表3，计算得出回收率都在合格范围内。

表3 人参果加标样品检测结果

3 结果与讨论

实验结果表明，通过适当改进前处理方法后4种农药的提取回收率都在合格范围内。有机磷类农药用火焰光度检测器(FPD)检测时受基质影响较大，因此采用空白基质配标准溶液和空白基质加标回收率的方法确保结果的准确性。上机测定要及时，测定过程中先测试剂空白和样品空白，再由低浓度到高浓度依次测定标准溶液，最后测定考核样品。为了降低因仪器不稳定造成的误差，每个样品上机平行测定3次，三次之间的偏差小于10%，结果取3次测定的平均值。由于人参果含水量比较高，加入氯化钠盐析时需要充分混匀使样品中的水分达到过饱和状态，以提高人参果中农药的提取率。离心机离心时间控制在4～5min之间，离心速率在5000r/min以上，通过离心使有机相和水相的分层更加明显，由于样品的匀浆提取、盐析、离心分层三个步骤都在离心管中完成，与标准检测相比，前处理步骤节省了时间，提高了提取的效率。