不同杀菌剂对3种马铃薯病害病原菌的毒力测定

惠娜娜，李继平，王 立 ，郑 果，李培玲，郭子坤

(1.甘肃省农业科学院 植物保护研究所，兰州 730070；2.农业部天水作物有害生物科学观测实验站，甘肃天水 741200)

马铃薯 [SolanumtuberosumL.]是仅次于水稻、玉米和小麦的世界第四大重要粮食作物。中国是全球马铃薯的最大生产国，甘肃省是中国重要的马铃薯脱毒种薯繁育、商品薯生产及加工的重要基地[1]。甘肃地处中国西北干旱冷凉区，得天独厚的地理环境造就当地马铃薯淀粉含量高、食用风味佳、口味独特的优良品质，现已形成定西市、兰州市为核心的中部高淀粉及菜用型区域，张掖市为核心的河西灌区与以临夏州、白银市为核心的沿黄灌区全粉、薯条(薯片)加工型马铃薯区域，陇南市西北部、天水南部为核心的早熟菜用型马铃薯区域和高海拔脱毒种薯生产区域[2]，优势产区占到70%以上。马铃薯产业已成为当地带动经济发展、促进农业增效、农民增收、保障粮食安全的特色支柱产业[3]。随着产业升级及种植结构的调整，马铃薯种植面积不断扩大，加之气候条件和防治手段落后使得马铃薯病害在局部地区个别年份爆发危害，严重影响马铃薯产业的健康可持续发展。2017-2018年笔者对甘肃省不同生态区马铃薯病害发生情况进行调查，发现河西地区前期马铃薯主要真菌病害有黑痣病、早疫病，后期主要有黑痣病、晚疫病、枯萎病和黄萎病，其中早疫病、黑痣病、晚疫病发生较重。中东部地区前期主要有黑痣病、早疫病、后期为晚疫病和黑痣病。

目前，马铃薯病害主要依靠化学防治，单一药剂的频繁使用易产生抗药性，降低防治效果。在实际生产应用中，通过限制使用频次、使用复配产品，以及与不同作用机理的杀菌剂交替使用，以延缓抗性的产生和发展，其中复配是用于规避风险的主要措施[4]。随着科学技术的发展和人们对食品安全的日益重视，利用生物杀菌剂防治植物病害等绿色防控手段越来越受到业界的关注[5]。因此，在本试验中选用100万孢子/g寡雄腐霉WP、0.3%四霉素AS和3%中生菌素WG3种生物农药及50%锰锌·氟吗啉WP、20%烯肟·戊唑醇SC 和30%苯甲·嘧菌酯SC3种复配剂针对马铃薯晚疫病、早疫病和黑痣病病原菌开展室内毒力试验，旨在筛选出适宜甘肃省马铃薯病害的理想防治药剂，为该省马铃薯病害综合治理提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

供试菌株：马铃薯晚疫病菌(Phytophthorainfestans)、马铃薯早疫病菌(Alternariasolani)、马铃薯黑痣病菌(Rhizoctoniasolani)，甘肃省农业科学院植物保护研究所经济作物病害研究室保存。

培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基。

供试药剂：100万孢子/g寡雄腐霉WP，捷克生物制剂有限公司；0.3%四霉素AS，辽宁微科生物工程股份有限公司；3%中生菌素WG，福建凯立生物制品有限公司；50%锰锌·氟吗啉WP，沈阳科创化学品有限公司；20%烯肟·戊唑醇SC，拜耳作物科学(中国)有限公司；30%苯 甲·嘧菌酯SC，世科姆化学贸易(上海)有限公司。

1.2 室内毒力测定方法

采用生长速率法测定。在超净工作台中，用直径为4.0 mm的打孔器从活化5 d的菌落边缘打取菌饼，分别移接到含有药剂5个梯度浓度 (0.05、0.25、1.25、6.25、31.25 μg/mL)的培养基平板上，置25 ℃恒温培养箱黑暗培养7 d，用游标卡尺十字方向测定菌落直径，求平均值，减去4.0 mm菌饼直径，即为菌落增长直径，计算相对抑制率。

菌丝抑制生长率=(对照菌落生长直径-处理菌落生长直径)/对照菌落生长直径×100%。

1.3 数据处理

采用Microsoft Excel 2007及DPS数据处理系统软件进行分析，计算各药剂对菌株的有效抑制中浓度(EC50)、95%置信区间、卡方测验(χ2)、相关系数(r)及毒力回归方程。

2 结果与分析

对马铃薯晚疫病菌室内毒力测定结果表明(表1)，6种杀菌剂对晚疫病菌均有一定的毒力，回归方程的相关系数为0.883 4～0.991 7，相关性良好，其中生物农药0.3%四霉素AS和100万孢子/g寡雄腐霉WP对马铃薯晚疫病菌具有较好的毒力，EC50分别为0.009 3 μg/mL和 0.041 2 μg/mL，其次为20%烯肟·戊唑醇SC和50%锰锌·氟吗啉WP，EC50分别为0.435 9 μg/mL和1.216 2 μg/mL，3%中生菌素WG EC50为7.494 1 μg/mL，30%苯甲·嘧菌酯SC对晚疫病菌毒力较弱，EC50为11.270 1 μg/mL。

对马铃薯早疫病菌室内毒力测定结果表明(表1)，生物农药100万孢子/g寡雄腐霉WP对马铃薯早疫病菌丝生长抑制作用最好，毒力最强，EC50为0.000 1 μg/mL；其次为20%烯肟·戊唑醇SC，EC50为0.003 9 μg/mL；50%锰锌·氟吗啉WP、0.3%四霉素AS和30%苯甲·嘧菌酯SC EC50分别为0.192 5 μg/mL、0.208 4 μg/mL和 0.227 8 μg/mL；3%中生菌素WG EC50为 2.035 6 μg/mL。

表1 不同杀菌剂对3种马铃薯病害病原菌的毒力Table 1 Indoor toxicity of fungicides to three pathogens of potato

对马铃薯黑痣病菌室内毒力测定结果表明(表1)，100万孢子/g寡雄腐霉WP对马铃薯黑痣病菌毒力最强，其EC50为 0.052 0 μg/mL，其次为0.3%四霉素AS EC50分别为0.265 9 μg/mL，20%烯肟·戊唑醇SC EC50为1.114 0 μg/mL，30%苯甲·嘧菌酯SC和50%锰锌·氟吗啉WP对马铃薯黑痣病菌有一定的毒力，3%中生菌素WG对黑痣病菌毒力较弱，EC50为 20.266 6 μg/mL。

3 结论与讨论

20%烯肟·戊唑醇SC是广谱内吸性三唑类杀菌剂戊唑醇与新一代甲氧基丙烯酸类杀菌剂烯肟菌胺的复配剂，具有低毒、光谱、高效、传导的特性，具有预防和治疗作用并可调节作物生长，对水稻、小麦、果蔬病害有较好的作用。30%苯甲·嘧菌酯SC是由苯醚甲环唑和嘧菌酯复配而成的内吸性杀菌剂，不仅能有效铲除病害，还能增强植株的抗病能力。50%锰锌·氟吗啉WP是由代森锰锌和氟吗啉复配而成，具有预防、治疗和铲除的作用，对霜霉病、疫霉病作用好[4-7]。本试验结果表明3种复配剂对马铃薯晚疫病、早疫病和黑痣病均有一定的毒力，其中20%烯肟·戊唑醇SC表现较好。

生物农药因其低毒、易分解、无污染、安全环保、不易产生抗药性等特点在当前推进农药减量控害中备受青睐。100万孢子/g寡雄腐霉WP是一种重要的微生物农药，可以抵抗多种病原菌对植物的侵害，具有广谱、高效、促生和增产等特点，具有极大的应用潜力和价值[8-9]，该杀菌剂对作物、环境安全，可作用于作物各个生育期，不产生抗性[10]，对辣椒疫霉病、葡萄霜霉病有较好的防治效果[11-12]。0.3%四霉素AS具有内吸抑菌活性，阻止病菌侵入和扩展，适用各种作物的多种真菌、细菌病害的防治。中生霉素是由淡紫灰链霉菌海南变种产生的抗生素，可使真菌菌丝变形，抑制孢子萌发并直接杀死孢子，对农作物细菌性病害和部分真菌性病害有很好的防治效果，具有高效、低毒、安全等特性，不污染环境，并能够诱导植物产生抗性，促进植物生长等特点。乔广行等[13]研究表明，生物制剂100万孢子/g寡雄腐霉WP对马铃薯黑痣病病菌有较好的抑制作用。本试验结果表明，100万孢子/g寡雄腐霉WP和 0.3%四霉素AS对马铃薯早疫病、晚疫病、黑痣病菌丝生长有较好的抑制作用，3%中生菌素WG对3种病原菌毒力较弱。寡雄腐霉的促生、防病作用与其孢子的萌发和菌丝生长密切相关，田间自然环境对孢子的萌发和生长有一定的影响[7]；因此，田间防治效果有待进一步验证。

室内毒力结果表明，生物菌剂100万孢子/g寡雄腐霉WP和0.3%四霉素AS和复配剂20%烯肟·戊唑醇SC对马铃薯晚疫病菌、早疫病菌和黑痣病菌有较好的毒力。本试验结果限于室内毒力测定，未进行盆栽试验和田间试验，皿内抑菌效果不能等同于田间防治效果，在田间还受到环境条件、寄主抗性等多种因素的影响，各药剂田间防治效果有待进一步研究。