含低聚体原花青素的敷料对CO2点阵激光术后面部皮肤修复作用

余一飞，岳学状，吴 迪

0 引 言

随着CO2点阵激光的应用，痤疮凹陷性瘢痕的治疗取得了理想的疗效；但激光的热效应、光化学效应可损伤皮肤的屏障功能，主要表现为激光术后创面出现红斑、水肿及灼热等炎症反应，皮肤屏障功能受损[1]。透明质酸具有保湿、促进创面愈合及减少瘢痕等作用，常用于激光治疗术后的护理[2-3]。原花青素具有抗氧化、清除自由基、抗炎及抑菌作用[4]。为寻求更加理想的方法来减轻激光术后炎症反应，缩短愈合时间，修复皮肤屏障功能，本研究旨在观察含低聚体原花青素敷料对CO2点阵激光治疗面部痤疮凹陷性瘢痕术后的疗效和安全性。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年1月至2020年12月于明光市人民医院门诊诊断为痤疮凹陷性瘢痕患者62例，其中，男41例、女21例；年龄18～35岁，平均(26.9±4.5)岁；病程1～7年，平均(4.5±2.2)年。对所有患者进行痤疮瘢痕权重(ECCA)评分。入选标准：①符合轻至重度痤疮后凹陷性瘢痕的诊断标准；②无明确器质性疾病；③Fitzpatrick皮肤类型为Ⅲ-Ⅳ型；④整个研究期间进行防晒；⑤不口服及外用抗组胺及糖皮质激素类药物。排除标准：①有增生性瘢痕及瘢痕疙瘩史；②有日光暴晒史；③有光敏药物服用史；④单纯疱疹及炎性痤疮等皮肤感染者；⑤6个月内面部激光或化学剥脱治疗者；⑥孕妇及哺乳期患者；⑦入组前4周内外用含碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子等促进表皮再生的药物者；⑧外用胶原蛋白类制品有过敏史或对异种蛋白敏感者：⑨有严重心、肝、肾及内分泌等系统疾病、肿瘤和免疫缺陷疾病的患者。62例患者按照随机数字表法分为试验组和对照组，采用信封法进行随机化分组隐藏，每组31例。本研究获明光市人民医院伦理委员会批准[伦审药临字第(2018-023)]，患者均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1 治疗方法2组患者均行CO2点阵激光治疗。术前l h予复方利多卡因乳膏(每克乳膏含丙胺卡因25 mg，利多卡因25 mg，同方药业集团有限公司生产)外用，进行表面麻醉，采用美国科医人公司的Lumenis超脉冲CO2激光，波长10 600 nm，AcuScan微扫描手具，具有超脉冲CO2阵深、浅2种模式。根据瘢痕的严重程度及面积选择不同的治疗密度及能量，治疗能量为10～70 mJ/cm2，治疗密度为5%～10%，治疗终点为皮肤轻度发红或点状出血。点阵激光术后即刻，2组患者均外用4 ℃冰箱冷藏的敷料敷于整个面部20 min，2次/d，持续1周；1周后1次/d，持续1周；共2周。试验组外敷医用愈肤生物膜(水剂活性敷料)[蓝科恒业医疗科技(长春)有限公司]，主要成分包括壳聚糖为载体的低聚体原花青素(注册证号为吉械注准20182140152)；对照组患者外敷含透明质酸的敷料(石家庄昌鸿医疗器械公司)。2组患者均要求术后创面禁水5 d。恢复期间不强行剥脱痂皮，不对治疗部位进行擦洗，创面愈合后注意防晒和保湿。

1.2.2评价指标①急性炎症反应的等级评分：治疗结束冷敷敷料20 min后，对2组患者面部的红斑、水肿及灼热等急性炎症反应进行等级判定和评分。0分:无红斑、水肿、灼热；1分:红斑明显，水肿和灼热较轻；2分:红斑及灼热明显，水肿较轻，有轻微的灼痛；3分:红斑、水肿及灼热、灼痛及点状渗血均明显[2]。②痂皮脱落时间：记录2组患者全部痂皮脱落时间，于治疗结束1个月随访时提交数据。治疗前和治疗后1个月对患者进行ECCA评分。③皮肤屏障功能评估：于激光治疗开始前、治疗后24 h及治疗后7 d选取患者面部皮损的相应部位，用皮肤生理功能测试仪进行角质层含水量和经表皮水分丢失的测定。每次测试部位为面颊同一区域[5]。采用Sclar水分测量仪(日本Selarg公司)测量表皮角质层含水量。予TEWL测试仪Tewametera 210C(德国Courage+Khazaka公司)测量TEWL。测量条件：在无阳光直射的室内进行，室温20～25 ℃，空气湿度为50%～60%。测量前不使用任何化妆品，在候诊室休息2 h。测量时取坐位，测量仪器与测量部位皮肤表面垂直接触(测试头与皮肤之间使用一次性圆环状灭菌纸片隔离，避免交叉感染)，每一部位测量3次，取平均值。

2 结 果

2.1 一般资料62例患者均完成了临床观察。2组患者年龄、性别构成比、ECCA评分及激光治疗能量密度差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表 1 入组患者基线资料

2.2急性炎症反应的等级评分敷料冷敷20 min结束后，试验组患者急性炎症反应评分0、1、2、3分者分别为0、9、19和3例，对照组分别为0、3、22和6例，差异有统计学意义(U=363.5，P<0.05)。

2.3痂皮脱落时间试验组痂皮脱落时间为(13.2±2.2)d，对照组为(14.1±2.03)d，2组比较差异无统计学意义(t=1.731，P>0.05)。

2.4皮肤屏障功能评估

2.4.1 角质层含水量的变化采用两因素重复测量方差分析方法，判断2组患者不同观察时间角质层含水量变化。经Mauchly's球形假设检验，不符合球形分布(P<0.05)。采用多元方差分析校正结果显示，组别和时间的交互作用对角质层含水量的影响有统计学意义(F=6.107，P<0.05)。因此，对组别和时间进行单独效应的检验。

治疗前，2组角质层含水量差异无统计学意义(P=0.08)。治疗后24 h，试验组的角质层含水量低于对照组，差值为1.35484[95%CI(0.189 38～2.899 06)](P=0.043)。治疗后7 d，2组角质层含水量差异无统计学意义(P=0.226)，见表2。

在试验组中，时间因素对角质层含水量的单独效应差异有统计学意义(P<0.01)。治疗前与治疗24 h后患者角质层含水量差异有统计学意义(P<0.01)，差值为4.194[95%CI(2.166～6.221)]；治疗后24 h与治疗后7 d患者角质层含水量差异有统计学意义(P<0.01)，差值为2.355[95%CI(1.405～3.305)]；而治疗前与治疗7 d患者角质层含水量比较差异无统计学意义(P=0.050)，见表2。

在对照组中，时间因素对角质层含水量的单独效应也有统计学意义(P<0.01)。与治疗前比较，治疗后24 h及治疗7 d患者角质层含水量均升高，差异有统计学意义(P<0.05)，差值分别为6.935[95%CI(4.816～9.055)]和2.258[95%CI(0.588～3.928)]。治疗后24 h与治疗后7 d含水量差异有统计学意义(P<0.01)，差值为4.677[95%CI(3.724～5.631)]，见表2。

2.4.2TEWL的变化采用两因素重复测量方差分析方法，判断2组患者不同观察时间TEWL的变化。经Mauchly's球形假设检验，不符合球形分布(P<0.05)，采用Greenhouse-Geisser进行结果校正，交互项组别和时间无交互作用(P=0.318)。因此，分别分析时间和组别的主效应。结果显示，不考虑时间因素，2组TEWL比较差异无统计学意义(P=0.238)；而时间因素对TEWL有影响(P<0.01)，见表2。

表 2 激光治疗后不同时间点2组患者皮肤角质层含水量和TEWL比较

2.5激光治疗前、后ECCA权重评分的变化组间比较，2组患者治疗前和治疗后1个月ECCA评分差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较，2组患者治疗后ECCA评分较治疗前降低(P<0.01)，见表3。

表 3 入组患者治疗前和治疗后1个月ECCA评分变化分)

2.6不良反应2组患者创面均无感染。试验组2例(6.5%)患者、对照组3例(9.7%)患者出现色素沉着，2组色素沉着发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。敷料使用过程中，2组患者均无红斑、灼热、水疱、鳞屑、丘疹，未发生与外用敷料有关的不良反应。

3 讨 论

从全球范围看，痤疮的疾病负担仍较重，有关痤疮和痤疮瘢痕的的临床研究和系统评价仍相对缺乏[6-7]。痤疮瘢痕目前治疗手段仍相对缺乏，疗效也欠佳。CO2点阵激光是目前应用比较广泛的治疗手段之一。CO2点阵激光分为剥脱性点阵激光和非剥脱性点阵激光[8]。剥脱性点阵激光有 CO2和Er：YAG激光2类，其中CO2点阵激光临床较为常用。水分子是CO2激光的靶分子，从而产生热效应及其他相关生物学效应，激光治疗后常出现红斑、水肿、灼热及刺痛等反应，部分患者在术后还出现皮肤干燥及色素沉着等[2,9]。

透明质酸是葡糖醛酸和乙酰氨基葡糖组成的大分子链状多糖，透明质酸具有调节表皮角质形成细胞、促进创伤愈合、调控胶原合成及抗炎等作用；透明质酸修护生物膜具有恢复皮肤屏障和良好的保湿作用[10]。动物实验研究表明，透明质酸可促进激光术后局部创伤面的愈合，在开放性烧伤创面外用透明质酸可以使烧伤面愈合加快、减轻瘢痕[11-13]。透明质酸是激光治疗术后常用的促进皮肤恢复的辅助治疗方法。

原花青素作为一种特殊的黄酮类化合物，以儿茶素、表儿茶素及其取代物作为结构单元，根据缩合单元的多少，命名为原花青素二聚体、三聚体、四聚体等低聚体和多聚体，生物活性较强的是低聚体[14]。原花青素低聚体广泛存在于植物之中，具有高效抗氧化活性，其清除氧自由基的能力比天然抗氧化剂，如β胡萝卜素、槲皮素及茶多酚等都强。其抗氧化性是维生素C的20倍、维生素E的50倍，是最强效的自由基清除剂，有强大的抗氧化作用[4]；原花青素也具有减轻水肿、保护毛细血管及抑制炎性递质释放作用，对创面的愈合具有促进作用[15]。壳聚糖是一种高分子天然生物活性多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解性，还具有抗菌、消炎作用，可减少创面渗出、促进创伤组织再生、修复及愈合等作用[16]。

本研究发现，含有低聚原花青素以及含透明质酸的敷料在抑制激光引起的急性炎症反应方面，低聚原花青素优于透明质酸，可能与低聚原花青素有强大的清除自由基作用，抑制了炎症反应，促进皮肤愈合等作用有关。本研究还发现，CO2点阵激光治疗后24 h，试验组患者角质层含水量低于对照组，推测其原因与低聚原花青素的抗炎作用有关，减轻了局部炎症性水肿。治疗7 d后，2组患者TWEL相仿，差异无统计学意义，说明低聚原花青素和透明质酸对TEWL恢复作用相同。此外，2组患者结痂脱落时间、ECCA评分等方面差异无统计学意义，但在急性炎症和水肿方面，含低聚原花青素明显优于含透明质酸的敷料，提示含有低聚原花青素的敷料，能够有效减轻炎症反应，促进皮肤屏障功能的修复，缩短皮损恢复时间，是较为理想的皮肤强脉冲光术后辅助治疗方法。